Введение

Болевой синдром является одним из наиболее распространённых патологических состояний в медицинской практике и служит основным фактором, снижающим качество жизни пациентов при заболеваниях различной этиологии. Несмотря на широкое применение опиоидных анальгетиков и нестероидных противовоспалительных средств (НПВС), предназначенных для устранения боли, их длительное использование ограничивается повреждением слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта, нефротоксичностью, гепатотоксичностью, а также побочными эффектами, связанными с их влиянием на центральную нервную систему [1,2]. Поэтому поиск новых анальгетических средств, обладающих высокой эффективностью, малотоксичных и безопасных, остаётся одним из приоритетных направлений современной экспериментальной фармакологии.

В последние годы особый научный интерес вызывают анальгетические и противовоспалительные свойства биологически активных соединений фенольной природы, выделенных из природных источников, в частности из лекарственных растений. Данные соединения могут уменьшать болевой синдром путём снижения окислительного стресса, ослабления свободнорадикальных процессов и влияния на передачу ноцицептивных импульсов [3,4]. Особенно антиоксидантные и мембраностабилизирующие свойства фенольных соединений позволяют рассматривать их как перспективные природные анальгетические средства.

Psoralea drupacea L. является одним из перспективных лекарственных растений, богатых биологически активными веществами; установлено, что в его составе присутствуют флавоноиды, кумарины и другие производные фенолов [5]. Эти вещества важны тем, что могут фармакологически воздействовать на медиаторы боли и воспаления. Однако анальгетическая активность суммы фенольных соединений, выделенной из Psoralea drupacea L., в частности механизмы действия на моделях термической боли, изучены недостаточно. Учитывая вышеизложенное, изучение анальгетической активности суммы фенольных соединений, выделенной из Psoralea drupacea L., на экспериментальных моделях важно как в теоретическом, так и в практическом аспекте и служит научной основой для создания новых обезболивающих средств растительного происхождения.

Цель исследования: изучение анальгетической активности суммы фенольных соединений, выделенной из Psoralea drupacea L., на модели термической боли в тесте «горячая пластина» (Hot Plate).

Материалы и методы. Эксперименты проведены на беспородных белых мышах-самцах массой тела 19–21 г; животные были адаптированы в течение 10 дней в условиях вивария (23±2 °C, режим освещения 12/12 часов свет/темнота) со свободным доступом к стандартному гранулированному корму и воде. Выбор доз и методы введения осуществляли в соответствии с требованиями действующего руководства по доклиническим исследованиям [6]. Исследования проводили с соблюдением норм биоэтики, включая требования Европейской конвенции (1986) и Директивы ЕС 2010/63/EU [7,8]. В каждую группу было случайным образом были отобраны по 6 животных. Перед пероральным (интрагастральным) введением нового исследуемого соединения в дозах 1.0, 5.0, 10.0, 25.0, 50.0, 100.0, 150.0, 200.0 мг/кг с помощью атравматического зонда у всех животных регистрировали исходный показатель в тесте «горячая пластина» в нормальном состоянии, а через 60–120 минут после введения препарата оценивали влияние исследуемого вещества на латентный период болевой реакции.

Тест « горячая пластина » является одним из классических методов скрининга анальгетической активности, основанным на оценке болевых реакций, формирующихся с участием супраспинальных нервных структур. Данная модель проводится на крысах и мышах: животное помещают на металлическую пластину, нагретую до 57 °C и окружённую защитным цилиндром. В ходе эксперимента определяют латентное время от момента помещения животного на горячую поверхность до возникновения поведенческих реакций в ответ на болевой стимул, а именно: облизывание задней лапы, прыжок или отдёргивание лапы. Достоверное удлинение этого латентного периода после введения исследуемого вещества оценивается как критерий снижения болевой чувствительности и наличия анальгетической активности у вещества [9–12].

Статистический анализ полученных экспериментальных результатов представлен в виде M±m. Достоверность различий между группами оценивали с помощью t-критерия Стьюдента. При сравнении нескольких групп с контрольной группой применяли однофакторный дисперсионный анализ (One-way ANOVA). Различия считали статистически достоверными при уровне p<0.05 и p<0.01. Анальгетическую активность рассчитывали в процентах на основе удлинения латентного периода по сравнению с исходным нормальным показателем и сравнивали с показателем контрольных животных.

Результаты. Анальгетическая активность суммы фенольных соединений, выделенной из Psoralea drupacea L., была оценена на модели термической боли («горячая пластина»). Результаты исследования представлены в виде M±m (n=6).

В контрольной группе (животные, получившие 0.2 мл физиологического раствора) латентный период болевой реакции в норме составил 14.0±0.4 секунды, а через 60 минут этот показатель был равен 14.2±0.5 секунды — статистически значимых изменений не наблюдалось. Этот результат указывает на отсутствие спонтанного анальгетического эффекта в экспериментальной модели.

В группах, получавших референтный препарат кетопрофен, было выявлено достоверное удлинение латентного периода болевой реакции по сравнению с контрольной группой. При применении препарата в дозе 1.0 мг/кг этот показатель составил 20.1±1.2 секунды, анальгетическая активность возросла на 41.5 % (*p<0.01). При увеличении дозы до 5.0 мг/кг латентный период достиг 21.6±1.3 секунды, активность составила 56.5 %, а при дозе 10.0 мг/кг наблюдался максимальный показатель — 22.5±1.4 секунды и увеличение на 60.7 % (**p<0.01). Эти результаты подтверждают сильное анальгетическое действие кетопрофена.

Сумма фенольных соединений, выделенная из Psoralea drupacea L., также проявила чёткую анальгетическую активность во всех изученных дозах. При введении соединения в дозе 1.0 мг/кг латентный период болевой реакции составил 19.4±1.1 секунды, анальгетическая активность увеличилась на 40.5 % (*p<0.05). При дозе 5.0 мг/кг этот показатель составил 20.7±1.2 секунды и 45.7 % (*p<0.05). При увеличении дозы до 10.0 мг/кг анальгетический эффект усилился: латентный период боли достиг 22.8±1.3 секунды, а активность — 60.5 % (**p<0.01). Полученные экспериментальные результаты подробно представлены в таблице 1.

Таблица 1

Анальгетическая активность суммы фенольных соединений, выделенной из Psoralea drupacea L., в тесте термической боли, M±m, n=6

Примечание: результаты представлены в виде M±m (n=6). *p<0,05; **p<0,01 по сравнению с контрольной группой.

Наибольшая анальгетическая активность суммы исследуемых соединений наблюдалась в группе животных, получавших дозу 25.0 мг/кг: латентный период боли составил 22.6±1.3 секунды, активность — 61.4 % (p<0.01). Эти показатели близки к результатам, полученным на высоких дозах референтного препарата кетопрофена. При дозе 50.0 мг/кг сохранялась высокая анальгетическая активность (52.1 %) (p<0.01).

Однако при дальнейшем повышении доз вещества наблюдалось снижение анальгетического эффекта: при дозе 100.0 мг/кг активность составила 43.3 % (*p<0.05), при 150.0 мг/кг — 34.0 % (*p<0.05) и при 200.0 мг/кг — 26.6 % (*p<0.05).

Результаты исследований показали, что сумма фенольных соединений Psoralea drupacea L. проявляет дозозависимую анальгетическую активность на модели термической боли. Наибольшая активность суммы исследуемых соединений наблюдалась в диапазоне средних доз (10,0–25,0 мг/кг), при этом действие суммы исследуемых соединений было близко к показателям референтного препарата кетопрофена.

Вывод. Результаты проведённых исследований показали, что сумма фенольных соединений, выделенная из Psoralea drupacea L., проявляет выраженную и дозозависимую анальгетическую активность в тесте «горячая пластина». Наивысшая эффективность отмечена в дозах 10,0–25,0 мг/кг, а её действие было близко к показателям кетопрофена. Полученные результаты позволяют оценить данную сумму соединений в качестве перспективного анальгетического средства растительного происхождения.

Данные научные исследования выполнены в рамках бюджетного проекта Института.

Литература:

1. Brunton L. L., Hilal-Dandan R., Knollmann B. C. Goodman and Gilman’s the Pharmacological Basis of Therapeutics. — 13th ed. — New York: McGraw-Hill Education, 2018. — 1440 p.
2. Katzung B. G., Vanderah T. W. Basic and Clinical Pharmacology. — 15th ed. — New York: McGraw-Hill Education, 2021. — 1264 p.
3. Rang H. P., Ritter J. M., Flower R. J., Henderson G. Rang and Dale’s Pharmacology. — 9th ed. — London: Elsevier, 2019. — 808 p.
4. Rice-Evans C. A., Miller N. J., Paganga G. Structure-antioxidant activity relationships of flavonoids and phenolic acids // Free Radical Biology and Medicine . — 1996. — Vol. 20, № 7. — P. 933–956.
5. Wink M. Medicinal Plants of the World. — 3rd ed. — Oxford: Wiley-Blackwell, 2023. — 416 p.
6. Хабриева Р. У. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. М. Медицина, 2005.832 с.
7. European Convention for the Protection of Vertebrate Animals Used for Experimental and Other Scientific Purposes. — Strasbourg: Council of Europe, 1986. — 53 p.
8. Directive 2010/63/EU of the European Parliament and of the Council of 22 September 2010 on the protection of animals used for scientific purposes // Official Journal of the European Union . — 2010. — L276. — P.33–79.
9. Eddy N. B., Leimbach D. Synthetic analgesics. II. Dithienylbutenyl-and dithienylbutylamines // Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics . — 1953. — Vol.107, № 3. — P.385–393.
10. Woolfe G., MacDonald A. D. The evaluation of the analgesic action of pethidine hydrochloride // Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics . — 1944. — Vol.80, № 3. — P.300–307.
11. Миронов А. Н. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. Часть 1. М: Гриф и К, 2012, c. 673.
12. Стефанова А. В. «Доклинические исследования лекарственных средств», Киев «Издательство Авиценна» 2002, Часть I, с. 579.