Динамика изменений кристаллографической картины десневой жидкости при гингивите у детей 7–11 лет

Была изучена динамика изменений кристаллографической картины десневой жидкости у 68 больных с хроническим катаральным гингивитом у детей возрасте 7–11 лет. Сбор десневой жидкости осуществлялся по методу Барера Г. М. с соавт. Последующее кристаллографическое исследование проводилось по методике, разработанной Н. В. Булкиной с соавт. Проведенное кристаллографическое исследование с количественной морфометрией поясов кристаллизации десневой жидкости у 7–11 летних у детей с здоровым пародонтом и хроническим катаральным гингивитом показано, что кристаллографическая картина фаций десневой жидкости имеет свои особенности, которые выражаются в изменении показателей радиусов краевой и переходной зоны с одновременным уменьшением радиуса и процента площади зоны солевого центра у больных с хроническим катаральным гингивитом. Причем, процент площади зона солевого центра уменьшается по мере распространенности хронического генерализованного катарального гингивита. Параллельно с нарастанием степени распространенности хронический катаральный гингивит в фациях десневой жидкости увеличивалось и разнообразие микроскопической картины. Нарастал полиморфизм кристаллических образований и формировались маркеры патологии. При хроническом генерализованным катаральным гингивите площадь краевой зоны — 0,233 ± 0,002 и переходная зона — 0,410 ± 0,002 увеличиваются по сравнению с показателями кристаллограмм десневой жидкости, взятой у лиц со здоровым пародонтом, краевая зона — 0,182 ± 0,002; переходная зона — 0,306 ± 0,003. Площадь же зона солевого центра, напротив, уменьшается у пациентов с хронический генерализованный катаральный гингивит до 0,355 ± 0,002 по сравнению с лицами с условно здоровый пародонт 0,511 ± 0,003.

Ключевые слова: десневая жидкость, ДЖ, воспалительные заболевания пародонта ВЗП, хронический катаральный гингивит, ХКГ, хронический очаговый катаральный гингивит, ХОКГ, хронический генерализованный катаральный гингивит, ХГКГ, условно здоровый пародонт, УЗП, кристаллографическое исследование, КИ, краевая зона, КЗ, переходная зона, ПЗ, зона солевого центра, ЗСЦ.

Одной из важнейших задач стоматологии являются профилактические мероприятия, направленные на предупреждение кариеса и воспалительных заболеваний пародонта (ВЗП), особенно в молодом возрасте [10, 11, 20, 26].При высокой распространенности ВЗП многие вопросы патогенеза, связанные с биохимическими механизмами их возникновения, изучены недостаточно [10, 11, 19, 22].Известно, что полость рта постоянно омывается двумя важными физиологическими жидкостями — слюной и жидкостью десневых щелей, которые важны для экосистемы полости рта. При возникновении ВЗП увеличивается количество выделяющейся десневой жидкости (ДЖ) и изменяется её биохимический состав [8, 9, 18, 19], что широко используется в стоматологии в качестве высокоинформативного теста для дифференциальной диагностики болезней пародонта [5, 6, 7, 9,18, 20, 27,28].Однако проведение биохимических исследований ДЖ крайне затруднено из-за её незначительного количества, трудностей сбора, дороговизны и трудоемкости исследования. В связи с этим в настоящее время широкое распространение получило кристаллографическое исследование (КИ)с микроскопическим изучением высушенной капли (синоним: фация) биологических жидкостей. Сложные динамические процессы, протекающие в биожидкостях при высыхании, являются природной нанотехнологией [2, 24,29,30] и отражаются в морфологических особенностях структур, образующихся во время кристаллизации образцов [3,4]. В опубликованной научной литературе имеется достаточно большое число сообщений о динамике изменений кристаллографической картины нестимулированной смешанной слюны при патологии полости рта и пародонта [5, 14, 15,18, 21, 22,25]. Однако менее изученным объектом КИ является ДЖ. При этом, большая часть публикаций содержит сведения об изменении кристаллограмм ДЖ у лиц старше 18 лет [12, 13,15, 16, 17], а сообщений об изменениях кристаллографических свойств ДЖ у детей в норме и при ВЗП при изучении современной научной литературы нами не было обнаружено.

В связи с вышеизложенным, цель работы– изучение динамики изменений кристаллографической картины ДЖ при хроническом катаральном гингивите (ХКГ) у детей 7–11 лет.

Материалы иметоды.Для изучения динамики изменений кристаллограмм ДЖ у детей 7–11 лет нами были сформированы 3 группы: I группа — 27 детей с условно здоровым пародонтом (УЗП),II группа — 49 больных с хроническим очаговым катаральным гингивитом (ХОКГ) иIII группа — 19 больных с хроническим генерализованным катаральным гингивитом (ХГКГ). Всем детям, включенным в исследование, проводилось стандартное клиническое обследование с оценкой пародонтологического статуса. В исследование не включались дети с общесоматической патологией и больные, получавшие антибиотикотерапию в течение предыдущих 6 месяцев.

Кристаллизаты (синоним: фация) ДЖ получали следующим образом. Сбор ДЖ осуществлялся по методу Барера Г. М. с соавт. [7, 9]. ДЖ брали в области зубов 16, 11, 24, 31, 36, 44. Перед исследованием зубы и прилегающую к ним десну тщательно очищали от зубного налета, изолировали от слюны ватными валиками и высушивали. Несколько полосок фильтровальный бумаги размером 154 мм с заостренным кончиком вводилив десневую борозду, пародонтальный карман или в область межзубного промежутка на 5 минут, не доводя до дна. Затем полоски фильтровальной бумаги высушивались при комнатной температуре (22–25°С) и относительной влажности 60–70 % в течение 2 часов. Последующее КИ проводилось по методике, разработанной Н. В. Булкиной с соавт. [12]. Полоски фильтровальной бумаги помещали в пробирки, заливали 100 мкл дистиллированной воды, закрывали пробками и помещали в термостат на 2 часа при температуре 37°С для растворения солей и белков, аккумулированных в полосках. Далее пробирки с содержимым центрифугировали при 3000 об/мин. в течение 10 минут. Надосадочную жидкость (2мкл) наносили полуавтоматическим дозатором на маркированное сухое обезжиренное предметное стекло, установленное на горизонтальной поверхности, по три капли каждого образца. Предметные стекла накрывали чистой пластиковой крышкой и высушивали при температуре 22–25°С в течение 4–12 часов. При завершении дегидратации кристаллизаты ДЖ подвергали микроскопическому исследованию с помощью микроскопа «Leica DM 1000 LED» и приложением для морфометрии Leica Application Suite Version 3.7.0. Световую микроскопию и количественную морфометрию поясов кристаллизации, а также описание морфотипов кристаллов осуществляли во всех трёх образцах, полученных от каждого ребенка, при увеличениях микроскопа ×40, ×100 и ×400. Динамика изменений в кристаллизатах ДЖ у больных с ХКГ изучалась с помощью количественных (радиусов КЗ и ПЗ, процент площади ЗСЦ) и качественных (изоморфизм или полиморфизм кристаллических образований и структур) критериев. Микроскопически измеряли: общий радиус фации (R_o), радиус зоны солевого центра (ЗСЦ) (R₁), ширину (радиус) переходной зоны (ПЗ) (R₂),ширину (радиус) краевой зоны (КЗ) (R₃). Затем по общеизвестной формуле S_о=πR_o² вычисляли общую площадь фации (S_о) и по формуле S₁=πR₁² — площадь ЗСЦ (S₁). Площадь кольца КЗ (S₂) вычисляли по формуле: S₂=S_о-π(R₁+R₂)². Площадь ПЗ (S₃) вычисляли по формуле: S₃=S_о-S₁-S₂. Далее процент площади, занимаемой каждой из зон кристаллизации, вычисляли по общепринятой формуле.

Собственные результаты. Данные количественного сравнительного морфометрического анализа образцов микрокристаллизации ДЖ у детей с УЗП и больных с ХКГ представлены в таблице № 1. Как следует из таблицы, снижение показателей радиусов КЗ наблюдалось в зависимости от степени распространенности ХКГ. Так у детей I группы радиус КЗ составлял 12,7±3,3 µm, у больных II группы — 10,5±4,9, а у пациентов III группы–5,1±0,64 µm (I-III группы — р<0,001). У больных с ХГКГ было установлено достоверное снижение показателей радиуса КЗ (5,1±0,64 µm) по сравнению с детьми с УЗП и ХОКГ (I-III,II-III р<0,001–0,05).

Таблица 1

Радиус ПЗ также достоверно увеличивался у больных II группы (20,7±5,0µm) по сравнению с детьми I группы (15,2±3,7µm)и больными III группы (15,1±1,38µm)(I-II, II-III — р<0,05).

Абсолютные показатели площади ЗСЦ и показатели процента, занимаемого площадью ЗСЦ, были достоверно ниже у больных с ХГКГ (89,2±3,4 %) по сравнению с больными II группы (94,7±2,6 %) и I группы (95,97±1,8 %) (I-III–р<0,05).

Качественный кристаллооптический анализ фаций ДЖ также выявил различия в микроскопической картине кристаллизатов ДЖ у детей с УЗП и у больных с ХКГ. Так, для фаций ДЖ у детей I группы была характерна общая бедность структур, краевая зона была представлена 2 поясами: светлой полосой снаружи и узкой темно-серой полосой внутри. ПЗ состояла из серой полосы с микроглобулами и чечевицеобразными кристаллами, которые иногда собирались в конгломераты (Рис. № 1а). В периферической части ЗСЦ встречались участки, состоящие из микроглобул, выстроенных цепочками, с формированием сетчатоподобного рисунка без центров кристаллизации, а также единичные полупрозрачные центры кристаллизации в виде цветков хризантемы (Рис. № 1b, ç).В центральной части ЗСЦ наблюдались большие бесструктурные поля неправильной формы, заполненные небольшим количеством глобул и чечевицеобразных кристаллов с низкой плотностью рисунка и единичными эпителиоцитами без ядер (Рис. № 1а, ç).

Рис. 1. Микроскопическая картина фации ДЖ у детей I группы:а) 3 пояса кристаллизации: тонкие светлая и темно-серая полосы в КЗ, гомогенная с микроглобулами и чечевицеобразными кристаллами ПЗ (стрелки) и преимущественно пустая ЗСЦ с небольшим количеством кристаллов в виде микроглобул и единичных мелких центров кристаллизации; b) микроглобулы, выстроенные цепочками с сетчатоподобным рисункомбез центров кристаллизации с низкой плотностью рисунка в ЗСЦ; ç) скопление микроглобул слева внизу и 2 полупрозрачных центра кристаллизации в виде цветков хризантемы, низкая плотность рисунка в ЗСЦ. а — иссл. № 176, жен. 10 лет с УЗП; b — иссл. № 99, жен. 10 лет с УЗП; ç — иссл. № 175, муж. 8 лет с УЗП. Полузакрытая диафрагмa;увеличение: а, b — ×40; ç — ×400.

Рис. 2. Микроскопическая картина фации ДЖ у детей II группы: а) общий вид фации ДЖ с умеренной плотностью рисунка в ЗСЦ; b) узкие и тонкие светлая и серая полосы в КЗ, гомогенная серая с глобулами ПЗ, полупрозрачные папоротникообразные и 5–8 лучевые асимметричные астроподобные кристаллы на периферии ЗСЦ; ç) периферическая часть ЗСЦ с умеренной плотностью рисунка: полупрозрачные папоротникообразные кристаллы и кристаллы фосфата кальция (стрелки); d) асимметричные астроподобные кристаллы в виде 5–8 лучевых звезд с центральной симметрией на периферии ЗСЦ; е) среди хаотичных абортивных папоротникообразных кристаллов без симметрии очаг патологической кристаллизации вокруг двух эпителиоцитов без ядер (стрелка); f) множественные тонкие дендритоподобные кристаллы с изогнутыми ветвями в ЗСЦ с крестообразным центром патологической кристаллизации (стрелка); g) хаотичные папоротникообразные кристаллы с короткими тонкими ветвями (абортивные) и мелкие крестообразные очаги патологической кристаллизации (стрелки) в центральной части ЗСЦ. а, е — иссл. № 51, жен. 11 лет с ХОКГ; b, ç, d — иссл. № 168, муж.10 лет с ХОКГ; f, g — иссл. № 96, жен.10 лет с ХОКГ; h — иссл. № 92, муж. 10 лет с ХОКГ; Полузакрытая диафрагма; увеличение:a, b — ×100; ç, d, e, f, g, h — ×400

Микроскопическая картина фаций ДЖ у больных с ХОКГ (IIгруппа) также имела свои особенности. В КЗ просматривались два пояса кристаллизации: узкая светлая полоса и гомогенная серая с большим количеством сливающихся микроглобул и сетчатых кристаллов (Рис. № 2а, b). ПЗ была представлена многочисленными макроглобулами, формирующими неправильной формы кораллообразные кристаллы с высокой плотностью рисунка (Рис. № 2 а, b). Периферия ЗСЦ была представлена множественными анизотропными 4–12 лучевыми астроподобными крупными несимметричными кристаллами и кристаллами типа морозных узоров с умеренной плотностью рисунка (Рис. № 2b, d). В ЗСЦ

практически не было бесструктурных полей, на периферии зоны обнаруживались полупрозрачные папоротникообразные кристаллы с единичными октаэдроподобными кристаллами Ca₃(PO₄)₂на концах ветвей (Рис. № 2ç), очаговые скопления иглообразных кристаллов имножественные асимметричные астроподобные кристаллы в виде 5–8 лучевых звезд с центральной симметрией (Рис. № 2b,d). Кристаллические образования в центральной части ЗСЦ была слабо окрашенными со слабой или умеренной плотностью рисунка и представляли собой поля, состоящие их хаотичных папоротникообразных кристаллов с короткими тонкими ветвями (абортивные кристаллы фосфата кальция Ca₃(PO₄)₂) или из множественных тонких дендритоподобных кристаллов с изогнутыми ветвями с центральной симметрией и без неё (Рис. № 2ç, d, e,f, g). Во всех случаях в ЗСЦ у больных II группы отмечалось наличие множественных разнообразных мелких центров патологической кристаллизации (крестообразные, астроподобные, в виде цветка и т. д.) (Рис. № 2ç,f, g). Причем, формирование центров патологической кристаллизации обнаруживалось и вокруг эпителиоцитов, и вокруг кристаллов органических веществ (Рис. № 2е). Кубические кристаллы NaCl и кристаллы холестерина были единичными и встречались с частотой 1 кристалл более чем на 10 полей зрения при увеличении ×400. В ПЗ и ЗСЦотмечались также единичныескопления из 2–3 эпителиоцитов с ядрами и без ядер.

Кристаллизаты СС у больных с ХКГК (IIIгруппа) отличались высокой плотностью рисунка в ПЗ и в ЗСЦ (Рис. № 3а). КЗ состояла из двух полос — узкой светлой и гомогенно-серой, которая была заполнена сливающимися в виде кораллов глобулами (Рис. № 3b). В широкой ПЗ на фоне серой окраски визуализировались множественные сливающиеся глобулы с высокой плотностью рисунка (Рис. № 3b). Периферическая часть ЗСЦ была представлена множественными 4–8 лучевыми крупными несимметричными астроподобными кристаллами с центральной симметрией (Рис. № 3b). В этих же участках наблюдались очаговые скопления иглообразных кристаллов и единичные октаэдроподобные кристаллы фосфата кальция (Рис. № 3ç). В центральной части ЗСЦ обнаруживались крупные поля с хаотичными абортивными тонкими папоротникообразными кристаллами фосфата кальция и множественными беспорядочными центрами кристаллизации, очаги хаотичных дендритоподобных кристаллов с центральной симметрией, множественными микроглобулами с высокой плотностью рисунка (Рис. № 3b, d, е). Следует отметить, что в ЗСЦ отмечались также единичные кристаллы фосфата кальция, кубические кристаллы NaCl (особенно летом и осенью), скопления из 5–6–8 эпителиоцитов, в половине из которых визуализировались тени ядер, множественные коричневато-серые кристаллы органических веществ (Рис. № 3е).

Обсуждение. Проведенное КИ с количественной морфометрией поясов кристаллизации ДЖ у 7–11-них детей с УЗП и ХКГ показало, что кристаллографическая картина фаций ДЖ имеет свои особенности, которые выражаются в изменении показателей радиусов КЗ и ПЗ с одновременным уменьшением радиуса и процента площади ЗСЦ у больных с ХКГ. Причем, процент площади ЗСЦ уменьшается по мере распространенности ХКГ (ХОКГ→ХГКГ).

Параллельно с нарастанием степени распространенности ХКГ в фациях ДЖ увеличивалось и разнообразие микроскопической картины. Нарастал полиморфизм кристаллических образований и формировались «маркеры патологии»: сетчатые структуры кристаллического альбумина с отложением микроглобул гиалуроновой кислоты; поля хаотичных абортивных папоротникообразных кристаллов Ca₃(PO₄)₂cмножественными разнообразными мелкими центрами патологической кристаллизации; дендритоподобные кристаллы с центральной симметрией и без неё; иглообразные, 4–12 лучевые астроподобные несимметричные кристаллы, которые не обнаруживались у детей с УЗП.

Ввиду отсутствия в опубликованной литературе подобных КИ ДЖ у детей, мы не имеем возможности сравнить полученные данные. Подобные исследования были проведены Булкиной Н. В. с соавт. [13], которые изучали изменение морфометрических параметров поясов кристаллизации у взрослых пациентов с ХГКГ. Авторы указывают, что при ХГКГ площадь КЗ и ПЗ (КЗ — 0,233±0,002; ПЗ — 0,410±0,002) увеличиваются по сравнению с показателями кристаллограмм ДЖ, взятой у лиц со здоровым пародонтом (КЗ — 0,182±0,002; ПЗ — 0,306±0,003). Площадь же ЗСЦ, напротив, уменьшается у пациентов с ХГКГ до 0,355±0,002 по сравнению с лицами с УЗП (0,511±0,003). Данные, полученные в ходе нашего исследования, также подтверждают эту тенденцию. Различия в абсолютных числах можно объяснить влиянием неблагоприятных климатогеографических факторов в виде жаркого и сухого климата, резкого колебания суточных температур, а также традиционного употребления горячего чая или, наоборот, охлажденных напитков. Отечественными исследователями было установлено, что слизистая оболочка полости рта, находящаяся в постоянном контакте с внешней средой, испытывает на себе эти неблагоприятные воздействия, что ведет к особенностям секреции и изменению качественного состава слюнной и ДЖ [1, 23].

Таким образом, КИ с количественным морфометрическим анализом поясов кристаллизации и качественным анализом морфотипов кристаллов и структур в высушенных каплях ДЖ позволяет зафиксировать изменения в состоянии тканей пародонта у пациентов с ХКГ. КИ является неинвазивным методом объективной диагностики степени распространенности ХКГ. Этот анализ позволил разработать статистически значимые критерии диагностики и может служить для объективной оценки патологического процесса и дифференциальной диагностики ХКГу детей, проживающих в условиях резкоконтинентального, жаркого и сухого климата.

Литература:

1. Aýnazarow H. A., Patyşagulyýew Ç. P., Allaberdiýew M. E., Sähetdurdyýewa B. Ş. Diş etiniň suwuklygynyň fiziologiýasyna we düzümine daşky gurşawyň täsiri we onuň agyz kesellerinde ähmiýeti / “Saglyk-2011”. — S.120–123.
2. Hadj-Achour M., Brutin D. Fractal pattern formation in nanosuspension sessile droplets via evaporation-spreading on a glass substrate.// Colloids and Interface Science Communications. — 2014. — № 1. — P. 43–46.
3. Maragou M., Vaikousis E., Ntre A., Koronis M. et al. Tear and saliva ferning tests in Sjögrenʼs syndrome (SS).// Clin. Rheumatol. — 1996. — Vol. 15. — P. 125–132.
4. Pattanasuttinont S., Sereepapong W., Suwajanakorn S. The salivary ferning test and ovulation in clomiphene citrate-stimulated cycles.// J. Med. Assoc. Thai. — 2007. — Vol. 90. — P. 876–883.
5. Аналитические подходы к изучению показателей метаболизма в ротовой жидкости: Учебное пособие./ Под ред. Ф. Н. Гильмияровой. — М.: Известия. — 2006. — 312 с.: ил.
6. Антонова А. А., Филонов В. А., Ремизова Ю. А. Кристаллография ротовой жидкости у детей при хронических и острых формах гастрита с учетом стоматологического статуса.// Актуальные проблемы стоматологии детского возраста: Сборник науч. статей I региональной нач.-практ. конференции по стоматологии детского возраста./ Под ред. проф. А. А. Антоновой. — Хабаровск.: Изд-во «Антар» — 2011. — С. 7–10.
7. Барер Г. М., Кочержинский В. В. Десневая жидкость–объективный критерий оценки состояния тканей пародонта // Стоматология. -1987- № 1. — С. 28–29.
8. Барер Г. М., Кочержинский В. В., Халитова Э. С. Десневая жидкость: состав и свойства: обзор.// Стоматология. — 1986. — Т. 65. — № 4. — С. 86–90.
9. Барер Г. М., Кочержинский В. В., Халитова Э. С. Использование параметров десневой жидкости в клинике болезней пародонта.// Методические рекомендации. — М. — 1989. — 34 с.
10. Боровский Е. В., Леонтьев В. К. Биология полости рта.// М.: Медицинская книга, Н.Новгород: Изд-во НГМА. — 2001. — 304 с.: ил.
11. Боровский Е. В., Машкиллейсон А. Л. Заболевания слизистой оболочки полости рта и губ.// М.: МЕД-пресс. — 2001. — 320 с.: ил.
12. Булкина Н. В., Брилль Г. Е., Постнов Д. Э., Поделинская В. Т. Дегидратационная самоорганизация при образовании фаций жидкости десневой борозды или пародонтальных карманов в норме и при воспалительных заболеваниях пародонта.// Фундаментальные исследования. — 2012. — № 2. — С. 234–239.
13. Булкина Н. В., Брилль Г. Е., Постнов Д. Э., Поделинская В. Т. Качественный и количественный анализ кристаллографической картины жидкости десневой борозды и пародонтальных карманов в норме и при воспалительных заболеваниях пародонта.// Известия высших учебных заведений. Поволжский регион. — 2012. — Т. 24. — № 4. — С. 19–32.
14. Булкина Н. В., Бриль Г. Е., Постнов Д. Э., Поделинская В. Т., Еремин О. В. Сравнительная характеристика кристаллографической картины ротовой жидкости и жидкости десневой борозды или пародонтальных карманов при диагностике воспалительных заболеваний пародонта.// Российский стоматологический журнал. — 2012. — № 4. — С. 12–16.
15. Булкина Н. В., Поделинская В. Т., Брилль Г. Е. Кристаллографическое исследование в ранней диагностике воспалительных заболеваний пародонта.// Фундаментальные исследования. — 2014. — № 10. — С. 831–836.
16. Булкина Н. В., Поделинская В. Т., Брилль Г. Е., Постнов Д. Э. Кристаллизация жидкости десневой борозды в оценке результатов комплексного лечения хронического генерализованного гингивита.// Фундаментальные исследования. — 2014. — № 10. — С. 837–842.
17. Булкина Н. В., Брилль Г. Е., Поделинская В. Т. Кристаллографическая картина десневой жидкости в норме и при воспалительных заболеваниях пародонта.// Стоматология. — 2012. — № 4. — С. 16–19.
18. Вавилова Т. П. Биохимия тканей и жидкостей полости рта: учебное пособие.// М.: ГЭОТАР-Медиа. — 2008. — 208 с.: ил.
19. Воложин А. И., Филатова Е. С., Петрович Ю. А., Ильин В. К., Фомина О. Л. Оценка состояния пародонта по химическому составу сред полости рта.// Стоматология. — 2000. — № 1. — С. 13–16.
20. Данилевский Ф. М., Борисенко А. В. Заболевания пародонта.// Киев. — 2000. — 461 с.
21. Дикая А. В. Стоматологический статус детей, страдающих заболеваниями органов пищеварения (клинико-лабораторное исследование).// Дисс. на соиск. уч. ст. к.м.н. — Москва. — 2009. — 151 с.
22. Леонтьев В. К., Галиулина М. В., Ганзина И. В., Анисимова И. В. Структурные свойства смешанной слюны у лиц с кариесом при разных значениях индексов КПУ.// Стоматология. — 2002. — № 4. — С. 29–30.
23. Пашаев К., Мурадова М. С., Ашуров Г. Г. Функции органов зубо-челюстной системы в жарком климате и горной местности.// Ашгабат. -2006. — 142 с.
24. Рапис Е. Г. Белок и жизнь (самосборка и симметрия наноструктур белка).// Иерусалим; Москва: ЗЛ. Милта-ПКПТИТ. — 2002. — 257 с.
25. Седых Е. Ю. Диагностика воспалительных заболеваний больших слюнных желез и оценка эффективности их лечения.// Дисс. на соиск. уч. ст. к.м.н. — Воронеж. — 2000. — 129 с.
26. Терапевтическая стоматология: Учебник в 3 ч.// Под ред. Г. М. Барера. — М: ГЭОТАР-Медиа. — 2009. — Ч. 2. — 224с.: 236 ил.
27. Хоменко Л. А., Чайковский Ю. Б., Савичук А. В., Савичук Н. О., Остапко Е. И. с соавт. Терапевтическая стоматология детского возраста.// Под ред. проф. Л. А. Хоменко. — Киев.: Книга плюс. — 2007. — 815 с.
28. Цыбиков Н. Н.. Доманова Е. Т., Зобнин В. В., Игнатов М. Ю., Масло Е. Ю., Исакова Н. В. Свойства десневой жидкости при остром гингивите и хроническом пародонтите.// Российский стоматологический журнал. — 2012. — № 1. — С. 40–42.
29. Шабалин В. Н., Шатохина С. Н. Морфология биологических жидкостей человека. — М.: Хризостом. — 2001. — 304 с.
30. Яхно Т. А., Яхно В. Г., Санин А. Г., Санина О. А., Пелюшенко А. С. Белок и соль: пространственно-временные события в высыхающей капле.// Журнал технической физики. — 2004. — Том 74. — Вып. 8. — С. 100–108.