Исследование антимикробной активности различных экстрактов растения Miliusa sinnensis



Miliusa — это род растения семейства Annonaceae. Он состоит из 9 принятых видов и 50 нерешенных видов. Еще 10 новых видов были обнаружены в Таиланде и Индии. Miliusa принадлежит к порядку Miliusea , подсемейству Malmeoideae. Почти 50 видов, от мелких до крупных деревьев, распространены от Индийского субконтинента до Южного Китая, материковой части Юго-Восточной Азии и ее архипелагов, включая Новую Гвинею. В Таиланде и Китае виды рода Miliusa широко используются в народной медицине как болеутоляющее средство.

Исследование химического состава видов этого рода показывают наличие вторичных соединений, таких как алкалоиды, флавоноиды, производные гомогентизиновой кислоты и лигнаны. На данный момент уже опубликовано ряд статей по данной теме. Особый интерес представляют работы, опубликованные группой исследователей института химии Вьетнамской академии наук и технологий, посвященные исследованию химического состава и биологической активности дерева Miliusa balansae. Кроме того, из растения Miliusa sinensis , собранного в национальном лесе Кук Фуонг, ученые из группы международного сотрудничества по биоразнообразию Вьетнама выделили новый класс веществ, названных милиусанами, обладающих многими замечательными свойствами с точки зрения химической структуры и биологической активности.

Первоначально исследовательская группа из института морской биохимии Вьетнамской академии наук и технологий также изучала химический состав и биологическую активность листьев Miliusa balansae . В данной работе представлены результаты исследования антимикробной активности различных экстрактов листьев Miliusa sinensis на основе Вьетнамского сырья.

Материалы и методы исследования

В качестве объекта исследования было выбрано растение Miliusa sinensis , выращенное на территории Лесного университета, Суан Май, Ханой. Растения были собраны в августе 2019 года.

Рис. 1. Растение Милиуса Miliusa sinensis

Научное название растения определена доктором Ву Хыонг Занг (Институт морской биохимии, Вьетнамская академия наук и технологий). Ваучерный образец растения Miliusa sinensis был депонирован в лаборатории биотехнологии Тхюйлойского университета (175 Тайшон, Донг Да, Ханой, Вьетнам).

Листья растения Miliusa sinensis (100 г) измельчали, экстрагировали последовательно н -гексаном, этилацетатом и метанольном при температуре 45–50 ^o C. Экстракция с каждым растворителем была проведена трёхкратно под действием ультразвука (Elma, S120, Германия) последующим выпариванием экстракта под вакуумом (R-100, Buchi, Швейцария).

Антимикробную активность для трех экстрактов (гексановый, этилацетатный и метанольный экстракты) исследовали на различные штаммы микроорганизмов: грамотрицательные палочки факультативные анаэробы Escherichia coli (ATCC 16404) Pseudomonas aeruginosa ATCC27853, Salmonella enterica ATCC12228, грамоположительные палочки факультативные анаэробы Enterococcus faecalis ATCC13124, Stapphylococus aureus ATCC25923, Bacillus cereus ATCC 13245, а также дрожжевых грибов Candida albicans ATCC10231 производитель «Microbiologics» (США). Антибактериальную активность определяли с использованием метода диффузии в агар (Hadacek & Greger, 2000).

Результаты исследования и обсуждения

Получение различных экстрактов из растения Miliusa sinensis

Из 100 г листьев M. sinensis получили н -гексановый, этилацетатный и метанольный экстракты, масса которых представлена в рис. 2.

Рис. 2. Масса различных экстрактов (на 100 грамм исходного сырья)

Согласно представленным на рис. 2 результатам, в листьях данного растения содержатся в основном поляризованные вещества, которые находятся в метанольном экстракте. Неполяризованные и малополяризованные соединения находятся в н -гексановом и этилацетатном экстракте. Масса н -гексанового эктракта из 100 г материала составила 1,9 г. Масса этилацетатного и метанольного экстракта была 2,4 г и 4,1 г, соответственно.

Антимикробная активность различных экстрактов листьев растения Miliusa sinensis

Результаты оценки антимикробной активности (табл. 1) показали, что только н -гексановый и этилацетатный экстракт растения Miliusa sinensis проявляет способность к уничтожению микроорганизмов и только для двухграммовых штаммов (+): S. aureus ATCC 25923 и B. cereus ATCC 13245.

Таблица 1

Антимикробная активность различных экстрактов растения Miliusa

	Gram +			Gram –
Экстракты	E. faecalis ATCC 299212	S. aureus ATCC 25923	B. cereus ATCC 13245	E. coli ATCC 25922	P. aeruginosa ATCC 27853	S. enterica ATCC 13076	C. albicans ATCC 10231
MS-H	256	128	128	64	-	-	-
MS-E	256	128	128	-	-	-	-
MS-M	256	256		-	-	-	-
Стрептомицин	128	64	64	32	128	64	-
Циклогексимид							64

Примечание: MS-H, MS-E, MS-M — гексановый экстракт; этилацетатный экстракт и метанольный экстракт листьев растения Miliusa sinensis

Для штамма E. Coli ATCC 25922 , только н -гексановый экстракт MS-E показал активность со значением 64 мкг/мл. Проявление антимикробной активности экстракта может быть связано с биохимическим составом листьев Miliusa sinensis, в том числе жирнокислотный состав неполяризованного экстракта .

Таким образом, в данной работе были получены различные экстракты Miliusa sinsensis на основе Вьетнамского сырья. Установлено, что н -гексановые экстракты обладают лучшей антимикробной активностью, в том числе данный экстракт обладает способностью к уничтожению Escherichia Coli . В дальнейшем будут изучены процессы выделения биологически активных веществ из листьев Miliusa sinsensis , будет определена их химическая структура и биологическая активность, и возможность применения экстрактов в различных отраслях промышленности.

Благодарность: Работа выполнена при поддержке Национального Фонда Фундаментальных Исследований Вьетнама (NAFOSTED), проект 104.01-2019.17.

Литература:

1. Nguyen Phương Thao et al. (2015). Chemical constituents of Miliusa balansae leaves and inhibition of nitric oxide production in lipopolysaccharide-induced RAW 264.7 cells. Bioorg. Med. Chem. Lett., 25 (18), 3859–3863.
2. Chatrou L. W. et al. (2012). A new subfamilial and tribal classification of the pantropical flowering plant family Annonaceae informed by molecular phylogenetics. Botanical Journal of the Linnean Society, 169, 5–40.
3. Chaowasku T., Keßler P. J. A. (2006). Miliusa lanceolata (Annonaceae), a new species from Papua New Guinea. Blumea J. Plant Taxon. Plant Geogr, 51, 553–557.
4. Chen B., Ye Q., Li B., Zhang G. (2002). A new azafluorene alkaloid from miliusa balansae. Indian J. Heterocycl. Chem., 12 (1), 81–82.
5. D. T. Huong, C. Kamperdick, T. V. Sung (2004). Homogentisic Acid Derivatives from Miliusa balansae. J. Nat. Prod., 67 (3), 445–447.
6. Jumana S., Hasan C. M., Rashid M. A. (2000). Antibacterial activity and cytotoxicity of Miliusa velutina. Fitoterapia, 71(5), 559–56.
7. Hadacek F., Greger H. 2000. Test of antifungal natural products methodolagies, comparability of result and assay choise”. Phytochem. Anal., 90, 137–147.
8. https://tracuuduoclieu.vn/miliusa-sinensis-fin-et-gagnep.html