В пищевой промышленности широко используют различные бактериальные препараты, состоящие из отдельных штаммов молочнокислых микроорганизмов, а также дрожжей и грибов. Бактериальные препараты могут содержать микроорганизмы в виде чистых монокультур или в комбинациях, включающих несколько штаммов разных таксономических групп. Однако часто ученые сталкиваются с тем, что между пробиотическими микроорганизмами возникают антагонистические взаимодействия. Выяснение отношений Penicillium camemberti и Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus позволит понять возможно ли в дальнейшем создание продукта на основе этих двух микроорганизмов.
Цель работы — определить наличие антагонистической активности Penicillium camemberti и Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus .
Задачи:
- Изучить природу благородной плесени и ее полезные свойства
- Получить представление о молочнокислых микроорганизмах и их функциях
- Познакомиться с методом определения антагонистической активности
- Провести экспериментальную часть, доказывающую или опровергающую гипотезу
- Сделать выводы о характере активности благородной Penicillium camemberti и Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus
Строение Penicillium Camemberti
Penicíllium camembérti — это вид несовершенных грибов рода Penicillium , использующийся для закваски кисломолочных сыров. Является введённой в культуру формой вида Penicillium commune и не встречается в природе вне сыра с белой плесенью. Колонии гриба пушистые, слабо спороносящие белого или, реже, сероватого цвета.
Применение благородной плесени в промышленности
Некоторые мицелиальные грибы участвуют в ферментации и продлении срока годности продуктов питания, поэтому нашли широкое применение в различных областях пищевой промышленности. В процессе приготовления мягких сыров типа Камамбер используется поверхностно растущая белая плесень, которая придает продукту определенные вкусовые качества. Грибковая микробиота корки сыра Камамбер образует сложную экосистему. За образование корки на сыре отвечает развитие мицелия Penicillium camemberti . Мицелий в течение технологического процесса находится в разных состояниях — в условиях помещений, где готовится сыр, мицелий «толстый» и свободно растущий. После того, как сыр доходит до необходимой кондиции, мицелий сжимается между сырной массой и упаковочной пленкой и становится тонким.
Функции и применение Lactobacillus Delbrueckii Subsp. Bulgaricus
Лактобациллы (в частности, болгарская Lb. delbrueckii subsp. bulgaricus ) широко используются для производства как традиционной ферментированной молочной продукции, так и инновационных функциональных продуктов питания. Также они обеспечивают устойчивость иммунной системы организма человека к инфекционным заболеваниям, являются естественными биосорбентами, обезвреживающими многие соединения тяжелых металлов, фенолы, формальдегиды и другие токсичные вещества, попадающие в организм из окружающей среды и влияющие на снижение иммунитета. Основной механизм подавления патогенных микроорганизмов лактобациллами — это выработка кислот, в первую очередь молочной.
Ход работы
1. Сначала я приготовила две питательные среды, на которых далее вырастила споры Penicillium Camemberti и бактерию Lactobacillus Delbrueckii Subsp. Bulgaricus .
Первый раствор был приготовлен из бульона MRS для лактобактерий (5,5г) и воды (100мл) с добавлением агара (2г) для загущения. Раствор приобрел оранжевый цвет. Второй раствор был приготовлен из Агара Ли для молочнокислых бактерий (5,2г) и воды (100мл). Раствор приобрел темно-фиолетовый цвет.
Все взвешивания проводились на аналитических весах.
Рис. 1. Растворы питательных сред
2. Затем из ваты и марли я изготовила биологические пробки для колб с питательной средой и поместила растворы в автоклав для паровой стерилизации при температуре 121 0 C.
Достав простерилизованные растворы из автоклава в стерильной зоне 15 см от спиртовок я разлила среды по чашкам Петри и отставила их застывать на некоторое время.
После чего я также в стерильной зоне 15 см от спиртовок стерильной петлей нанесла на среды бактерию Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus вертикально и плесень Penicillium camemberti горизонтально по диаметру. Затем я поместила готовые чашки Петри с культурами в термостат.
Рис. 2. Засевание культур в питательные среды
Рис. 3. Чашки Петри с культурами в термостате
3. Через два дня я достала чашки Петри из термостата. Культура lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus никак не ограничила развитие мицелия penicillium camemberti со спорами и наоборот. На пересечении микроорганизмов отсутствуют какие-либо разрывы, антагонистическая активность не наблюдается.
Рис. 4. Активность Penicillium Camemberti и Lactobacillus Delbrueckii Subsp. Bulgaricus
Выводы
В ходе работы над проектом было установлено, что Penicillium camemberti и Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus не влияют на развитие друг друга. В процессе эксперимента не было обнаружено препятствий росту этих культур.
Таким образом было установлено, что микроорганизмы Penicillium camemberti и лактобактерии Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus способны сосуществовать и в дальнейшем они могут быть использованы для создания пробиотического продукта, обладающего полезными свойствами каждой из культур.
Литература:
- Dox A. W. The intracellular enzyms of penicillium and aspergillus: with special reference to those of Penicillium camemberti. — US Department of Agriculture, Bureau of Animal Industry, 1910. — Т. 120.
- Torriani S., Zapparoli G., Dellaglio F. Use of PCR-based methods for rapid differentiation of Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus and L. delbrueckii subsp. lactis //Applied and Environmental Microbiology. — 1999. — Т. 65. — №. 10. — С. 4351–4356.
