Представители рода Mentha являются ценными растениями, используемыми в народной и официальной медицине, как в России так и за рубежом. При этом в качестве сырья, как правило, используют надземную часть растения. С нашей точки зрения перспективным источником биологически активных соединений также является корневище мяты длиннолистной. В настоящей работе приводятся результаты фитохимических исследований корневищ мяты длиннолистной (Пензенская область 2009 г.). Анализ водно-спиртовых извлечений из анализируемого сырья проводили методом спектрофотометрии, а также тонкослойной хроматографии. В результате проведенных экспериментов было выявлено присутствие простых фенольных соединений, хорошо извлекаемых спиртом этиловым 70 %. В липофильных извлечениях из корневищ обнаружена группа веществ тритерпеновой природы. Полученные результаты говорят о перспективности дальнейшего углубленного изучения химического состава данного сырья, а также фармакологической активности извлечений на его основе.
Ключевыеслова: мята длиннолистая, корневище, фитохимический анализ, фенилпропаноиды.
Members of the genus Mentha are valuable plants which are used in traditional and official medicine in Russia and other countries. Generally, only aboveground part of the plant is used as a row material. In our opinion, the promising source of biologically active compounds is also rhizome mint longifolia. This study, presents the results of phytochemical research of rhizome mint longifolia (Penza region 2009). Analysis of water-alcohol extraction from the analyzed raw materials was carried out by spectrophotometry and thin-layer chromatography. A group of substances of triterpenoid nature was discovered in lipophilic extracts from rhizomes. The obtained results indicate the prospects of further in-depth study of the chemical composition of this raw material and pharmacological activity of extract based on it.
Keywords: mint longifolia, rhizome, phytochemical analysis, the phenylpropanoids.
Известно, что поиск новых лекарственных растений является актуальным направлением в современной фармации. Одним из таких растений является мята длиннолистная (MenthalongifoliaL.) [3]. В настоящее время отечественными и зарубежными учеными проявлен интерес к надземной части указанного растения, в частности, изучены химический состав и некоторые фармакологические эффекты [4,5]. Однако в научной литературе отсутствуют данные о химическом составе и фармакологических эффектах извлечений на основе корневищ мяты длиннолистной.
Целью работы являлось изучение фенольных и терпеновых соединений корневищ мяты длиннолистной, произрастающей в Пензенской области.
Объектом исследований являлись воздушно-сухие корневища мяты длиннолистной, собранные в августе — сентябре 2009 года. Сушка осуществлялась естественным способом под навесом без доступа прямых солнечных лучей. Видовую специфичность объекта растительного объекта подтверждали с помощью определителей флоры средней полосы РФ [3], а также с помощью гербарного фонда кафедры фармакогнозии ГБОУ ВПО СамГМУ Минздрава РФ.
В качестве методов анализа химического состава извлечений из объекта использовали хроматографию в тонком слое сорбента (ТСХ) и спектральный анализ. Разделение суммы веществ проводили на пластиках марки Sorbfil (ПТСХ-АФ-А-УФ) в различных системах хроматографирования (бутанол-уксусная кислота-вода в соотношении 4:1:2; хлороформ — этанол в соотношении 19:1). Детектирование веществ на хроматограммах проводили по флуоресценции в УФ-свете (254 и 366 нм), а также окрашивании при обработке реактивами раствором диазобензолсульфокислоты (ДСК) (обнаружение фенольных соединений) [6], 10 % раствором фосфорно-молибденовой кислоты в спирте (ФМК) (стерины, тритерпены, фенольные соединения), 20 % раствором серной кислоты (стерины, тритерпены, флавоноиды) [6].
Помимо ТСХ для подтверждения структуры обнаруженных соединений использовали УФ-спектроскопию. Анализ спектров поглощения проводили на спектрофотометре — Specord 40 (AnalytikJena) в кюветах с толщиной слоя 10 мм. Раствором сравнения служил спирт этиловый 96 %.
Количественное определение простых фенолов в испытуемых образцах осуществляли методом прямой и дифференциальной спектрофотомерии в пересчете на РСО «Хлорогеновая кислота» [1].
В результате проведенных экспериментов было выявлено присутствие простых фенольных соединений, наиболее полно извлекаемых 70 % этиловым спиртом. Для большинства выявленных фенолов характерна голубая или светло-синяя флуоресценция при λ=366 нм и окрашивание в розовый или оранжевый цвет при обработке диазореактивом пятна с Rf = 0,42; 0,5; 0,71 (Рис.1 А, Б).
В извлечениях на 96 % этиловом спирте обнаружено присутствие группы веществ тритерпеновой природы. Тритерпены разделяли в агликоновой смеси растворителей (хлороформ — этанол 19:1). На хроматограммах тритерпены выявляли по розовому окрашиванию после обработки 20 % раствором серной кислоты и нагревании при 100°С. В описанных условиях хроматографирования пятна веществ терпеновой природы имели подвижность Rf =0,28; 0,43 (Рис.1 В)
Рис. 1. Хроматограммы водно-спиртовых извлечений корневищ мяты длиннолистной: А — бутанол-уксусная кислота-вода (4:1:2), обработка реактивом ДСК, Б — бутанол-уксусная кислота-вода (4:1:2), детектирование в УФ-свете при λ = 366 нм; В — хлороформ : этанол (19:1), обработка реактивом серной кислотой. Обозначения: извлечения на 1- 40 % этаноле; 2- 70 % этаноле; 3- 96 % этаноле; 4- хлороформе.
Анализ спектров поглощения извлечений изучаемого объекта позволил выявить характерные максимумы в области 290 нм и 330 нм (Рис.2 А), что соответствует спектральным характеристикам ряда фенилпропаноидных соединений [1,2].
Анализ дифференциальной кривой спектра поглощения при добавлении комплексообразователя AlCl3 позволил выявить дифференциальный максимум в области 360 нм (Рис. 2 Б), что соответствует спектральных характеристикам хлорогеновой кислоты [1, 2].
Количественное определение суммы простых фенолов в пересчете на хлорогеновую кислоту и абсолютно сухое сырье при длине волны дифференциальной кривой спектра поглощения 360 нм составило 2,3 % (Рис.2 Б).
Рис.2. Спектральные кривые поглощения водно-спиртового извлечения из корневища мяты длиннолистной на 70 % этиловом спирте: А — Батахромный сдвиг при добавлении AlCl3; Б — Дифференциальная кривая
Рис. 3.Гистограмма сравнения концентрации простых фенольных соединений в извлечениях из корневищ мяты длиннолистой на разных концентрациях спирта
Сравнение концентраций простых фенольных соединений в извлечениях из корневищ на различных концентрациях спирта этилового позволило сделать вывод о том, что наибольшая извлекающая способность данной группы веществ у 70 % этанола (Рис.3).
Таким образом проведенные исследования позволили выявить наличие групп потенциально биологически активных соединений в корневищах мяты длиннолистной, в частности простых фенолов (фенилпропаноидов) и тритерпеновых соединений.
Полученные данные говорят о возможном наличии характерных фармакологических эффектов у извлечений из корневищ мяты длиннолистной, свойственных фенилпропаноидам [2], что говорит о перспективности этого сырья, как источника препаратов с иммуномодулиющей активностью.
Литература:
- Азнагулова А.В., Куркин В.А. «Современные подходы к стандартизации нового вида лекарственного растительного сырья — травы одуванчика лекарственного (TaraxacumofficinaleWigg.)» Вестник Пермской государственной фармацевтической академии. Материалы научно-практической конференции с международным участием «Фармацевтическая наука: достижения, инновации и перспективы». — 2015. — № 16. — С. 10-11.
- Куркин В.А. Фенилпропаноиды — перспективные природные биологически активные соединения. — Самара: СамГМУ, 1996. — 80 с.
- Маевский П.Ф. Флора средней полосы европейской части России. 10-е изд. Москва: Товарищество научных изданий КМК.- 2006.- С. 443
- Сидакова Т.М., Попова О.И., Саджая Л.А., Сергеева Е.О. Определение острой токсичности водного и спиртового извлечений травы мяты длиннолистной (Mentha longifolia L.) // Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии.-2011.-Т. 9, № 5.-С. 13-15.
- Тохсырова Т.М., Попова О.И. Определение фенольных соединений травы мяты длиннолистной // Фармация.-2009.-№ 1.-С. 24-25.
- Шаршунова, М. Тонкослойная хроматография в фармации и клинической биохимии / М. Шаршунова, В. Шварц, Ч. Михалец. — М.: Мир, 1980. — Т. 1,2. — С. 20.
