В статье приведены результаты скрининговой оценки колонизационной резистентности слизистой оболочки полости рта ВИЧ-инфицированных людей, полученные путем изучения ряда микробиологических параметров (адгезивное число, адгезивний индекс, показатель колонизационной резистентности). Выявлено достоверное увеличение значений анализируемых показателей при наиболее тяжелых проявлениях пародонтопатологии и при выраженных клинических признаках иммунодефицита.
Ключевые слова: ВИЧ-инфекция, пародонтопатология, адгезивное число, адгезивный индекс, показатель колонизационной резистентности.
Известно, что полость рта является уникальной экологической нишей организма. Высокое разнообразие микроорганизмов и наличие значительного количества факторов, которые способствуют их размножению и росту, создают сложные условия функционирования микробиома [1–3]. Тонкое равновесие во взаимоотношениях резидентной, гетеробионтной и патогенной микрофлоры значительно важнее для людей с иммунодефицитными состояниями, особенно для ВИЧ-инфицированных [2].
Слизистая оболочка полости рта (СОПР) является внешним барьером, который предупреждает попадание микроорганизмов во внутреннюю среду организма. Первой линией защиты от патогенных микроорганизмов является колонизационная резистентность СОПР — совокупность защитных факторов организма и конкурентных, защитных свойств нормальной микрофлоры, которые придают ей стабильность и предупреждают колонизацию слизистой оболочки посторонними микроорганизмами. Колонизационная резистентность — один из факторов местного иммунитета, который отображает механическую защиту и антагонизм нормальной микрофлоры. Важное значение в формировании колонизационной резистентности имеет нормальная микрофлора, эпителиоциты и их рецепторы, комплементарные адгезинам бактерий, которые формируют микробиоценоз контретного биотопа [4,5]. Высокий уровень колонизационной резистентности СОПР свидетельствует о нормальном функционировании пристеночного микробного консорциума (биопленки) и про физиологическое взаимодействие микробной системы полости рта [1,6].
При этом микрофлора полости рта человека представляет собой высокочувствительную индикаторную систему, которая реагирует качественными и количественными сдвигами на изменение состояния разных органов и систем организма в целом [1,7,8]. Вот почему диагностировать эти сдвиги особенно важно у людей со статусом ВИЧ для предупреждения возникновения оппортунистических инфекций, а значит сохранения и продолжения жизни при поддержании ее высокого качества.
Целью нашего исследования стал анализ скрининговой оценки колонизационной резистентности СОПР ВИЧ-инфицированных людей.
Было обследовано 94 ВИЧ-инфицированных пациентов в возрасте 23–49 лет, которые составили группу исследования (І). В группу сравнения (ІІ) вошли 35 человек без статуса ВИЧ в возрасте 21–45 лет. Они не имели особенностей бытового и трудового анамнеза. Клиническое и лабораторное обследование пациентов проводилось на базе Полтавского областного Центра профилактики и борьбы со СПИДом, Полтавской областной клинической стоматологической поликлиники и кафедры патологической анатомии с биопсийно-секционным курсом ВГУЗ Украины «УМСА» в течении 2011–2013гг.
После общепринятого стоматологического субъективного и объективного обследования пациентов проводили скрининговую оценку колонизационной резистентности СОПР ВИЧ-инфицированных и не инфицированных ВИЧ людей (В. В. Череда и соавт., 2010) [9, 10], которая включает определение адгезивного числа (АЧ) (среднее количество оральных стрептококков, адгезированных на 1 буккальном эпителиоците), адгезивного индекса (АИ) (процент буккальных эпителиоцитов, которые адгезировали более 10 оральных стрептококков) и показателя колонизационной резистентности (ПКР) в баллах. При условии АЧ=20–60 оральных стрептококков, АИ>50 % ПКР равняется 1 баллу, что характеризует высокий уровень колонизационной резистентности слизистой оболочки полости рта. АЧ<20 и АИ<50 % соответствует ПКР 0 баллов и характеризует угнетение барьера колонизационной резистентности СОПР и снижение антагонистических свойств нормальной микрофлоры. При условии АЧ>60, АИ=100 % ПКР равняется 2 баллам и свидетельствует об увеличении напряжения колонизационного барьера, количественном разрастании микроорганизмов, среди которых могут быть не только симбионтные, но и условно-патогенные и патогенные.
После полоскания пациентом полости рта водой, шпателем с округленными краями брали соскоб с внутренней поверхности щеки, готовили мазок на стерильном обезжиренном предметном стекле, высушивали, фиксировали этиловым спиртом 96 %, окрашивали за Романовским-Гимзой. При помощи светового микроскопа «Биолам Д-11» под иммерсионным объективом (×90) в мазке проводили подсчет АЧ, АИ и ПКР [9].
Обработка результатов исследования осуществляли с использованием методов математической статистики с расчетом средних выборочных значений (М) и ошибок средних значений (m) в группах обследованных людей. Отличия считали достоверными при общепринятой в медико-биологических исследованиях вероятности ошибки p<0,05. Вероятность ошибки оценивали по таблицам Стьюдента с учётом объема групп исследования.
Полученные средние результаты подсчета АЧ и АИ для групп исследования и сравнения отличались недостоверно. Так, АЧ для ВИЧ-инфицированных пациентов составляет 53,04±1,89 оральных стрептококков, а для пациентов без статуса ВИЧ — 49,26±2,99. АИ в группе исследования составил 78,55±2,33 %, а в группе сравнения — 70,31±3,87 %.
Показатель колонизационной резистентности, который отвечает 0 баллов, характеризует угнетение барьера колонизационной резистентности СОПР и свидетельствует о снижении антагонистических свойств нормальной микрофлоры, обнаружен у 6 ВИЧ-инфицированных пациентов (6,38 % случаев) и у 4 не инфицированных ВИЧ (11,43 %). Увеличение напряжения колонизационного барьера, количественное разрастание микроорганизмов и показатель колонизационной резистентности на уровне 2 баллов зарегистрирован у 25 ВИЧ-инфицированных (26,6 %). В группе сравнения аналогичное состояние колонизационной резистентности СОПР диагностировано у 7 пациентов (20 %). ПКР 1 балл, что характеризует высокий уровень колонизационной резистентности СОПР, обнаружен у 27 человек со статусом ВИЧ (28,72 %) и у 13 человек из группы сравнения (37,14 %). Дисбаланс показателей, которые рассчитывали и несоответствие АЧ и АИ, не позволяющее определить ПКР, наблюдали у 36 пациентов со статусом ВИЧ (38,3 %) и у 11 человек не инфицированных ВИЧ (31,43 %).
Нами проведен анализ изменений АЧ и АИ соответственно тяжести поражения тканей пародонта. Указанные результаты приведены в таблицах 1 и 2. Обнаружено достоверное увеличение значений указанных показателей только при генерализованном пародонтите ІІІ степени тяжести. С одной стороны это демонстрирует истощение адаптивных механизмов и повышение уровня колонизации СОПР микроорганизмами, в том числе и пародонтопатогенами. С другой стороны, повышение значений АИ можно трактовать как следствие снижения процессов десквамации, что согласовывается с литературными данными [11].
Таблица 1
АЧ у ВИЧ-инфицированных пациентов в зависимости от тяжести пародонтопатологии
|
Показатель |
Значение |
р |
||||
|
Показатель 1 |
Показатель 2 |
Показатель 3 |
Показатель 4 |
Показатель 5 |
||
|
1. АЧ при гингивите |
48,86±6,19 |
|
p>0,05 |
p>0,05 |
p>0,05 |
< 0,01 |
|
2. АЧ при генерализованном пародонтите начальной степени тяжести |
45,00±8,51 |
p>0,05 |
|
p>0,05 |
p>0,05 |
< 0,01 |
|
3. АЧ при генерализованном пародонтите І степени тяжести |
47,35±3,42 |
p>0,05 |
p>0,05 |
|
p>0,05 |
< 0,01 |
|
4. АЧ при генерализованном пародонтите ІІ степени тяжести |
52,11±3,09 |
p>0,05 |
p>0,05 |
p>0,05 |
|
< 0,001 |
|
5. АЧ при генерализованном пародонтите ІІІ степени тяжести |
68,57±1,58 |
< 0,01 |
< 0,01 |
< 0,01 |
< 0,001 |
|
Примечание: р — вероятность ошибки по таблицам Стьюдента.
Таблица 2
АИ у ВИЧ-инфицированных пациентов в зависимости от тяжести пародонтопатологии
|
Показатель |
Значение |
р |
||||
|
Показатель 1 |
Показатель 2 |
Показатель 3 |
Показатель 4 |
Показатель 5 |
||
|
1. АИ при гингивите |
68,43±7,57 |
|
p>0,05 |
p>0,05 |
p>0,05 |
< 0,01 |
|
2. АИ при генерализованном пародонтите начальной степени тяжести |
62,33±10,74 |
p>0,05 |
|
p>0,05 |
p>0,05 |
< 0,01 |
|
3. АИ при генерализованном пародонтите І степени тяжести |
66,16±3,53 |
p>0,05 |
p>0,05 |
|
< 0,01 |
< 0,01 |
|
4. АИ при генерализованном пародонтите ІІ степени тяжести |
80,57±4,38 |
p>0,05 |
p>0,05 |
< 0,01 |
|
< 0,001 |
|
5. АИ при генерализованном пародонтите ІІІ степени тяжести |
100 |
< 0,01 |
< 0,01 |
< 0,01 |
< 0,001 |
|
Примечание: р — вероятность ошибки по таблицам Стьюдента.
Проведен также анализ изменений АЧ и АИ согласно стадиям основного заболевания. Соответствующие данные приведены в таблицах 3 и 4.
Таблица 3
АЧ у ВИЧ-инфицированных пациентов в зависимости от стадии иммунодефицита
|
Показатель |
Значение |
р |
|||
|
Показатель 1 |
Показатель 2 |
Показатель 3 |
Показатель 4 |
||
|
1. АЧ у пациентов с І стадией ВИЧ-инфекции |
32,00±3,71 |
|
p>0,05 |
<0,001 |
<0,001 |
|
2. АЧ у пациентов с ІІ стадией ВИЧ-инфекции |
42,73±5,42 |
p>0,05 |
|
<0,01 |
<0,001 |
|
3. АЧ у пациентов с ІІІ стадией ВИЧ-инфекции |
59,49±1,88 |
<0,001 |
<0,01 |
|
p>0,05 |
|
4. АЧ у пациентов с ІV стадией ВИЧ-инфекции |
61,77±2,87 |
<0,001 |
<0,001 |
p>0,05 |
|
Примечание: р — вероятность ошибки по таблицам Стьюдента.
Таблица 4
АИ у ВИЧ-инфицированных пациентов в зависимости от стадии иммунодефицита
|
Показатель |
Значение |
р |
|||
|
Показатель 1 |
Показатель 2 |
Показатель 3 |
Показатель 4 |
||
|
1. АИ у пациентов с І стадией ВИЧ-инфекции |
50,17±4,14 |
|
<0,05 |
<0,01 |
p>0,05 |
|
2. АИ у пациентов с ІІ стадией ВИЧ-инфекции |
66,18±5,83 |
<0,05 |
|
<0,01 |
p>0,05 |
|
3. АИ у пациентов с ІІІ стадией ВИЧ-инфекции |
83,64±2,72 |
<0,01 |
<0,01 |
|
<0,05 |
|
4. АИ у пациентов с ІV стадией ВИЧ-инфекции |
62,64±9,71 |
p>0,05 |
p>0,05 |
<0,05 |
|
Примечание: р — вероятность ошибки по таблицам Стьюдента.
АЧ имеет тенденцию к увеличению с прогрессированием ВИЧ-инфекции, тогда как АИ является изменчивым, а максимальное значение обнаружено при ІІІ стадии ВИЧ-инфекции. Результаты вычисления АИ и АЧ позволили обнаружить широкий диапазон разброса значений обоих показателей, что позволяет допустить их высокую восприимчивость к посторонним сопутствующим факторам и изменчивость, а значит недостаточное диагностическое и прогностическое значение для пациентов, у которых есть патология тканей пародонта на фоне ВИЧ-инфекции.
Обнаружено, что показатели АЧ и АИ у ВИЧ-инфицированных и не инфицированных ВИЧ людей достоверно не отличаются. Но было констатировано достоверное увеличение значений показателей, которые изучались, при наиболее тяжелых проявлениях пародонтопатологии и при выраженных клинических признаках иммунодефицита. ПРК свидетельствует о лучшем уровне колонизационной резистентности у пациентов без статуса ВИЧ.
Итак, микробиологические методы исследования позволяют выявить ряд особенностей микробиологической колонизации полости рта на фоне ВИЧ-инфекции при разной степени поражения тканей пародонта.
Литература:
1. Непорада К. С. Хронічний генералізований пародонтит як наслідок порушення біоплівки біотопу порожнини рота / К. С. Непорада, А. О. Микитенко, Д. С. Янковський, В. П. Широбоков, Г. С. Димент // Современная стоматология. — 2013. — № 3(67). — С.22–25.
2. Терапевтическая стоматология / [А. В. Алимский, С. М. Будылина, Ю. И. Воробьев и др.]; Под ред. проф. Л. А. Дмитриевой. — М.: МЕДпресс-информ, 2003. — 896с.
3. Косенко К. Н. Профилактическая гигиена полости рта / К. Н. Косенко, Т. П. Терешина. — Одесса, 2003. — 287с.
4. Лобань Г. А. Мікробіологія, вірусологія та імунологія порожнини рота / Г. А. Лобань, В.І.Федорченко. — Полтава, 2004. — 122с.
5. Мюллер Х.-П. Пародонтология / Мюллер Х.-П. — [Пер. с нем.]. — Львов: ГалДент, 2004. — 256с.
6. Shoji Takenaka Direct Visualization of Spatial and Temporal Patterns of Antimicrobial Action within Model Oral Biofilms / Shoji Takenaka, Harsh M.Trivedi, Audrey Corbin, Betsey Pitts, Philip S.Stewart // Applied and environmental microbiology. — 2008, Mar. — P. 1869–1875.
7. Martinus J.Verkaik Oral biofilm models for mechanical plaque removal / Martinus J.Verkaik, Henk J. Busscher, Minie Rustema-Abbing, Anje M. Slomp, Frank Abbas, Henny C. van der Mei // Clin. Oral Invest. — 2010. — 14. — P.403–409.
8. Ya-Ling Liu Progress toward understanding the contribution of alkali generation in dental biofilms to inhibition of dental caries / Ya-Ling Liu, Marcelle Nascimento, Robert A.Burne // International Journal of Oral Science. — 2012. — 4. — P.135–140.
9. Пат. 51373 Украина, МПК (2009) G01N 33/48. Способ скрининговой оценки колонизационной резистентности слизистой оболочки полости рта /Череда В. В., Петрушанко Т. О., Лобань Г. А. — u201001414. — Подано 11.02.10; опубл.12.07.10. — Бюл. № 13.
10. Перушанко Т. А. Роль колонизационной резистентности полости рта в развитии кариеса / Т. А. Петрушанко, В. В. Череда, Г. А. Лобань // Стоматология. — 2013. — Т.92, № 1. — С 43–45.
11. Іленко Н. В. Аналіз цитологічних показників епітелію слизової оболонки порожнини рота ВІЛ-інфікованих осіб / Н.В.Іленко, Т. О. Петрушанко, Д.Є.Ніколенко // Проблеми екології та медицини. — 2013. — Т.17, № 1–2. — С.4–12.
