Препараты плазмы, обогащенные клетками крови, активно применяются в разных областях медицины [1,2]. Для получения препаратов КПТ пользуются зарубежными технологиями (Eudoret, RegenLab, Ycellbio и др.) [1, 3]. Разделение клеток послойно возможно из-за их разного удельного веса. Для ускорения разделения зарубежные исследователи используют центрифугирование крови (искусственная седиментация). В отечественной технологии применена естественная седиментация, при этом происходит такое же разделение клеток по весу, как и при искусственной седиментации. По некоторым показателям отечественная технология уступает зарубежной: так объем полученной плазмы из 10 мл крови пациента составляет 4 мл, а время ее получения 4 ч, в то время как те же показатели в импортной технологии равны соответственно 6 мл и 5 мин (сравнение сделано с принятой к применению в РФ швейцарской технологией RegenLab).

Методика получения препаратов КПТ с помощью отечественной технологии сводится к:

1. забору в шприц 10 мл гепаринизированной крови,
2. отстаиванию крови в шприце в положении «игла вниз» вертикально при t=4C в течение 4 ч, при этом в плазме для исследований выделяют 4 фракции, три из них (1–3) равные по объему и 4-я узкая полоска плазмы, пограничная с эритроцитами (плазма-мениск), на которых оседают лейкоциты, образуя «лейкоцитарную пленку» (рис. 1 а, б),
3. удаление из шприца всей осевшей эритроцитарной массы, кроме поверхностного слоя с «лейкоцитарной пленкой» позволит получить два препарата плазмы крови: а) «Л-ПЭ», состоящего из фракций (3+4), содержащих до 5 % эритроцитов, которые по литературным данным обладают стимулирующим действием на гемопоэз [5] и б) «л-пэ», состоящего из фракций (1+2) (рис. 1, схема), бедного тромбоцитами, лейкоцитами и содержащего менее 1 % эритроцитов [4]. В зарубежных технологиях препараты плазмы с низким содержанием клеток обозначают PPP, а с повышенным — PRP.

а б

Рис. 1. а — естественная седиментация клеток крови в шприце «игла вниз»; б — схема процесса седиментации, в плазме выделены 4 фракции; Э — эритроциты, П — плазма

В препаратах PRP (технология RegenLab) в повышенных количествах присутствуют только тромбоциты, а в препаратах Л-ПЭ (отечественная технология) помимо тромбоцитов содержатся еще и лейкоциты и эритроциты.

Итак, из 10 мл крови пациента удается выделить около 4 мл плазмы, из которой получают 2 препарата: Л-ПЭ и л-пэ.

Эти препараты были испытаны на больном с хроническим генерализованным парадонтитом. Длительное лечение давало более выраженный клинический результат, чем стандартная терапия [6].

В другой отечественной технологии шприцы с кровью располагаются в положении «игла вверх». В образовавшейся (за 4ч при t=4C) плазме также выделяют 4 фракции (рис. 2 а, б).

а б

Рис. 2. а — естественная седиментация клеток крови в шприце «игла вверх»; б — схема процесса седиментации, в плазме выделены 4 фракции; Э — эритроциты, П — плазма

В отличие от первой технологии предлагаемая методика позволяет получить более разнообразный спектр препаратов без примеси эритроцитов: фракции 1, 2, 3 (рис. 2, схема). Кроме того, можно выделить еще одну фракцию (3+4), содержащую эритроциты. В зависимости от количества добавленной фракции 4 к фракции 3 концентрация эритроцитов в препарате (3+4) будет колебаться от 1 % до 5 %.

Итак, вторая технология позволяет получить из 10 мл крови более разнообразный спектр инъекционных препаратов плазмы крови как бедных (фракции 1, 2), так и обогащенных клетками крови (фракции 3, 3+4). О степени обогащения плазмы клетками крови косвенно можно судить по изменению количества лейкоцитов после их подсчета в камере Горяева. Оказалось, что лейкоцитов в 3-й фракции было в 2,6 раза, а в (3+4) фракции в 4 раза больше, чем в 1-й фракции.

По литературным данным [3] при анализе шести технологий получения PRP препаратов лучшей была технология Ycellbio (коэффициент обогащения плазмы тромбоцитами был более 6 раз, остальные технологии давали увеличение в 4–5 раз, у двух технологий увеличение тромбоцитов отсутствовало). В наших исследованиях среднее обогащение плазмы клетками крови составило 3–4 раза. Большинство исследователей считает, что от степени обогащения плазмы тромбоцитами зависит клинический результат, однако имеются работы, в которых это положение не подтверждается [2, 6]. Это означает, что противовоспалительный эффект может быть связан не только с количеством тромбоцитов в плазме, но и с другими клетками.

Итак, данное исследование показало, что отечественные технологии уступают зарубежным по объему полученной плазмы и времени ее получения, но превосходят их по: 1)спектру выделяющихся БАВ, 2)отсутствию центрифугирования, которое может способствовать преждевременному разрушению цитокинов, 3)простоте, доступности и экономичности (зарубежные центрифуги стоят десятки тысяч долларов). Отечественные технологии позволяют получить препараты плазмы, обогащенные клетками крови, и использовать их в практическом здравоохранении, в частности в стоматологии при лечении гингивитов, стоматитов, пародонтитов, для ускорения заживления ран. Большое значение на клинический результат будет оказывать выбор тактики лечения. Наиболее перспективной при лечении, например, гингивитов может оказаться мезотерапевтическая техника введения препаратов КПТ, используемая в косметологии для омоложения кожи. Большое значение на результат лечения будет оказывать и выбор препарата КПТ. Отечественные технологии предлагают большой выбор препаратов плазмы с разной степенью ее обогащения клеточными элементами крови.

Литература:

1. Лисицын М. П., Замерук А. М., Лисицына Е. М., Атлуханов Р. Я. «Применение обогащенной тромбоцитами аутоплазмы крови в лечении гонартроза». Эндоскопическая хирургия. 2020; 26(6): 49–62.
2. Ерашов П. А., Денисенко В. Л. «Обогащенной тромбоцитами плазма. Ее классификация, получение и использование в медицине на современном этапе». Вестник ВГМУ. — 2022. — Том 21, Nº6. — С. 18–28.
3. Сулаева О. Н. «Получение богатой тромбоцитами плазмы: мифы и реальность». Мир медицины и биологии. — 2017. — № 3(61). — 150–153.
4. Неустроев Г. В., Гайдук И. В., Неустроева Ю. Д., Чикина Н. А., Горин Д. М., Ягов В. В. «Импортзамещающая Л-ПЕ технология при лечении тяжелой формы генерализованного пародонтита». ПСНО. — 2022. — 4(173), 41–50.
5. Бархина Т. Г., Никитина Г. М., Бархина М. М., Черных А. С. «Патология мембран форменных элементов крови при заболеваниях и в эксперименте». Успехи современного естествознания. 2006. № 6 С. 64–65.
6. Неустроев Г. В., Жириков Р. Ю., Ревазова З. Э., Хрынин С. А., Жириков Ю. А. «Отталенные результаты лечения тяжелой формы пародонтита с помощью клеточной плазмотерапии». Актуальные вопросы стоматологии (сб. науч. раб. КГМУ) Казань, 2025 С. 403–411.