Животные, содержащиеся на промышленных комплексах, подвергаются различным стрессорным воздействиям (неоптимальным условиям содержания, использованием токсичных кормов) и в связи с этим вынужденным давлением на иммунную систему биопрепаратов и химиотерапевтических средств, что приводит к различным заболеваниям [1]. В связи с этим проблема повышения эффективности лечения и профилактики при различных патологиях у коров продолжает сохранять актуальность [2]. При этом многие из лекарственных средств являются синтетическими и нередко вызывают множество осложнений, в том числе усугубление иммуносупресивных состояний, загрязняют сырье и продукты питания [3]. При лечении животных, использование иммуномодуляторов без этиоторопных средств часто не дает желаемого результата. Они должны дополнять общепринятую терапию, не подменяя ее [4]. Это обусловливает необходимость дальнейшей разработки препаратов природного происхождения, которые лишены указанных недостатков. Такие препараты можно будет применять как отдельно, так и в комплексе с другими средствами [1].
К препаратам природного происхождения относится кормовая добавка «ЭМ-Вита». Она состоит из смеси штаммов Lactobacillus plantarum 376, Lactobacillus casei МДП-1, Saccharomyces cerevisiae, патоки и дрожжей. В 1 см3 содержится не менее 107 КОЕ молочнокислых бактерий и 104 КОЕ дрожжей.
Целью исследования являлось изучение влияния скармливания кормовой добавки «ЭМ-Вита» на молочную продуктивность и иммунный статус коров.
Методика и методы. Для достижения поставленной цели был проведен эксперимент на МТФ ФГУП «Учебно-опытное хозяйство «Кокино» Брянского ГАУ». С учетом породы, возраста, живой массы и продуктивности методом парных аналогов были сформированы 2 группы по 10 голов коров черно-пестрой породы 4-летнего возраста, живой массой 500,50 ± 2,77 кг на 3 месяце лактации, со среднесуточным удоем 14,28 ± 0,12 кг: 1 – контрольная, 2 – опытная. Коровам опытной группы скармливали в течение 4 месяцев кормовую добавку «ЭМ-Вита» в дозе 40 мл/голову/сутки: по схеме 10 суток – скармливание, 7 суток перерыв. Коровы содержались в соответствующих ветеринарно-зоогигиеническим требованиям условиях, получали хозяйственный рацион в соответствии с общепринятыми нормами [5]. Кровь для исследования брали у 5 животных из каждой группы из ярёмной вены утром до основного кормления перед началом опыта (1 взятие), после окончания скармливания препарата (через 4 месяца - 2 взятие) и через месяц после окончания скармливания препарата (3 взятие).
Содержание популяции Т-лимфоцитов (Е-РОЛ %) определяли с помощью реакции розеткообразования лимфоцитов с эритроцитами барана, В-лимфоцитов (М-РОЛ, %) - с эритроцитами мыши [6]. Субпопуляции иммунорегуляторных Т-лимфоцитов, обладающих преимущественно хелперной (Е-РОЛтр, %) и супрессорной (Е-РОЛтч %) активностью, - в тесте с теофиллином [7]. Содержание иммуноглобулинов определяли по Манчини [8]. Показатели гемограммы подсчитывали с использованием геманализатора «Abacus junior vet 5», и анализом мазков крови от подопытных животных, окрашенных по Романовскому-Гимза (300 клеток на мазок). Контроль молочной продуктивности проводился ежемесячно у всех 20 коров методом контрольных доек.
Полученные цифровые данные обработаны методом вариационной статистики. Для выявления статистически значимых различий использован критерий Стьюдента [9], достоверно значимыми изменения считали начиная с р<0,05. В качестве значений физиологической нормы принимали интервалы соответствующих показателей, приведенные в литературе [10, 11, 12, 13, 14].
Результаты исследований
Анализ данных, характеризующих состояние клеточного и гуморального звеньев иммунной системы организма у коров, получавших препарат «ЭМ-Вита», показал отсутствие достоверно значимых изменений по сравнению с контролем. При этом направленность динамики изменений концентрации отдельных классов иммуноглобулинов в сыворотке крови у животных 1 и 2 групп одинакова (IgM - 2,78 ±0,05, 2,83 ± 0,12, 2,87 ± 0,18 мг/мл, и 2,56 ±0,31, 2,65 ±0,16, 2,76 ±0,14 мг/мл; IgG – 22,10 ± 1,07, 20,25 ±1,37, 22,56 ±0,53 мг/мл и 22,64 ± 1,15, 22,06 ± 1,19, 22,60 ± 0,88мг/мл; IgА – 0,37 ± 0,02, 0,39 ± 0,02, 0,41 ± 0,01 и 0,38 ± 0,01, 0,39 ± 0,02, 0,42 ± 0,01мг/мл перед началом опыта, через 4 и 5 месяцев опытного периода соответственно).
Динамика изменений содержания иммунокомпетентных лимфоцитов у коров опытной группы отличалась от контроля. Количество Т-лимфоцитов у коров 1 и 2 группы через 4 месяца опытного периода имело тенденцию к увеличению на 3,66 и 0,78 %. Через месяц после окончания скармливания препарата у контрольных животных установлена тенденция к снижению числа Т-лимфоцитов на 0,71 %, а у опытных, количество этих клеток в крови не изменялось (рис. Е-РОЛ, %). Следовательно, скармливание добавки препятствовало развитию тенденции к снижению числа Т-лимфоцитов и оказало стабилизирующее действие на уровень этих клеток.
Более выраженное влияние скармливание кормовой добавки «ЭМ-Вита» оказало на уровень в крови у коров Т-теофиллинрезистентных Т-лимфоцитов, фракции, обогащённой Т-хелперами (рис. Е-РОЛтр, %). Через 4 месяца опытного периода у коров контрольной группы была отмечена тенденция к снижению уровня этих клеток на 1,53%, а у животных опытной, напротив, к повышению на 1,47%. Через 5 месяцев опытного периода у коров как 1, так и 2 группы установлена однонаправленная тенденция к повышению числа этих клеток в крови на 4,65 и 2,90 % соответственно. Следовательно, скармливание кормовой добавки препятствовало развитию тенденции к снижению уровня Т-лимфоцитов, обладающих преимущественно хелперной активностью.
Направленность изменений числа Т-теофиллинчувствительных Т-лимфоцитов, фракции, обогащённой Т-супрессорами, у коров опытной группы отличался от контроля: у животных 1 группы установлена тенденция к повышению числа этих клеток на 8,45% через 4 месяца опытного периода, а у коров, получавших добавку уровень теофиллинчувствительных Т-лимфоцитов в этот период не изменялся, а затем, как и у животных 1 группы, у них отмечена тенденция к снижению числа этих клеток (рис. Е-РОЛтр, %). Следовательно, скармливание кормовой добавки способствовало сохранению постоянного уровня в крови Т-лимфоцитов, обладающих преимущественно свойствами супрессоров.
Динамика изменений числа В-лимфоцитов у коров опытной группы и контрольной – противоположна. У коров 1 группы отмечена устойчивая тенденция к повышению числа этих клеток на 2,20 и 3,23 % через 4 и 5 месяцев опытного периода соответственно (рис. М-РОЛ, %). У животных, получавших кормовую добавку, напротив, имелась тенденция к снижению на 0,98 и 2,97% соответственно. Следовательно, скармливание препарата обусловило тенденцию к снижению числа В-лимфоцитов в периферической крови у коров.
Количество Т-лимфоцитов (общих) и, в частности обладающих преимущественно супрессорной активностью, у коров опытной группы при одинаковой динамике, было несколько ниже, чем у животных контрольной группы, а Т-лимфоцитов, обладающих преимущественно хелперной активностью, напротив, ниже. Следовательно, использованная добавка обусловила выраженную тенденцию к оптимизации иммунной системы.
При изучении влияния выпаивания пробиотического препарата «ЭМ-Вита» коровам на продуктивность установлено, что среднесуточные удои у подопытных групп перед началом опыта существенно не различались (таблица 1).
Таблица 1
Влияние выпаивания коровам пробиотического препарата «ЭМ-Вита» на молочную продуктивность
|
Дата исследования |
Среднесуточный удой (литр/сут) |
Жир, % |
Белок, % |
|||
|
1 группа, n=10 |
2 группа, n=10 |
1 группа, n=10 |
2 группа, n=10 |
1 группа, n=10 |
2 группа, n=10 |
|
|
17 октябрь |
14,19 ± 0,28 |
14,37 ± 0,29 |
3,78 ± 0,01 |
3,87 ± 0,02 |
3,00 ± 0,00 |
3,03 ± 0,00 |
|
17 ноябрь |
14,38 ± 0,29 |
16,44 ± 0,27* |
3,78 ± 0,01 |
3,99 ± 0,01* |
3,00 ± 0,00 |
3,14 ± 0,00* |
|
17 декабрь |
14,31 ± 0,28 |
17,39 ± 0,28* |
3,78 ± 0,01 |
4,01 ± 0,00* |
3,01 ± 0,00 |
3,2 ± 0,00* |
|
17 январь |
14,37 ± 0,28 |
17,36 ± 0,27* |
3,78 ± 0,01 |
4,02 ± 0,00* |
3,01 ± 0,00 |
3,2 ± 0,00* |
|
17 февраль |
14,39 ± 0,27 |
17,39 ± 0,27* |
3,79 ± 0,01 |
4,04 ± 0,02* |
3,01 ± 0,00 |
3,2 ± 0,00* |
Примечание: - * - р<0,05 к 1 группе, ▪ - р<0,05 к началу опыта.
Уже через месяц применения препарата у коров опытной группы установлено повышение среднесуточных удоев на 14,60%, жира в молоке на 5,56% и белка в молоке на 4,67% (р<0,05) по сравнению с аналогичными показателями у животных контрольной группы. Через 2 месяца применения препарата обнаружено ещё более выраженное повышение показателей продуктивности по сравнению с коровами контрольной группы: среднесуточных удоев на 21,52%, жира в молоке на 6,08% и белка в молоке на 6,31% (р<0,05). Более длительное выпаивание кормовой пробиотической добавки «ЭМ-Вита» (в следующие 2 месяца) не вызвало дальнейшего повышения изученных показателей продуктивности коров.
Заключение. Выпаивание коровам кормовой пробиотической добавки «ЭМ-Вита» по схеме «10 через 7» уже через 1 месяц обусловило достоверно значимое увеличение молочной продуктивности, через 2 месяца использования препарата повышение среднесуточного удоя, жира и белка в молоке у коров было еще боле выраженным. Использованная добавка обусловила выраженную тенденцию к оптимизации иммунной системы.
Литература:
1. Татарникова Н. А., Жданова И. Н. Эффективность биоинфузина и бактоцеллолактина при послеродовой патологии у коров // Ветеринария. 2013. № 3. С. 8 – 10.
2. Татарникова Н. А., Пермякова И. Н. Биоинфузин и его применение для профилактики послеродовых заболеваний коров // Аграрный вестник Урала. 2010. №11-2(78). С. 41-42.
3. Антипов В. А. Современные состояния отечественной ветеринарной фармакотерапии и лекарствоведения // Теоретические и практические аспекты возникновения и развития болезней животных, и защита их здоровья в современных условиях: Материалы междунар. конф. — Воронеж. 2002. Т. 2. С. 3 – 4.
4. Земсков А. М. Клиническая иммунология. — М.: ГЭОТАР-Медиа, 2006. С. 174 – 180.
5. Нормы и рационы кормления сельскохозяйственных животных. Справочное пособие/Под ред. А.П.Калашникова, В.И. Фисинина, В.В. Щеглова, Н. И. Клейменова: 3е изд. перераб и доп. – М.: Агропромиздат, 2003. – 456 с.
6. Понякина И.Д., Лебедев К.А., Васенович М.И. и др. Способ определения иммунологического состояния организма. А. с. 1090409 (РФ) МКИ3 А 61 К 39/00, №3429. 198/28-13; заявл. 23.04.82; опубл. 07.05.84, Бюл. №17.
7. Петров Р.В., Хаитов Р.М., Пинегин Б.В. и др. Оценка иммунного статуса человека при массовых обследованиях (Методология и методические рекомендации).- М.: Медицина, 1989.- 153 с.
8. Бэм Э. Простая радиальная иммунодиффузия по Манчини // Иммунологические методы.- М.: Мир, 1987.- С. 49-57.
9. Плохинский Н.А. Биометрия. Из-во Сибирского отделения АН СССР, Новосибирск, 1961. – 362 с.
10. Чумаченко В.Е., Высоцкий А.М., Сердюк Н.А., Чумаченко В.В. Определение естественной резистентности и обмена веществ у сельскохозяйственных животных.- Киев: Урожай, 1990.- 136 с.
11. Карпуть И.М. Гематологический атлас сельскохозяйственных животных.- Мн.: Ураджай, 1986.- 183 с.
12. Кондрахин, И.П. Методы ветеринарно-клинической лабораторной диагностики / И.П. Кондрахин, А.В. Архипов, В.И. Левченко, и др.: Справочник / Под ред. И.П. Кондрахина. М.: КолосС., - 2004. - 250с.
13. Карпуть И.М. Гематологический атлас сельскохозяйственных животных.- Мн.: Ураджай, 1986.- 183 с.
14. Tizard, I.R. Veterinary Immunology. An Introduction. Eighth Edition – W.B. Saunders Co, Philadelfhia / London / Toronto / Montreal / Sydney / Tokyo. – 2009. - 574 p.
15. Лебедько Е. Я., Данилкив Э.И. Иммуногенетическая экспертиза достоверности происхождения племенного крупного рогатого скота: Учебное пособие. – Ростов - на - Дону: Феникс, 2007. – 84 с.
