Взаимосвязь мочевой экскреции моноцитарного хемоаттрактантного протеина 1 и обмена коллагена у детей с гематурической формой хронического гломерулонефрита

Развитие и прогрессирование хронического гломерулонефрита остается одной из важной проблем в нефрологии. Неблагоприятный прогноз у пациентов с различными формами гломерулонефрита в значительной степени определяется выраженностью изменений в тубулоинтерстициальной ткани [7, 9.] Интерстициальная ткань характеризуется значительным содержанием коллагена. При разрушении коллагена продукты его деградации высвобождаются в кровоток и выделяются с мочой [8]. По данным ряда авторов, определение концентрации гидроксипролина (аминокислоты, встречающейся только в коллагене) в биологических жидкостях может быть использовано для диагностики и прогноза течения болезни [2, 3, 4, 5, 6].

Согласно современным представлениям, патогенез развития тубулоинтестициальных изменений в почках складывается из целого ряда механизмов, таких как протеинурия, тубулярная ишемия, гипоксия, влияние белковых и ферментных факторов, цитокинов, ростовых факторов и др. [1, 7].Установлено, что любое повреждение клеток паренхимы почек приводит к секреции ими медиаторов воспаления. Под воздействием провоспалительных цитокинов, таких как ИЛ-1β и ФНО-α, стимулируется продукция моноцитарного хемоаттрактантного протеина 1 (monocyte chemoattractant protein-1 – сокращенно MCP-1), который обеспечивает приток лейкоцитов и моноцитов в область повреждения и формирует воспалительный инфильтрат. Основными источниками MCP-1 в моче считаются клетки тубулярного эпителия [1].

MCP-1 является не только хемоаттрактантом, обеспечивающим миграцию мононуклеарных клеток в очаг воспаления, но и медиатором воспаления [9, 12]. В настоящее время обнаружено, что повышение уровня MCP-1 коррелирует со степенью активности тубулоинтерстициального повреждения и фиброза [7, 10]. Однако недостаточно изученной остается система взаимосвязей между мочевой экскрецией медиаторов воспаления и состоянием метаболизма коллагена в соединительной ткани почки при гематурической форме хронического гломерулонефрита у детей.

Цель исследования: установление взаимосвязей между мочевой экскрецией моноцитарного хемоаттрактантного протеина 1 и показателями обмена коллагена (общего оксипролина, свободного оксипролина) у детей с гематурической формой хронического гломерулонефрита.

Материалы и методы. Объектом исследования явились дети с заболеваниями почек. Основную группу составили 19 больных с гематурической формой хронического гломерулонефрита. Возраст больных был от 7 до 17 лет. Длительность заболевания в среднем колебалась от 2 до 6 лет. Семь пациентов на момент обследования получали глюкокортикоиды, а 2 ребенка – двухкомпонентную иммуносупрессивную терапию (азатиоприн и гормоны). Обследование включало в себя общеклинические методы обследования и специальные. Всем больным выполнялись общие анализы мочи и крови, биохимические и иммунологические исследования, бактериологические посевы мочи и мазков из зева, функциональное состояние почек (пробы Реберга, Зимницкого), инструментальные методы обследования. Для оценки состояния обмена коллагеновых белков в организме определяли содержание гидроксипролина в моче по методике H. Stegmann (1958), модифицированной Шараевым П.Н. [8]. Определение мочевой экскреции MСР-1 проводилось методом твердофазного «сендвич»-варианта иммуноферментного анализа с использованием моно- и поликлональных антител к МСР-1 человека (МСР-1-ИФА-БЕСТ) производства ЗАО «Вектор-Бест» (г.Новосибирск). Концентрацию МСР-1 измеряли в утренней средней порции мочи, взятой с 9 до 11 ч. Диапозон измеряемых концентраций составил 0-2000 пг/мл, чувствительность анализа – 15 пг/мл. Результаты исследования подвергли математическому анализу с использованием программы «Statistica 6.0» методами вариационной и непараметрической статистики. Различия принимали за существенные при р<0,05.

Результаты и обсуждение. Для определения контрольных показателей МСР-1 в моче обследовано 25 практически здоровых детей, общего и свободного оксипролина (ОбОП и СвОП) в моче – 11 детей. В контрольной группе установлено нормальное распределение показателей (табл. 1).

Таблица 1

Показатели экскреции ОбОП, СвОП, МСР-1 у здоровых детей

В группе детей с гематурической формой хронического гломерулонефрита (ГФ ХГН) при сравнении с контрольной группой было выявлено значительное повышение концентрации МСР-1 в моче, при этом медиана исследуемого показателя в этой группе составила 626 (209 – 707) пг/мл (рис.1), уровень МСР-1 в моче колебался от 125 до 2048 пг/мл.

Медианы значений уровней мочевой экскреции общего и свободного оксипролина (ОбОП и СвОП) представлены в таблице 2.

Таблица 2

Показатели экскреции ОбОП, СвОП у детей с гематурической формой хронического гломерулонефрита

Поскольку известно, что СвОП в тканях образуется при полном распаде коллагеновых белков [8, 10], то выявленное снижение соотношения ОбОП/СвОП может свидетельствовать о процессе активации синтеза коллагена.

В результате корреляционного анализа у детей с ГФ ХГН выявлена прямая сильная положительная взаимосвязь МСР-1 с уровнем ОБОП (коэффициент корреляции r=0,94, погрешность p= 0,0051).

Высокую активность воспалительного процесса у обследованных пациентов, по нашему мнению, характеризуют следующие положительные взаимосвязи с биохимическими и лабораторными данными обследованных пациентов (р< 0,005): МСР-1 – Ig М (r=0,53), ОбОП – протеинурия (r=0,78), ОбОП – холестерин (r=0,67), ОбОП – IgG (r=0,75), СвОП – гематурия (r=0,65), ЦИК - S-фаза (r=0,73), протеинурия – СОЭ (r=0,56), Ig М – холестерин (r=0,51). При этом повышение мочевой экскреции хемокина сопровождалось активацией первичного иммунного ответа (Ig М), элиминационных механизмов защиты (ЦИК).

У пациентов с ГФ ХГН обнаружено наличие множества связей лабораторных показателей с высевом микробов в моче, что подтвеждает роль инфекционного фактора в патогенезе заболевания и дополнительно констатирует глубокую иммуносупрессию у данной группы больных.

Заключение. В настоящее время не вызывает сомнений этиопатогенетическая роль тубулоинтерстициальных изменений в прогрессировании заболеваний почек. В результате проведенных исследований были установлены взаимосвязи мочевой экскреции уровня МСР-1, ОбОП, СвОП с другими лабораторными показателями, характеризующими активность воспалительного процесса и функциональное состояние почек, что указывает на сопряженность процессов воспаления и тубулоинтерстициального повреждения при ГФ ХГН у детей.

Выявление тубулоинтерстициального поражения, определение степени его выраженности возможно по результатам нефробиопсии. Однако нефробиопсия является оперативным вмешательством, требующим наличия специальных показаний. Неинвазивные методы исследований состояния соединительной ткани почек имеют важное практическое значение. Полученные лабораторные данные показателей обмена коллагена и МСР-1 позволяют позволяют наметить дальнейший диагностический поиск и терапевтический подход к заболеваниям.

Литература:

1. Картамышева, Н.Н. Некоторые механизмы формирования тубулоинтерстициального компонента при хронических заболеваниях почек (обзор литературы) / Н.Н. Картамышева, О.В.Чумакова, А.Г. Кучеренко // Медицинский научный и учебно-методический журнал. – 2002,- № 6, – С. 176-187.

2. Катричева-Логинова, Л.В. Состояние обмена соединительной ткан при неспецифических кардитах у детей. / Л.В. Катричева-Логинова, О.В. Лизунова, И.Г. Ямщикова // Педиатрия. – 1982. – №3. – С. 39-42.

3. Кильдиярова, Р.Р. Клиническое значение обменных нарушений соединительной ткани при гастродуоденитах и язвенной болезни у детей: автореф. дис. … д-ра мед. наук / Р. Р. Кильдиярова. – М., 2001. – 37 с.

4. Малинин, О.В. Клиническое значение показателей обмена метаболизма соединительной ткани при геморрагической лихорадке с почечным синдромом: автореф. дис. …канд. мед. наук / О.В. Малинин. – М., 1996. – 28 с.

5. Павлов, С.Б. Значение суточной оксипролинурии для ранней диагностики нефросклероза у больных хроническим пиелонефритом. // Клин. лаб. диагностика. – 1998. – № 4. – С. 23-24.

6. Рябов В.И. Оксипролинурия у больных геморрагической лихорадкой с почечным синдромом. / В.И. Рябов, П.Н. Шараев, О.В. Малинин // Казан. мед. журнал. – 1991. – № 2. – С. 126 – 128.

7. Чеботарева, Н.В. Молекулярные механизмы интерстициального фиброза при прогрессирующих заболеваниях почек (обзор литературы) / Н.В. Чеботарева, И.Н. Бобкова, Л.В. Козловская // Нефрология и диализ: Т. 8, – 2006, – №1, – С. 26-35.

8. Шараев, П.Н., Стрелков, Н.С., Кильдиярова, Р.Р. Соединительная ткань в детском возрасте. – Ижевск, 2005. – 152 с.

9. Border W.A. Transforming growth factor-β in tissue fibrosis / W.A. Border, N.A. // Noble N. Eng. J. Med. – 1994. – №. 331 - P. 1286-1292.

10. Monitoring urinary levels of Monocyte chemotactic and activating factor reflects disease activity of lupus nephritis / T.Wada, H.Yokoyama, S.Su et al. // Kidney Int. – 1996. – № 49. – Р. 761-767.

11. Urinary levels chemokines (MCAF⁄MCP-1, IL-8) reflect distinct disease activities and phases of human IgA nephropathy / H.Yokoyama, T.Wada, K.Furuichi et al. // J. Leukocyte Biol. – 1998. - № 63. – Р. 493-499.

12. Viedt C. Monocyte chemoattractant protein-1 (MCP-1) in the kidney: does it more than simply attract monocytes? / C. Viedt, S. Orth // Nephrol. Dial. Transplant. – 2002. – № 17. – Р. 2043-2047.