[[[Клетки Купфера имеют значение в патогенезе перитонита. Развитие перитонита (CLP-модель) в условиях действия в организме животных селективного ингибитора КК GdCl ₃ сопровождается менее выраженным нарушениями активности детоксикационной функции печени в сравнении с крысами, которым внутрибрюшинно вводили физраствор и выполняли CLP-операцию.

Ключевые слова: клетки Купфера, детоксикация, экспериментальный перитонит.]]

Перитонит представляет собой системный ответ организма на вовлечение брюшины в патологический процесс, в основе которого лежит комплекс патологических реакций, проявляющийся тяжелейшей общей интоксикацией, нарушением водно-электролитного баланса и нарушением функций жизненно важных органов. Брюшина неизбежно реагирует на воспалительные или травматические изменения органов брюшной полости, что наряду с обширной площадью брюшины, исключительной важностью выполняемых ею функций, стремительным прогрессированием патологического процесса в замкнутой брюшной полости и тяжелым течением не оставляет сомнений в опасности перитонита для жизнедеятельности организма [1].

К настоящему времени накопилось достаточное количество фактов, свидетельствующих о значении клеток Купфера (КК) в процессах жизнедеятельности в норме и при патологии, в процессах детоксикации и элиминации эндотоксинов в печени [2, 3].

Однако, несмотря на то что исследования по выяснению роли функционального состояния печени в патогенезе септических состояний многочисленны, значимость КК в процессах детоксикации при перитоните остается во многом не изученной.

Цель исследования — выяснить участие КК в процессах детоксикации при экспериментальном перитоните (CLP-модель).

Опыты выполнены на 192 взрослых белых крысах обоего пола массой 180–220 г. Для создания экспериментального перитонита использована модель лигирования и последующего однократного пунктирования слепой кишки — CLP (cecal ligation and puncture) [4, 5].

С целью выяснения значимости активности КК в исследуемых процессах при CLP-перитоните использовали селективный ингибитор КК GdCl ₃ . Водный раствор GdCl ₃ в дозе 10 мг/кг (дозе, подавляющей эндотоксин обезвреживающую функцию КК) вводили крысам внутрибрюшинно (в/б) 1 раз в неделю в течение 8 недель. Контрольным группам крыс 1 раз в неделю в течение 8 недель в/б вводили 1,0 мл физиологического раствора (физ. р-р). Декапитацию животных и взятие крови проводили через 24 ч после лигирования и пунктирования слепой кишки или ложной операции.

О детоксикационной функции печени, степени эндогенной интоксикации судили по продолжительности наркотического сна (ПНС), концентрации в плазме крови фракции «средних молекул» (СМ) и степени токсичности крови (СТК). Определение содержания СМ производили методом кислотно-этанольного осаждения, разработанным В. М. Моиным с соавт., СТК-способом, предложенным О. А. Радьковой с соавт. О ПНС у крыс (гексенал 100,0 мг/кг, в/б) судили по времени нахождения животных в боковом положении.

В исследовании использовались следующие экспериментальные группы: Интактные ( n = 18) — интактные крысы; ЛО ( n = 18) — ложнооперированные крысы, которым под наркозом проводили разрез передней брюшной стенки без извлечения и пунктирования слепой кишки; CLP-перитонит ( n = 27) — крысы, которым выполняли CLP-операцию; Контроль + физ. р-р ( n = 18) — крысы, которым в/б вводили 1,0 мл физраствора1 раз в неделю в течение 8 недель; Контроль + GdCl ₃ ( n = 18) — крысы, которым в/б вводили GdCl ₃ в дозе 10 мг/кг 1 раз в неделю в течение 8 недель; ЛО + физ. р-р ( n = 18) — крысы, которым в/б вводили 1,0 мл физраствора1 раз в неделю в течение 8 недель и после этого выполняли ложную операцию; ЛО + GdCl ₃ ( n = 18) — крысы, которым в/б вводили GdCl ₃ в дозе 10 мг/кг 1 раз в неделю в течение 8 недель и после этого выполняли ложную операцию; CLP-перитонит + физ. р-р ( n = 29) — крысы, которым в/б вводили 1,0 мл физраствора1 раз в неделю в течение 8 недель и после этого выполняли CLP-операцию; CLP-перитонит + GdCl ₃ ( n = 28) — крысы, которым в/б вводили GdCl ₃ в дозе 10 мг/кг 1 раз в неделю в течение 8 недель и после этого выполняли CLP-операцию.

В группах CLP-перитонит, CLP-перитонит + ФР и CLP-перитонит + GdCl ₃ через 24 ч после CLP-операции отмечалась следующая выживаемость животных: 66,7 %, 62,1 % и 64,3 % соответственно.

Полученные цифровые данные обрабатывали общепринятыми методами вариационной статистики с помощью критерия Стьюдента. Все данные представляли в виде среднего арифметического и стандартной ошибки среднего арифметического (Х ± Sx). Статистически достоверными считали различия при р < 0,05.

В ходе исследования установлено, что ингибитор КК GdCl ₃ в группе Контроль + GdCl ₃ в сравнении с группой Контроль + физ. р-р приводил к статистически не значимому сокращению ПНС на 17,6 % ( р > 0,05; n = 8) и не сопровождался статистически значимыми изменениями таких показателей печеночной детоксикации как уровень СМ в плазме крови ( р > 0,05; n = 10) и СТК ( р > 0,05; n = 10). Содержание СМ в плазме крови, СТК и ПНС у крыс в группе Контроль + физ. р-р составили 0,737 ± 0,018 г/л, 1,34 ± 0,12 ед. и 29,34 ± 2,78 мин соответственно, а в группе Контроль + GdCl _3– 0,718 ± 0,018 г/л, 1,27 ± 0,12 ед. и 24,18 ± 2,10 мин соответственно.

Развитие CLP-перитонита в условиях угнетения КК (в группе CLP-перитонит + GdCl ₃ ) сопровождалось у крыс менее значимым снижением детоксикационной функции печени. Через 24 ч после CLP-операции в данных условиях были установлены следующие значения показателей детоксикационной функции печени: понижение СТК на 32,0 % ( р < 0,01; n = 10), уровня СМ в плазме крови на 28,0 % ( р < 0,001; n = 10) и снижение ПНС на 29,9 % ( р < 0,05; n = 8) в сравнении с группой CLP-перитонит + физ. р-р. Изменение СМ в плазме крови, СТК и ПНС у крыс с CLP-перитонитом в условиях действия в организме животных ингибитора КК GdCl ₃ представлено на рисунке 1.

Рис. 1. Содержания СМ в плазме крови (А), СТК (Б) и ПНС (В) у крыс после CLP-перитонита в условиях действия в организме животных ингибитора КК GdCl ₃ (10 мг/кг)

Примечание: * — р < 0,001 по отношению к группе ЛО, ** — р < 0,05 по отношению к группе ЛО, ^ — р < 0,001 по отношению к группе ЛО + физ. р-р, ^^ — р < 0,05 по отношению к группе ЛО + физ. р-р, # — р < 0,001 по отношению к группе ЛО + GdCl ₃ , ˚ — р < 0,001 по отношению к группе CLP-перитонит + физ. р-р, ˚˚ — р < 0,01 по отношению к группе CLP-перитонит + физ. р-р, ˚˚˚ — р < 0,05 по отношению к группе CLP-перитонит + физ. р-р

На основании полученных данных установлено, что в выявленных изменениях детоксикационной функции печени у крыс с экспериментальным перитонитом имеет значение активность КК. Угнетение активности КК GdCl ₃ нормализует детоксикационную функцию печени после CLP-операции.

Литература:

1. Hotchkiss, R. S. The pathophysiology and treatment of sepsis / R. S. Hotchkiss, I. E. Karl // N. Engl. J. Med. — 2003. — Vol. 348, N 2. — P. 138–150.
2. Volmar, B. Modulation of Kupfer cells activity by gadolinium chloride in endotoxemic rats / B. Volmar, D. Rettinger, G. A. Wanner // Shock. — 1996. — Vol. 6, N 6. — P. 434–441.
3. Маянский, Д. Н. Клетки Купфера и патология печени / Д. Н. Маянский // Патолог. физиология и эксперим. медицина. — 1985. — № 4. — С. 80–86.
4. Моделирование экспериментального сепсиса путем выполнения лигирования и пункции слепой кишки (CLP-процедура) / Е. Ю. Шаповалова [и др.] // Ульянов. мед.-биол. журн. — 2020. — № 3. — С. 150–158.
5. Immunodesign of experimental sepsis by cecal ligation and puncture / D. Rittirsch [et al.] // Nat. Protocols. — 2009. — Vol. 4, N 1. — P. 31–36.