Исследовано содержание гликогена в эндометрии у 78 женщин в возрасте 23–42 лет при использовании инертных внутриматочных контрацептивных средств (ВМК) от 1 года до 12 лет. Биопсию эндометрия проводили в различные фазы менструального цикла. Гликоген выявляли методом Шабадаша с контрольной обработкой срезов амилазой слюны в течение 5 мин. Параллельно с гистохимическим проводилось гистологическое исследование эндометрия. Количественную оценку проводили по методу Astaldi в модификации Павловой А. Б.
Ключевые слова:внутриматочная контрацепция, гликоген, слизистая оболочка матки, механизм действия внутриматочной контрацепции, мукополисахариды.
Проблема регулирования рождаемости — одна из самых актуальных проблем современного общества [7, 10]. Нередко обстоятельства складываются так, что женщина временно не может иметь детей по состоянию здоровья или вследствие каких-то иных причин [5, 8]. Кроме того, опыт ВОЗ показывает, что обеспечение интервалов между родами не менее чем 2–2,5 года, позволяет снизить детскую смертность в родах в 4, а материнскую — в 2 раза [3]. Одним из самых распространенных методов контрацепции в нашей стране считаются внутриматочные контрацептивные средства (ВМК). Интерес авторов вызывают различные аспекты использования ВМС [9, 10].При применении ВМК исследователи обнаруживали в эндометрии различные патологические процессы [10, 6, 8]. Клетки эпителия желез эндометрия человека обладают способностью секретировать гликоген. Изучение содержания гликогена в эндометрии позволяет судить о функциональной активности последнего и о гормональных влияниях на него [9]. Содержание гликогена в эндометрии в различные фазы менструального цикла изучали ряд авторов [1–4], однако результаты этих исследований разноречивы.
Целью настоящей работы явилось гистохимическое исследование содержания гликогена в эндометрии женщин, применяющих инертные внутриматочные контрацептивы — ВМК в течение 6 мес — 12лет.
Материал иметоды исследования. Слизистая оболочка матки исследована у 78 здоровых женщин в возрасте 23–42 лет в различные фазы менструального цикла. До 1 года пользовались ВМК 8 женщин, до 3 лет — 15, до 5 лет — 21, до 7 лет — 18, до 10 лет — 9, более 10 лет — 7 женщин. Контрольную группу составили 20 здоровых женщин в возрасте от 21 года до 38 лет, во время обследования не применявших ВМК, но в дальнейшем использовавших этот вид контрацепции.
Биопсию эндометрия проводили в различные фазы менструального цикла. В основной группе цуг или соскоб эндометрия получали при наличии ВМК или сразу после его удаления. Эндометрий фиксировали в 10 % растворе нейтрального формалина и после соответствующей гистологической обработки готовили парафиновые срезы толщиной б—9 мкм. Гликоген выявляли методом Шабадаша с контрольной обработкой срезов амилазой слюны в течение 5 мин. Параллельно с гистохимическим проводилось гистологическое исследование эндометрия (окраска гематоксилином и эозином).
Количественную оценку гистохимических реакций на гликоген проводили по методу Astaldiв модификации А. Б. Павловой и соавт. Интенсивность окраски гликогена, выявляемого гистохимическим методом, оценивали в 100 клетках: интенсивное (+ + +), умеренное (+ +),слабое (+) окрашивание, 0 — отсутствие окраски. Средний гистохимический цветовой показатель (СГЦП) определяли как частное от деления на 100 суммы произведений количества клеток на соответствующее им количество плюсов интенсивности окрашивания. Полученные данные обрабатывали статистически с использованием критерия достоверности Стьюдента.
Результаты исследования иих обсуждение. В контрольной группе женщин фаза пролиферации характеризовалась низким уровнем гликогена как в клетках эпителия желез (СГЦП=1,03±0,01), так и в клетках стромы (СГЦП=0,52±0,01) эндометрия. С 5-го по 10-й день менструального цикла в клетках эпителия желез гликогена содержалось мало. В стадии поздней пролиферации (11–14-й день) в базальных отделах эпителиальных клеток большинства желез гликоген появлялся в виде мелких гранул. В строме гликоген определялся в незначительном количестве в цитоплазме клеток, расположенных вблизи желез. С 16–17 го по 23–24-й день менструального цикла обнаруживались крупные гранулы гликогена, преимущественно в апикальных частях клеток желез эндометрия, хорошо прослеживался апокриновый характер секреции (СГЦП=2,59±0,03). Из-за обилия гликогена во многих клетках ядра располагались у базальной мембраны. К концу секреторной фазы цикла гликоген определялся преимущественно внеклеточно, в эпителии большинства желез гликоген отсутствовал (СГЦП=0,09±0,01). В фазу секреции гликоген выявлялся постоянно в клетках стромы, при этом интенсивность накопления его была меньше, чем в эпителиальных клетках (СГЦП= 1,83 ±0,02).
Таким образом, определение содержания гликогена в эндометрии здоровых женщин детородного возраста показало, что интенсивность его накопления на протяжении менструального цикла постоянно меняется и определяется воздействием половых гормонов.
У женщин, применявших ВМК, на 8–10-й день менструального цикла гликоген в железистом эпителии эндометрия обнаруживался в виде небольших гранул, преимущественно в апикальной части клеток (СГЦП=1,24±0,01; р>0,05).
В клетках стромы встречались единичные гранулы гликогена (СГЦП=0,49±0,01; р>0,05), т. е. в железистом эпителии эндометрия в пролиферативную фазу менструального цикла на фоне применения ВМК отмечалась тенденция к накоплению гликогена.
В секреторную фазу менструального цикла содержание гликогена в железах было примерно таким же, как в контроле (СГЦП=2,32±0,02; р>0,05). Распределялся он преимущественно в апикальной части клеток железистого эпителия эндометрия. В клетках стромы гликоген выявлялся в меньшем количестве по сравнению с контрольной группой (СГЦП= 1,34 ±0,01; р>0,05). Анализ данных гистохимического исследования в зависимости от срока применения ВМК показал, что подобное распределение гликогена в эндометрии происходит в течение 1-го года после введения контрацептива и в дальнейшем (при более длительном его использовании) не претерпевает значительных изменений.
Результаты наших исследований, как и данные Б. И. Железнова, В. И. Грищенко, показывают, что при применении ВМК в секреторной фазе менструального цикла накопление гликогена в строме эндометрия уменьшается. Это может свидетельствовать о повышенном расходовании гликогена вследствие усиления обменных процессов в эндометрии при наличии в полости матки контрацептива. Известно, что увеличение содержания гликогена в секреторную фазу цикла в эндометрии способствует нидации оплодотворенной яйцеклетки.
По данным Л. А. Мозжухиной, уменьшение содержания гликогена в эндометрии может быть причиной бесплодия и привычных выкидышей. Можно предположить, что выявленное нами уменьшение содержания гликогена в строме слизистой оболочки матки в секреторную фазу цикла является одним из механизмов контрацептивного действия ВМК. Однако следует учитывать и данные Hugesи Csermely, показавших, что одинаковое содержание гликогена в пролиферативную и секреторную фазы может свидетельствовать об усиленной пролиферации клеток эндометрия.
При гистохимическом исследовании цугов эндометрия у 18 женщин через 6 мес. после удаления ВМК. У 15 из них выявлено нормальное содержание гликогена в слизистой оболочке матки. СГЦП составил в железистом эпителии 1,5±0,01 в фазу пролиферации и 2,63 ±0,03 в фазу секреции, в клетках стромы — соответственно 0,54±0,0 и 1,79±0,02 (при сравнении с контролем р>0,05).
Выводы. Таким образом, выявленное уменьшение количества гликогена в строме эндометрия секреторной фазы и тенденцию к накоплению его в эндометрии пролиферативной фазы цикла при применении ВМК можно рассматривать как изменение функционального состояния слизистой под действием ВМК. Эти данные подтверждают значение эндометриального фактора в достижении контрацептивного эффекта ВМК.
Литература:
- Железнов Б. И. Структурные и гистохимические особенности эндометрия женщин при применении внутриматочных контрацептивов различного типа/ Железнов Б. И., Ежова Л. С., Антипова Н. Б.//Акушерство и гинекология. -1999. -№ 7. –С. 43–45.
- Лалаян Р. С., Кузмицкая Е. В., Трухан О. В. Комплексный подход в лечении инфекционно-воспалительных заболеваний половых органов //Электронный научно-образовательный вестник Здоровье и образование в ХХI веке. — 2006. -№ 8.
- Мозжухина Л. А. О содержании свободного и связанного гликогена в эндометрии женщин, страдающих привычным выкидышем // Современные проблемы биохимии дыхания и клиники. – М., 1990. –С. 172–174.
- Петров Ю. А. Аспекты микробиологической и иммунной диагностики хронического эндометрита // Современные проблемы науки и образования. — 2016. -№ 4. –С.9
- Петров Ю. А. К вопросам патогенеза хронического эндометрита // Вестник Российского университета дружбы народов. Серия: Медицина. -2011. -№ 6. — С. 386–392.
- Петров Ю. А. Микробиологические детерминанты хронического эндометрита //Известия высших учебных заведений. Северо-Кавказский регион. Серия: Естественные науки. — 2011. -№ 6. –С.110–113.
- Петров Ю. А. Современный взгляд на лечение хронического эндометрита в когортах с ранними репродуктивными потерями // Вестник Российского университета дружбы народов. Серия: Медицина. — 2011. — № 6. –С. 274–281.
- Петров Ю. А. Оценка онкологического риска внутриматочной контрацепции на основе цитологических исследований эндометрия // Вопросы онкологии. -1985. -№ 12. –С. 53–56.
- Петров Ю. А. Пролиферативные изменения слизистой оболочки тела и шейки матки у женщин, применяющих внутриматочные контрацептивы / Петров Ю. А., Ковалева Э. А. // Вопросы онкологии. — 1986. -№ 3. — С 49–52.
- Петров Ю. А. Внутриматочная контрацепция /Петров Ю. А., Рымашевский Н. В., Ковалева Э. А. -Ростов-на-Дону: Издательство Ростовского университета, 1990. — 176с.
