Проведенные нами исследования системы глутатиона ротовой жидкости 105 детей разных групп наблюдения (дети без фоновой патологии со здоровым пародонтом (22 человека -1 группа) и с хроническим катаральным гингивитом (18 человек — 2 группа), с длительностью заболевания сахарным диабетом до 5 лет — 35 человек (3 группа), более 5 лет — 30 человек (4 группа)) выявили отличие показателей. Здоровые дети с интактным пародонтом имели результаты, которые достоверно отличались от показателей других групп исследования. У детей с хроническим катаральным гингивитом на фоне сахарного диабета показатели значительно ухудшались при длительности заболевания больше 5 лет в сравнении с показателями детей других исследуемых групп.
Ключевые слова: дети, хронический катаральный гингивит, сахарный диабет, система глутатиона, ротовая жидкость
Исследованиями установлены основные механизмы и патогенетическое значение продуктов перекисного окисления липидов в патогенезе многих заболеваний [1,3]. Это относится и к стоматологической патологии, особенно при заболеваниях тканей пародонта, состояние которых ухудшается при наличии у детей фоновой патологии. Сахарный диабет в настоящее время достаточно часто встречается у детей. Его тяжесть и длительность течения влияет на проявления стоматологических заболеваний [2]. Состояние тканей пародонта зависит от местных и общих факторов. Особое место принадлежит функционированию системы антиоксидантной защиты, которая регламентирует свободнорадикальные процессы в клетках и тканях, что способствует обеспечению свободнорадикального гомеостаза в организме в целом и в полости рта, в частности. Система глутатиона, включающая собственно глутатион и три фермента (ГП — глутатионпероксидаза, ГР — глутатионредуктаза, глутатионтрансфераза), связывает свободные радикалы, восстанавливает перекиси, продукты перекисного окисления липидов, фосфолипидов мембран, белков, нуклеиновых кислот и выводит их из организма в виде нетоксичных коньюгатов [4,5]. Сульфгидридная группа (SH) является основным инструментом глутатиона в реализации антиоксидантной защиты и детоксикационного действия [6]. Глюкозо-6-фосфатдегидрогеназа (Г-6 ФДГ) — цитозольный фермент участвует в процессе поддержания уровня восстановленного глутатиона в клетке. Г-SH (GSH) — восстановленный глутатион является внутриклеточным антиоксидантом, который инактивирует свободные радикалы [4]. Поэтому изучение этих показателей с возможностью их регуляции в будущем является важным звеном в профилактике и лечение стоматологических заболеваний, в том числе и хронического катарального гингивита.
Объекты и методы исследования. Для решения поставленной цели нами было проведено стоматологическое и лабораторное обследование 105 детей 12 лет. Больных сахарным диабетом, находившихся на стационарном лечении в детском эндокринологическом отделении Коммунального городского учреждения «Областная детская клиническая больница» г. Черновцы было 65 (с длительностью до 5 лет — 35 человек (3 группа), более 5 лет — 30 человек (4 группа)). Группы сравнения составили дети без фоновой патологии со здоровым пародонтом (22 человека -1 группа) и с хроническим катаральным гингивитом (18 человек — 2 группа). Сбор ротовой жидкости детей для параклинического исследования осуществлялся утром после двукратного полоскания ротовой полости дистиллированной водой. Материал получали путем сплевывания без стимуляции слюноотделения в объеме 5–6 мл. Транспортировка и хранение материала происходили при температуре -5Сᵒ. Перед проведением биохимических анализов ротовую жидкость центрифугировали в течение 15минут при скорости 3000 об./мин. Определялись следующие показатели:
− Содержание SH-групп с помощью реактива Эллман [И. Ф. Мещишен, Н. Григорьева, 2002];
− Активность глутатион-S-трансферазы методом Habig W. H. [1974];
− Активность глутатионредуктазы по методу Pinto R. E., Bartley V. [1969]
− Активность глутатионпероксидазы оценивали по Могену В. М. [1986];
− Активность глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы согласно [Путилин Ф. Э., Зоидзе С. Д., 1982], по Гесс, Скарнелли и Пирс
Статистическая обработка материала проводилась по Стьюденту. Достоверными считались результаты при р≤0,05.
Результаты исследования. Мы выявили разницу всех исследуемых показателей у детей групп наблюдения. Здоровые дети с интактным пародонтом имели результаты, которые достоверно отличались от показателей других групп исследования.
Так, показатель Г-SH уменьшался в зависимости от состояния соматического здоровья ребенка и состояния тканей пародонта. Наиболее низкий показатель выявлен у детей с сахарным диабетом длительностью более 5 лет с хроническим катаральным гингивитом. Он был в 2,18 раза ниже, чем у здоровых детей, в 1,55 раза — чем у соматически здоровых детей с хроническим катаральным гингивитом, в 1,14 раза — чем у детей с хроническим катаральным гингивитом и сахарным диабетом длительностью меньше 5 лет. У детей с сахарным диабетом показатель Г-SH имеет различия с учетом длительности основного заболевания, но они не достоверны в отличие от показателей других групп исследования.
Такую же ситуацию наблюдали при изучении ферментов (глутатионтрансферазы (Г-ST), глутатионпероксидазы (ГП), глутатионредуктазы (ГР), которые принимают непосредственное участие в процессах перекисного окисления, связывая свободные радикалы, которые повреждающе воздействуют на ткани организма человека. У детей на фоне сахарного диабета показатели значительно ухудшаются при длительности заболевания больше 5 лет в сравнении с показателями детей других исследуемых групп.
Глюкозо-6-фосфатдегидрогеназа поддерживает уровень восстановленного глутатиона, который является внутриклеточным антиоксидантом. Его снижение способствует и уменьшению показателя восстановленного глутатиона. Так сравнение показателей детей 1 и 4 группы выявило разницу в 2,86 раза, 2 и 4 группы — в 1,66 раза, 3 и 4 группы — в 1,12 раза.
Таблица
Показатели системы глутатиона ротовой жидкости детей групп наблюдения (М±m)
Группы детей, количество |
Показатели системы глутатиона (М±m) |
||||
Г-SH (кмоль/мг белка) |
Г-ST (нмоль/мин мг белка) |
ГП (нмоль/мин мг белка) |
ГР (нмоль/мин мг белка) |
Г-6 ФДГ (нмоль/мин мг белка) |
|
1группа (n=22) |
8,74±0,21 |
231,44±12,14 |
269,73±8,77 |
20,21±0,41 |
18,39±0,31 |
2 группа (n=18) |
6,2±0,09 |
161,37±4,85 |
396,15±5,70 |
13,62±0,19 |
10,68±0,16 |
р 1 |
<0,05 |
<0,05 |
<0,05 |
<0,05 |
<0,05 |
3 группа (n=35) |
4,55±0,06 |
132,79±3,12 |
436,87±4,16 |
9,11±0,99 |
7,17±0,06 |
р 2 |
<0,05 |
<0,05 |
<0,05 |
<0,05 |
<0,05 |
р 3 |
<0,05 |
<0,05 |
<0,05 |
<0,05 |
<0,05 |
4 группа (n=30) |
4,01±0,11 |
116,69±2,49 |
459,28±3,44 |
8,04±0,08 |
6,43±0,06 |
р 4 |
<0,05 |
<0,05 |
<0,05 |
<0,05 |
<0,05 |
р 5 |
<0,05 |
<0,05 |
<0,05 |
<0,05 |
<0,05 |
р 6 |
>0,05 |
>0,05 |
>0,05 |
>0,05 |
>0,05 |
Примечания:
р1 — достоверность различий показателей детей 1 и 2 групп;
р2 — достоверность разницы показателей детей 1 и 3 групп;
р3 — достоверность разницы показателей детей 2 и 3 групп;
р4 — вероятность разницы показателей детей 1 и 4 групп;
р5 — вероятность разницы показателей детей 2 и 4 групп;
р6 — вероятность разницы показателей детей 3 и 4 групп.
Выводы . Изучение системы глутатиона ротовой жидкости детей показали, что здоровые дети с интактным пародонтом имели результаты, которые достоверно отличались от показателей других групп исследования. У детей с хроническим катаральным гингивитом на фоне сахарного диабета показатели глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы, глутатионпероксидазы, глутатионредуктазы, глутатионтрансферазы, восстановленного глутатиона значительно ухудшаются при длительности заболевания больше 5 лет в сравнении с показателями детей других исследуемых групп.
Перспектива дальнейшего исследования. Полученные результаты требуют более детального изучения взаимосвязи процессов перекисного окисления липидов и антиоксидантной защиты ротовой жидкости у детей с заболеваниями тканей пародонта на фоне сахарного диабета для дальнейшей разработки и создания лечебного комплекса, направленного на регулирование этих процессов, что даст возможность снизить показатели заболеваемости тканей пародонта у этой группы детей, что и будет задачей нашего дальнейшего исследования.
Литература:
- Денисенко О.І. Окисна модифікація білків як чинник патогенезу алергодерматозів / О.І. Денисенко // Український журнал дерматології, венерології, косметології. — 2004.- № 1.- С.23–26.
- Маркевич В.Е, Глущенко Н.В., Радченко І.П. Клініко-епідеміологічні особливості перебігу ЦД 1-го типу у дітей та підлітків / В. Е. Маркевич, Н. В. Глущенко, І.П. Радченко // Вісник Сумського державного університету. Сер.Медицина. — 2011- № 1.- С.183–192.
- Гнатюк В. В. Гендерні та вікові особливості вільнорадикального окиснення та антиоксидантного захисту при десинхронозі / Гнатюк В. В., Кононенко Н. М. // Вісник Вінницького національного медичного університету. — 2014 — № 2. — С.363–366.
- Мещишен І.Ф. Глутатіон: обмін і функції / І.Ф Мещишен, В. П. Пішак, Н. П. Григор’єва //Основи обміну речовин та енергії.- Чернівці,2005.-С.123–130.
- Бабак О. Я. Глутатион в норме и при патологии: биологическая роль и возможности клинического применения / О. Я. Бабак // Здоров’я України. — 2015. — № 1.- С. 22–23.
- Козлов Ю. П. Перекисное окисление липидов (ПОЛ) как основа свободно-радикальных реакций в клетках организма /Ю. П. Козлов // Альманах мировой науки. — 2016.- № 1. — С.8–20.