Возможности коррекции индуцированной иммуносупрессии с применением бактериального иммуномодулятора | Статья в сборнике международной научной конференции

Библиографическое описание:

Лебединская Е. А., Лебединская О. В., Ахматова Н. К., Годовалов А. П., Мелехин С. В. Возможности коррекции индуцированной иммуносупрессии с применением бактериального иммуномодулятора [Текст] // Новые задачи современной медицины: материалы Междунар. науч. конф. (г. Пермь, январь 2012 г.). — Пермь: Меркурий, 2012. — С. 61-63. — URL https://moluch.ru/conf/med/archive/51/1613/ (дата обращения: 17.10.2018).

Введение. Применение иммуномодулирующих препаратов является основной частью иммунореабилитации [1]. Они способствуют уменьшению токсических свойств лекарственных препаратов и лучшей их переносимости, снижению числа рецидивов и, таким образом, повышению качества жизни больных в связи с активацией клеток врожденного и приобретенного иммунитета, а также гуморальных факторов иммунной системы [2, 3]. Известно, что субпопуляционный состав лимфоцитов и структура лимфоидных органов могут служить характеристикой эффективности воздействия иммуномодулирующих препаратов. Использование результатов морфогистохимических исследований позволяет расширить представление об иммуномодулирующих эффектах, проявляющихся на уровне центральных и периферических органов иммунной системы и периферической крови. Подобные исследования, наряду с изучением макроскопических изменений и клинико-патологическими данными, способствуют установлению иммуномодулирующего эффекта того или иного препарата непосредственно на иммунную систему [4].
Цель исследования - изучение иммунофенотипа лимфоцитов селезенки и уровня сывороточных цитокинов, а также их спонтанной и индуцированной продукции мононуклеарными лейкоцитами селезенки на фоне индуцированной циклофосфаном иммуносупрессии при воздействии иммуномодулятора вакцины Иммуновак.

Материалы и методы. Мышам линии СВА вводили циклофосфан (ЦФ) по 100 мг/кг массы тела внутрибрюшинно 4-кратно с интервалом 24 часа. Спустя сутки внутрибрюшинно однократно вводили 200 мкг вакцины Иммуновак, которая является поликомпонентным препаратом из антигенов условно-патогенных микроорганизмов (ГУ НИИВС им. И.И. Мечникова РАМН) и содержит липополисахарид, ассоциированный с белком наружной мембраны грамотрицательных микроорганизмов, пептидогликан, тейхоевые кислоты и лабильные белковые компоненты стафилококка. Через 4, 24 и 96 часов после введения вакцины у мышей под эфирным наркозом извлекали селезенку и пробы периферической крови. Спленоциты получали после гомогенизирования селезенок и центрифугирования клеточной взвеси в градиенте плотности фиколл-урогафин (1,077 г/см3). Уровень цитокинов в пробах (сыворотка, культуральная жидкость) определяли методом твёрдофазного иммуноферментного анализа с использованием тест-систем (Biosource, Бельгия) согласно инструкции производителя. С целью определения цитокинов в супернатанте культуры спленоцитов к мононуклеарным лейкоцитам (МЛ) селезенок добавляли фитогемагглютинин – ФГА в оптимальной концентрации - 5 мкг/мл. Клетки инкубировали в течение 48 часов при температуре +37оС и концентрации СО2 4,5%. Статистическая обработка данных проводилась с использованием t-критерия Стъюдента при помощи пакета статистических программ Windows 2003 (StatSoft 6.0).

Основные результаты. В ходе проведенных исследований установлено, что спонтанная продукция провоспалительных цитокинов селезёночными МЛ после воздействия ЦФ снижалась через 4 часа - для IL-6 и TNF-α (с 60,7±5,8 до 31,5±4,6 и с 44,9±3,3 до 14,2±2,8 пкг/мл соответственно; p<0,05) и через 24 часа — для IL-1β (со 100,4±9,6 до 26,8±4,1 пкг/мл). Концентрация противовоспалительных и регуляторных цитокинов IL-4, IL-10, TGF-β фактически не отличалась от фоновой. Введение интактным животным Иммуновак сопровождалось существенным увеличением спонтанной продукции провоспалительных цитокинов, при этом максимальные концентрации (пкг/мл) определялись через 4 часа после инъекции: IL-1β – 387,8 (со 100,4±9,6), TNF-α – 173,2±9,8 (с 44,7±6,1) и IL-6 – 170,5±14,6 (с 60,5±4,2); (p<0,05). Из противовоспалительных цитокинов вакцина Иммуновак существенно увеличивала спонтанную продукцию только TGF-β, содержание которого через 24 часа после инъекции повышалось с 69,8±5,4 до 231,5±10,6 пкг/мл (p<0,05). Комбинация ЦФ и Иммуновак вызывала сходную с действием вакцины в монорежиме, но менее выраженную динамику продукции как в отношении провоспалитетельных, так и противовоспалительных цитокинов. Значительные изменения концентрации цитокинов в данном эксперименте были обнаружены при изучении индуцированой ФГА продукции рассматриваемых биорегуляторов. В частности, провоспалительные цитокины IL-1β, IL-6 и TNF-α достигали минимальных значений через 4 часа после курса введения цитостатика - с 470,9±16,8 до 88,5±4,9; с 384,1±6,7 до 212,3±4,5; с 233,7±13,9 до 66,4±9,1 пкг/мл соответственно (p<0,05). Существенное снижение их продукции отмечалось в течение 24-х часов. Значительно снижалось количество и противовоспалительных цитокинов: IL-4 - с 133,8±14,1 до10,7±2,2; IL-10 - с 50,9±6,3 до 10,4±3,2 пкг/мл (p<0,05). Минимальная концентрация IL-4 наблюдалась через 4, а IL-10 - через 24 часа. Уменьшалась и продукция TGF-β - c 138,6±9,1 до 111,4±10,2 пкг/мл (p<0,05). Вакцина Иммуновак при воздействии ФГА вызывала значительное усиление секреции провоспалительных цитокинов с пиком концентрации через 4 часа после введения: IL-1β - с 470,9±16,8 до 1766,8±93,5; IL-6 - с 384,3±15,8 до 668,9±21,9 и TNF-α - с 233,7±19,6 до 492,3±11,2 пкг/мл (p<0,05). Среди противовоспалительных цитокинов через 96 часов после инъекции в наибольшей степени увеличилась продукция IL-10 - с 50,9±6,3 до 143,8±12,6 пкг/мл (p<0,05). В данных условиях высвобождение TGF-β повышалось только через 4 часа после введения иммуномодулятора, в то время как уровень продукции IL-4 не отличался от показателей контрольной группы. Комбинированное воздействие ЦФ и Иммуновак нивелировало отрицательную динамику индуцированной продукции цитокинов, вызванную введением только одного цитостатика. Следует отметить, что при этом концентрация TNF-α через 4 часа после введения препаратов была выше, чем у интактных животных (исходная - 233,6±8,4 максимальная - 393,5±6,7 пкг/мл). Противовоспалительные цитокины достигали или незначительно превышали фоновый уровень данных медиаторов. Показано, что Иммуновак вызывает максимальное увеличение продукции провоспалительных цитокинов в более ранние сроки (через 4 часа), чем противоспалительных (через 24-96 часов). Показатели продукции сывороточных цитокинов оказались менее информативными для оценки супрессивного действия ЦФ, поскольку их исходные значения имели низкий уровень и не позволяли определить снижение их концентрации. Вместе с тем, при действии Иммуновак отмечалось увеличение содержания про- и противовоспалительных цитокинов через 4 и 24 часа соответственно и аналогичная тенденция была отмечена при действии вакцины на фоне индуцированной ЦФ иммуносупрессии. Анализ иммунофенотипа спленоцитов экспериментальных мышей продемонстрировал заметное снижение количества основных субпопуляций лимфоцитов под действием циклофосфана по сравнению с контрольной группой. В частности, на вторые сутки после последнего введения циклофосфана регистрируется уменьшение доли В-лимфоцитов (CD19+) в 3 раза (p<0,05). Среди Т-клеток в наибольшей степени супрессивное действие циклофосфана оказало влияние на CD4+-лимфоциты, содержание которых снизилось почти в 2,5 раза по сравнению с контролем (p<0,05). Введение циклофосфана приводит к достоверному снижению числа натуральных киллеров (DX5+) с 12±2% до 3±0,1% (p<0,01). Наряду с перечисленными данными, наблюдается также очевидная тенденция к понижению уровня НКТ (CD3+/ DX5+) и Т-регуляторных клеток (CD4+/ CD25+). В меньшей степени были подвержены действию циклофосфана CD8+-лимфоциты. Восстановление исходных показателей иммунофенотипа в данных условиях регистрировалось на 5-7 сутки после последнего введения цитостатика. Воздействие Иммуновак приводило к нормализации, вызванных цитостатиком основных нарушений иммунного статуса. Так в группе мышей, получавших Иммуновак после введения циклофосфана, уже на 2-е сутки содержание CD19+ -клеток почти приближалось к их количеству у интактных животных и составляло 19±5%, а число CD4+-лимфоцитов поднялось с 17±3 до 28±9%.

Заключение. Для коррекции нарушения иммунного статуса, обусловленного супрессивным действием цитостатиков, могут быть использованы иммуномодуляторы бактериального происхождения отечественного производства, в частности, вакцина Иммуновак.


Литература

1. Хаитов Р.М., Пинегин Б.В. Иммуномодуляторы: механизм действия и клиническое применение// Иммунология. – 2003. – Т.24. — № 4. – С. 196-203.

2. Ахматова Н.К., Киселевский М.В., Курбатова Е.А., Егорова Н.Б., Семенов Б.Ф. Иммуномодулятор Иммуновак-ВП-4 уменьшает иммуносупрессию и усиливает цитотоксическую активность цитостатика цисплатина// Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунологии – 2005. – №2. – С.44-48.

3. Маркова Т.П., Чувиров Д.Г. Бактериальные иммуномодуляторы// Русский медицинский журнал. – 2001. – Т.9. — №16-17. – С. 703-705.

4. Vinod G., Arun P., Santanu J. Lymphoid tissue in toxicity studies: An over view // Journal of immunology and immunopathology. — 2009. — V.11, issue 2. — P.125-138.

Основные термины (генерируются автоматически): TNF, TGF, час, иммунная система, спонтанная продукция, супрессивное действие, периферическая кровь, контрольная группа, иммунный статус, действие вакцины.

Похожие статьи

Некоторые параметры цитокинового статуса у пациенток...

TNF, TGF, час, иммунная система, спонтанная продукция, супрессивное действие, периферическая кровь, контрольная группа, иммунный статус, действие вакцины.

Оценка длительности и напряженности поствакцинального...

Под действием токсинов происходит резкое угнетение иммунной реактивности организма птиц.

О применении антиоксидантов для стимуляции иммунной системы птиц сообщают многие ученые [2, 6]. Холод,В.М. Индикаторные ферменты и метаболиты сыворотки крови утят...

Морфологические характеристики индуцированной...

Мазки периферической крови готовили через 4, 24 и 96 часов после окончания эксперимента, окрашивали азуром II-эозином по Романовскому-Гимза

Среди Т-клеток в наибольшей степени супрессивное действие циклофосфана оказало влияние на CD4+-лимфоциты, содержание...

Продуктивность и иммунный статус организма у коров при...

группа, живая масса, контрольная группа, корова, общий белок, предел нормы, содержание жира. Продуктивность и иммунный статус организма у коров при использовании кормовой добавки «ЭМ-Вита».

Особенности иммунологического действия инсулина и глюкозы на...

Этот гормон также активно действует на функционирование клеток иммунной системы, продукцию медиаторов воспаления, передачу

Рис. 2. Влияние инсулина и глюкозы на стимулированную PМА адгезивную активность нейтрофилов периферической крови доноров.

О способности некоторых лекарственных растений Туркменистана...

...модулировать иммунный ответ лейкоцитов периферической крови экспериментальных животных на тканевые антигены почек in vitro.

Однако до настоящего времени не существует точного представления о механизме действия фитопрепаратов на ткани организма человека и...

Бешенство. Актуальные вопросы | Статья в журнале...

Иногда возникают приступы буйства с агрессивными действиями.

Вакцина индуцирует выработку иммунитета против Б. 1 лоза (1 мл.) содержит не менее 2,5 МЕ.

Гетерологичный АИГ является белковой фракцией иммунной сыворотки крови лошади и поэтому перед его...

Современные представления о механизме развития рассеянного...

Часть этой популяции лимфоцитов в норме присутствует в организме (5–10 % от СD4+ Т-клеток периферической крови), другие индуцируются

— 2014, № 3–4, с.546–550. С. В. Макаров. Некоторые аспекты дизрегуляционной патологии иммунной системы при рассеянном склерозе.

Тканевой препарат «Бурсанатал». Его влияние на резистентность...

живая масса, молекулярная масса, кормовая добавка, контроль, иммунная система, препарат, контрольная группа, качество мяса, мясное сырье, опытная группа.

Обсуждение

Социальные комментарии Cackle

Похожие статьи

Некоторые параметры цитокинового статуса у пациенток...

TNF, TGF, час, иммунная система, спонтанная продукция, супрессивное действие, периферическая кровь, контрольная группа, иммунный статус, действие вакцины.

Оценка длительности и напряженности поствакцинального...

Под действием токсинов происходит резкое угнетение иммунной реактивности организма птиц.

О применении антиоксидантов для стимуляции иммунной системы птиц сообщают многие ученые [2, 6]. Холод,В.М. Индикаторные ферменты и метаболиты сыворотки крови утят...

Морфологические характеристики индуцированной...

Мазки периферической крови готовили через 4, 24 и 96 часов после окончания эксперимента, окрашивали азуром II-эозином по Романовскому-Гимза

Среди Т-клеток в наибольшей степени супрессивное действие циклофосфана оказало влияние на CD4+-лимфоциты, содержание...

Продуктивность и иммунный статус организма у коров при...

группа, живая масса, контрольная группа, корова, общий белок, предел нормы, содержание жира. Продуктивность и иммунный статус организма у коров при использовании кормовой добавки «ЭМ-Вита».

Особенности иммунологического действия инсулина и глюкозы на...

Этот гормон также активно действует на функционирование клеток иммунной системы, продукцию медиаторов воспаления, передачу

Рис. 2. Влияние инсулина и глюкозы на стимулированную PМА адгезивную активность нейтрофилов периферической крови доноров.

О способности некоторых лекарственных растений Туркменистана...

...модулировать иммунный ответ лейкоцитов периферической крови экспериментальных животных на тканевые антигены почек in vitro.

Однако до настоящего времени не существует точного представления о механизме действия фитопрепаратов на ткани организма человека и...

Бешенство. Актуальные вопросы | Статья в журнале...

Иногда возникают приступы буйства с агрессивными действиями.

Вакцина индуцирует выработку иммунитета против Б. 1 лоза (1 мл.) содержит не менее 2,5 МЕ.

Гетерологичный АИГ является белковой фракцией иммунной сыворотки крови лошади и поэтому перед его...

Современные представления о механизме развития рассеянного...

Часть этой популяции лимфоцитов в норме присутствует в организме (5–10 % от СD4+ Т-клеток периферической крови), другие индуцируются

— 2014, № 3–4, с.546–550. С. В. Макаров. Некоторые аспекты дизрегуляционной патологии иммунной системы при рассеянном склерозе.

Тканевой препарат «Бурсанатал». Его влияние на резистентность...

живая масса, молекулярная масса, кормовая добавка, контроль, иммунная система, препарат, контрольная группа, качество мяса, мясное сырье, опытная группа.

Задать вопрос