Параллельное изучение фагоцитарной реакции и внутриклеточных компонентов, обеспечивающих этот процесс, дает целостное представление о важной функции нейтрофильных гранулоцитов – фагоцитарной, ответственной за неспецифическую защиту организма.
Поглотительную способность нейтрофилов оценивали по фагоцитарному индексу, т.е. проценту фагоцитов из числа сосчитанных нейтрофилов, и фагоцитарному числу, т.е. среднему количеству микробов, поглощенных одним активным нейтрофилом.
Резервную возможность показателей фагоцитарной реакции определяли по отношению показателей фагоцитарной активности при стимуляции липополисахаридом – продигиазаном к аналогичным в базальных условиях. Все показатели определяли в динамики на 3, 6, 9, 12, 16, 21, 28 сутки после заражения животных бластоцистами.
Как видно из таблицы 1, уже на 3 сутки от начала эксперимента у животных опытной группы наблюдалось достоверное увеличение активности фагоцитоза (57,5±0,3%) по сравнению с контролем (49,5±0,2%), данное различие было статистически достоверным (p<0,05). На 6 сутки от начала заражения показатель фагоцитарного индекса возрос до 65,1±0,4%, в то время как уровень данного показателя животных контрольной группы практически не изменился и составил 50,1±0,2% (p<0,001). На 9 сутки повышение базального фагоцитоза достигло наибольших значений 69,7±0,8% (p<0,05).
Таблица 1
Показатели стимулированного фагоцитоза при экспериментальном бластоцистозе
|
Группы животных |
Статистические показатели |
Сроки наблюдений (в сутках) |
||||||
|
3 |
6 |
9 |
12 |
16 |
21 |
28 |
||
|
Опытная (n=92) |
M±m |
23,8±0,4 |
26,9±2,7 |
28,5±0,8 |
32,1±1,7 |
20,3±0,6 |
17,8 ±1,2 |
19,9±0,7 |
|
Контрольная (n=40) |
M±m |
49,5±0,2 |
50,1±0,2 |
49,2±0,6 |
50,5±0,2 |
49,5±0,4 |
49,5±0,2 |
50,1±0,2 |
|
р |
<0,001 |
<0,001 |
<0,001 |
<0,001 |
<0,001 |
<0,001 |
>0,05 |
|
Показатель достоверно динамически увеличивался в опытной группе с 3 по 9 сутки (с момента заражения), а к шестнадцатым суткам произошло резкое снижение фагоцитарного индекса до минимальных значений, причем показатель составил 44,5±0,6%, что было в 1,1 раза ниже, чем у интактных животных (49,5±0,4%, p<0,001). В дальнейшем активность базального фагоцитоза нарастала вплоть до 28 суток от начала эксперимента, когда данный показатель у мышей опытной группы составил 49,9±0,8% (p>0,05) при отсутствии достоверности статистического различия между группами (рис. 1).
Рис. 1. Динамика показателей базального фагоцитоза у опытных и
контрольных животных
В те же сроки, что и при изучении базального фагоцитоза, выявляли активность стимулированного фагоцитоза у инвазированных и интактных животных. Результаты исследований представлены в таблице 17. Как видно из таблицы, активность стимулированного фагоцитоза у здоровых животных составила, в среднем – 49,8±0,9%. У инвазированных животных на 3 сутки после заражения показатели стимулированного фагоцитоза уменьшились в 2,1 раза и составили 23,8±0,4% (р<0,001). На 6 сутки различия оставались статистически достоверными, однако показатель фагоцитарного индекса несколько повысился, составив 26,9±2,7%, что было в 1,8 раза ниже показателя здоровых животных (рис. 2).
Рис. 2. Изменение активности стимулированного фагоцитоза при
бластоцистной инвазии
В дальнейшем активность фагоцитоза нарастала до двенадцатых суток от начала эксперимента, когда активность стимулированного фагоцитоза в опытной группе составил 32,1±1,7% при сохранении статистически достоверного различия между группами. К 16-22 суткам активность стимулированного фагоцитоза у инвазированных мышей снизилась до минимальных значений, ее показатель снизился до 17,8±1,2%, что было в 2,8 раза ниже, чем у контрольных животных.
Таким образом, наличие бластоцистной инвазии способствовало снижению активности стимулированного фагоцитоза. Следует отметить, что даже в период максимальной его активизации показатели стимулированного фагоцитоза не достигали соответствующих величин у здоровых животных.
Показатели базального фагоцитоза свидетельствуют о том, что происходит его активизация, максимум которого приходится на 9 сутки эксперимента, к 16 суткам наступает депрессия, сменяющаяся медленным подъемом показателей.
Уровень стимулированного фагоцитоза свидетельствует о статистически достоверном его снижении у инвазированных животных. Однако на фоне общего падения происходит его некоторая активация, также достигающая максимума на 9-12 сутки, которая затем сменяется снижением показателей.
Одним из важных показателей, характеризующих протективную роль системы фагоцитоза, является фагоцитарное число, отражающее способность клеток к захвату возбудителей. Результаты изучения показателей фагоцитарного числа у экспериментальных животных при бластоцистозе в сравнении с показателями контрольных животных представлены на рисунке 3.
Рис. 3. Изменение показателей фагоцитарного числа у опытных и
контрольных животных
Как видно из рисунка, фагоцитарное число интактных животных составило, в среднем – 1,7±0,2 условных единиц. У опытных мышей было обнаружено наличие двух закономерностей в изменении фагоцитарного числа. Во-первых, фагоцитарное число изменялось волнообразно, причем, на третьи сутки этот показатель был в 1,1 раза ниже, чем у контрольных животных. К шестым суткам оно снизилось в еще большей степени (1,31±0,2 у.е.) и оказалось в 1,3 ниже исходного уровня.
В последующем отмечалась тенденция к росту фагоцитарного числа у экспериментальных животных. Максимальное значение показателя в группе опытных мышей было отмечено на двенадцатые сутки от начала эксперимента. Фагоцитарное число у опытных животных составило, в среднем – 2,20±0,06 условных единиц, при этом различие в показателях по сравнению с контрольной группой было статистически достоверным (p<0,05).
В дальнейшем фагоцитарное число снижалось, составив к шестнадцатым суткам 1,92±0,05 у.е. (p<0,05).
К двадцать первым суткам фагоцитарное число у подопытных животных составило 2,01±0,04 у.е. Наконец, к двадцать восьмым суткам данный показатель составил 1,64±0,03 у.е. (p<0,01).
Нарастание фагоцитарного числа к двенадцатым суткам у животных экспериментальной группы можно объяснить мобилизацией компенсаторных механизмов. Это, по-видимому, может быть связано с увеличением в этот же срок относительного (62,9±0,4%) и абсолютного (7,75±0,29∙109/л) количества нейтрофильных гранулоцитов периферической крови. Механизм нейтропении, возможно, обусловлен усиленной миграцией нейтрофильных гранулоцитов из периферической крови в очаг воспаления, развивающегося в кишечнике при бластоцистозе.
Бластоцистная инвазия сопровождалась также изменением в динамике заболевания показателя завершенности фагоцитоза. Так, в первые сутки после заражения происходило его увеличение до 72,7±3,4% (в контроле 62,5±3,3%; р<0,001), в период разгара заболевания (6-12-е сутки) показатель завершенности снижался до 63,8±4,2% (р>0,01), в период реконвалесценции опять наступало его повышение (67,2±6,8%), которое, однако, не было достоверным по сравнению с контролем (р>0,05).
Таким образом, воспроизведение бластоцистной инвазии у экспериментальных животных позволило выявить изменение содержания нейтрофилов в периферической крови и их фагоцитарной активности. Установлены фазные изменения уровней базального и стимулированного фагоцитоза, а также показателей завершенности фагоцитоза.
