Введение

Болевой синдром, являясь универсальным клиническим признаком многих патологических состояний, остаётся одной из актуальных проблем медицины и фармакологии. Известно, что существующие анальгетические средства, применяемые для фармакологического управления острыми и хроническими болевыми состояниями, в частности опиоиды и нестероидные противовоспалительные препараты, несмотря на высокую терапевтическую эффективность, имеют ограничения в длительном применении из-за серьёзных побочных реакций, включая гастротоксические, нефротоксические и нейрогуморальные осложнения [1–3]. Поэтому поиск новых анальгетических веществ с высоким профилем безопасности, стабильной эффективностью и природным происхождением является одним из приоритетных направлений современной экспериментальной фармакологии.

В последние годы значительно расширились научные исследования по изучению влияния биологически активных компонентов лекарственных растений на ноцицептивные и воспалительные процессы. В частности, способность флавоноидов, иридоидов, фенольных соединений и терпеноидов подавлять биосинтез простагландинов, модулировать активность циклооксигеназной системы и снижать активность медиаторов боли подтверждает их анальгетический потенциал [4–6]. Это усиливает необходимость выделения новых фармакологически активных соединений из растительных источников и их оценки в качестве обезболивающих средств.

Новое исследуемое растение Phlomis thapsoides L. вызывает особый интерес. Хотя в народной медицине оно используется при состояниях, связанных с воспалением и болью, его фармакологические свойства, в частности обезболивающая активность, изучены недостаточно глубоко. У некоторых представителей рода Phlomis выявлено антиоксидантное и противовоспалительное действие их биологически активных метаболитов [7,8], однако данные об эффективности фракций Phlomis thapsoides L. на ноцицептивных моделях боли отсутствуют.

Изучение анальгетического действия этой фракции на химических моделях боли важно не только для раскрытия её фармакодинамических свойств, но и для формирования научной основы создания новых анальгетических средств на основе природного сырья. Экспериментальная оценка анальгетической активности фракции, выделенной из Phlomis thapsoides L., на модели боли, индуцированной уксусной кислотой, имеет актуальное научно-практическое значение.

Цель исследования: экспериментальная оценка анальгетической активности фракции, выделенной из Phlomis thapsoides L., на модели химической боли, индуцированной уксусной кислотой, определение её дозозависимой эффективности и сравнительный фармакологический анализ с референтным препаратом.

Материалы и методы. Исследования проведены на беспородных белых мышах-самцах массой тела 19–21 г. Перед экспериментом животные были адаптированы в течение 7 дней в условиях вивария. В процессе содержания обеспечивались стандартные лабораторные условия: температура в помещении поддерживалась на уровне 23±2 °C, соблюдался 12/12-часовой режим свет/темнота, животные имели свободный доступ к стандартному гранулированному корму и воде.

Дозы исследуемого вещества и методы его введения были выбраны в соответствии с действующими методическими рекомендациями по экспериментальному (доклиническому) исследованию новых фармакологических веществ [9,10]. Все эксперименты выполнены с соблюдением норм биоэтики, в том числе в соответствии с требованиями Европейской конвенции по защите позвоночных животных, используемых в научных целях (Страсбург, 1986), и Директивы ЕС 2010/63/EU [11,12].

Экспериментальные животные были распределены методом случайного отбора в группы по 6 особей в каждой. Исследуемую фракцию вводили перорально (интрагастрально) с помощью атравматического зонда в дозах 1,0–5,0–10,0–25,0–50,0–100,0–150,0–200,0 мг/кг. Через 60 минут после введения фракции для создания модели химической боли в брюшную полость животных вводили 2,5 % раствор уксусной кислоты в дозе 250,0 мг/кг, на основании чего оценивали анальгетическую активность исследуемого соединения [13,14].

Полученные экспериментальные результаты представлены в виде M±m. Статистическую достоверность различий между группами определяли с помощью t-критерия Стьюдента, для множественных сравнений между контрольной и экспериментальными группами применяли однофакторный дисперсионный анализ (One-way ANOVA). Статистически достоверными считали различия при уровне p<0,05 и p<0,01.

Анальгетическую эффективность определяли в процентах на основании степени изменения показателей болевой реакции по сравнению с контрольной группой, а обезболивающую активность исследуемого вещества оценивали на основе сравнительного фармакологического анализа.

Результаты. На модели химической ноцицептивной боли, вызванной уксусной кислотой, у животных контрольной группы количество корчей составило 38,7±1,5, что подтвердило выраженное развитие болевой реакции в модели.

Референтный препарат кетопрофен достоверно подавлял болевую реакцию во всех изученных дозах. При введении препарата в дозе 1,0 мг/кг количество корчей уменьшилось до 20,4±1,0, болевая реакция подавлена на 47,2 %. При увеличении дозы препарата до 5,0 мг/кг этот показатель составил 17,6±0,9, анальгетическая эффективность достигла 54,5 %. При дозе 10,0 мг/кг на фоне уменьшения количества корчей до 14,2±0,8 наблюдалось подавление болевой реакции на 63,3 %. Все результаты были высокодостоверны по сравнению с контрольной группой (p<0,01), что подтвердило дозозависимое анальгетическое действие кетопрофена.

Фракция, выделенная из Phlomis thapsoides L., также проявила значительные обезболивающие свойства в данной модели. При начальной дозе 1,0 мг/кг количество корчей уменьшилось до 26,3±1,2, анальгетический эффект составил 32,0 %. При дозе 5,0 мг/кг количество корчей снизилось до 22,8±1,1, эффективность достигла 41,0 % (p<0,05). Эти результаты показывают, что фракция даже в низких дозах обладает способностью подавлять болевые импульсы.

При увеличении дозы фракции до 10,0 мг/кг анальгетический эффект ещё более усилился: количество корчей уменьшилось до 14,6±0,9, торможение болевой реакции составило 62,2 % (p<0,01). Максимальная эффективность наблюдалась при дозе 25,0 мг/кг: количество корчей снизилось до 11,4±0,7, анальгетическая активность достигла 70,5 %. Данный показатель свидетельствует о том, что активность фракции сопоставима с активностью референтного препарата.

При последующих дозах (50,0; 100,0; 150,0; 200,0 мг/кг) анальгетическая активность сохранялась, однако наблюдалось относительное снижение эффективности. При введении фракции в дозе 50,0 мг/кг болевая реакция снизилась до 60,7 %, при дозе 100,0 мг/кг — до 51,1 %, при дозе 150,0 мг/кг — до 40,3 %, а при дозе 200,0 мг/кг — до 30,2 %. Это указывает на то, что оптимальная фармакологическая эффективность фракции находится в диапазоне около 25,0 мг/кг, и при более высоких дозах наблюдается некоторое ослабление эффекта. Результаты эксперимента подробно представлены в таблице 1.

Таблица 1

Анальгетическая активность фракции, полученной из Phlomis thapsoides L., в тесте химической боли, M±m, n=6

Примечание: результаты представлены в виде M±m (n=6). * — p<0,05; ** — p<0,01 по сравнению с контрольной группой.

Результаты проведённых исследований показали, что фракция Phlomis thapsoides L. проявляет выраженную и дозозависимую анальгетическую активность на модели химической боли, индуцированной уксусной кислотой. Было установлено, что доза 25,0 мг/кг исследуемой фракции является наиболее эффективной. Это обосновывает, что данная фракция является важным кандидатом для более углублённых экспериментальных и фармакологических исследований в качестве перспективного обезболивающего средства на основе природного сырья.

Вывод. Результаты проведённых экспериментальных исследований показали, что фракция, выделенная из Phlomis thapsoides L., проявляет выраженную анальгетическую активность на модели химической ноцицептивной боли. Обезболивающий эффект фракции носит дозозависимый характер, причём наивысшая фармакологическая активность наблюдалась при дозе 25,0 мг/кг. Результаты исследований, проведенных у животных, получивших эту дозу, были сопоставимы с действием референтного препарата кетопрофена. Полученные результаты исследования подтверждают, что фракция Phlomis thapsoides L. является тем соединением, которое подлежит более углублённым фармакологическим и механистическим исследованиям в качестве нового перспективного обезболивающего средства на основе природного сырья.

Данные научные исследования выполнены в рамках бюджетного проекта Института.

Литература:

1. World Health Organization. WHO guidelines for the pharmacological treatment of persisting pain in adults. — Geneva: WHO, 2023.
2. Brunton L. L., Hilal-Dandan R., Knollmann B. C. Goodman & Gilman’s The Pharmacological Basis of Therapeutics. — 14th ed. — New York: McGraw-Hill, 2022.
3. International Association for the Study of Pain. Pain mechanisms and management recommendations [Электронный ресурс]. — URL: https://www.iasp-pain.org.
4. Salatino A., et al. Biological activities of species of the genus Phlomis // Phytochemistry. — 2022. — Vol.158. — P.105156.
5. Kirmizibekmez H., et al. Iridoids and flavonoids from Phlomis species and their pharmacological activity // Phytomedicine. — 2023. — Vol.117. — P.154902.
6. Recent advances in plant-derived analgesic compounds // Journal of Ethnopharmacology. — 2023. — Vol.310. — P.116–128.
7. Natural modulators of inflammatory pain pathways // Biomedicine & Pharmacotherapy. — 2024. — Vol.171. — P.115762.
8. National Center for Biotechnology Information. Medicinal plants and analgesic bioactive compounds [Электронный ресурс]. — URL: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov.
9. Хабриева Р. У. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. М. Медицина, 2005.832 с.
10. European Convention for the Protection of Vertebrate Animals Used for Experimental and Other Scientific Purposes. — Strasbourg: Council of Europe, 1986.- 53 p.
11. Directive 2010/63/EU of the European Parliament and of the Council of 22 September 2010 on the protection of animals used for scientific purposes // Official Journal of the European Union. — 2010. — L276. — P.33–79.
12. Миронов А. Н. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. Часть 1. М: Гриф и К, 2012, c. 673.
13. Стефанова А. В. «Доклинические исследования лекарственных средств», Киев «Издательство Авиценна» 2002, Часть I, с. 579.