Авторы: Петрушанко Татьяна Алексеевна, Иленко Наталия Владимировна

Рубрика: Медицина

Опубликовано в Молодой учёный №11 (58) ноябрь 2013 г.

Дата публикации: 31.10.2013

Статья просмотрена: 83 раза

Библиографическое описание:

Петрушанко Т. А., Иленко Н. В. Скрининговая оценка колонизационной резистентности слизистой оболочки полости рта ВИЧ-инфицированных людей // Молодой ученый. — 2013. — №11. — С. 222-225.

В статье приведены результаты скрининговой оценки колонизационной резистентности слизистой оболочки полости рта ВИЧ-инфицированных людей, полученные путем изучения ряда микробиологических параметров (адгезивное число, адгезивний индекс, показатель колонизационной резистентности). Выявлено достоверное увеличение значений анализируемых показателей при наиболее тяжелых проявлениях пародонтопатологии и при выраженных клинических признаках иммунодефицита.

Ключевые слова: ВИЧ-инфекция, пародонтопатология, адгезивное число, адгезивный индекс, показатель колонизационной резистентности.

Известно, что полость рта является уникальной экологической нишей организма. Высокое разнообразие микроорганизмов и наличие значительного количества факторов, которые способствуют их размножению и росту, создают сложные условия функционирования микробиома [1–3]. Тонкое равновесие во взаимоотношениях резидентной, гетеробионтной и патогенной микрофлоры значительно важнее для людей с иммунодефицитными состояниями, особенно для ВИЧ-инфицированных [2].

Слизистая оболочка полости рта (СОПР) является внешним барьером, который предупреждает попадание микроорганизмов во внутреннюю среду организма. Первой линией защиты от патогенных микроорганизмов является колонизационная резистентность СОПР — совокупность защитных факторов организма и конкурентных, защитных свойств нормальной микрофлоры, которые придают ей стабильность и предупреждают колонизацию слизистой оболочки посторонними микроорганизмами. Колонизационная резистентность — один из факторов местного иммунитета, который отображает механическую защиту и антагонизм нормальной микрофлоры. Важное значение в формировании колонизационной резистентности имеет нормальная микрофлора, эпителиоциты и их рецепторы, комплементарные адгезинам бактерий, которые формируют микробиоценоз контретного биотопа [4,5]. Высокий уровень колонизационной резистентности СОПР свидетельствует о нормальном функционировании пристеночного микробного консорциума (биопленки) и про физиологическое взаимодействие микробной системы полости рта [1,6].

При этом микрофлора полости рта человека представляет собой высокочувствительную индикаторную систему, которая реагирует качественными и количественными сдвигами на изменение состояния разных органов и систем организма в целом [1,7,8]. Вот почему диагностировать эти сдвиги особенно важно у людей со статусом ВИЧ для предупреждения возникновения оппортунистических инфекций, а значит сохранения и продолжения жизни при поддержании ее высокого качества.

Целью нашего исследования стал анализ скрининговой оценки колонизационной резистентности СОПР ВИЧ-инфицированных людей.

Было обследовано 94 ВИЧ-инфицированных пациентов в возрасте 23–49 лет, которые составили группу исследования (І). В группу сравнения (ІІ) вошли 35 человек без статуса ВИЧ в возрасте 21–45 лет. Они не имели особенностей бытового и трудового анамнеза. Клиническое и лабораторное обследование пациентов проводилось на базе Полтавского областного Центра профилактики и борьбы со СПИДом, Полтавской областной клинической стоматологической поликлиники и кафедры патологической анатомии с биопсийно-секционным курсом ВГУЗ Украины «УМСА» в течении 2011–2013гг.

После общепринятого стоматологического субъективного и объективного обследования пациентов проводили скрининговую оценку колонизационной резистентности СОПР ВИЧ-инфицированных и не инфицированных ВИЧ людей (В. В. Череда и соавт., 2010) [9, 10], которая включает определение адгезивного числа (АЧ) (среднее количество оральных стрептококков, адгезированных на 1 буккальном эпителиоците), адгезивного индекса (АИ) (процент буккальных эпителиоцитов, которые адгезировали более 10 оральных стрептококков) и показателя колонизационной резистентности (ПКР) в баллах. При условии АЧ=20–60 оральных стрептококков, АИ>50 % ПКР равняется 1 баллу, что характеризует высокий уровень колонизационной резистентности слизистой оболочки полости рта. АЧ<20 и АИ<50 % соответствует ПКР 0 баллов и характеризует угнетение барьера колонизационной резистентности СОПР и снижение антагонистических свойств нормальной микрофлоры. При условии АЧ>60, АИ=100 % ПКР равняется 2 баллам и свидетельствует об увеличении напряжения колонизационного барьера, количественном разрастании микроорганизмов, среди которых могут быть не только симбионтные, но и условно-патогенные и патогенные.

После полоскания пациентом полости рта водой, шпателем с округленными краями брали соскоб с внутренней поверхности щеки, готовили мазок на стерильном обезжиренном предметном стекле, высушивали, фиксировали этиловым спиртом 96 %, окрашивали за Романовским-Гимзой. При помощи светового микроскопа «Биолам Д-11» под иммерсионным объективом (×90) в мазке проводили подсчет АЧ, АИ и ПКР [9].

Обработка результатов исследования осуществляли с использованием методов математической статистики с расчетом средних выборочных значений (М) и ошибок средних значений (m) в группах обследованных людей. Отличия считали достоверными при общепринятой в медико-биологических исследованиях вероятности ошибки p<0,05. Вероятность ошибки оценивали по таблицам Стьюдента с учётом объема групп исследования.

Полученные средние результаты подсчета АЧ и АИ для групп исследования и сравнения отличались недостоверно. Так, АЧ для ВИЧ-инфицированных пациентов составляет 53,04±1,89 оральных стрептококков, а для пациентов без статуса ВИЧ — 49,26±2,99. АИ в группе исследования составил 78,55±2,33 %, а в группе сравнения — 70,31±3,87 %.

Показатель колонизационной резистентности, который отвечает 0 баллов, характеризует угнетение барьера колонизационной резистентности СОПР и свидетельствует о снижении антагонистических свойств нормальной микрофлоры, обнаружен у 6 ВИЧ-инфицированных пациентов (6,38 % случаев) и у 4 не инфицированных ВИЧ (11,43 %). Увеличение напряжения колонизационного барьера, количественное разрастание микроорганизмов и показатель колонизационной резистентности на уровне 2 баллов зарегистрирован у 25 ВИЧ-инфицированных (26,6 %). В группе сравнения аналогичное состояние колонизационной резистентности СОПР диагностировано у 7 пациентов (20 %). ПКР 1 балл, что характеризует высокий уровень колонизационной резистентности СОПР, обнаружен у 27 человек со статусом ВИЧ (28,72 %) и у 13 человек из группы сравнения (37,14 %). Дисбаланс показателей, которые рассчитывали и несоответствие АЧ и АИ, не позволяющее определить ПКР, наблюдали у 36 пациентов со статусом ВИЧ (38,3 %) и у 11 человек не инфицированных ВИЧ (31,43 %).

Нами проведен анализ изменений АЧ и АИ соответственно тяжести поражения тканей пародонта. Указанные результаты приведены в таблицах 1 и 2. Обнаружено достоверное увеличение значений указанных показателей только при генерализованном пародонтите ІІІ степени тяжести. С одной стороны это демонстрирует истощение адаптивных механизмов и повышение уровня колонизации СОПР микроорганизмами, в том числе и пародонтопатогенами. С другой стороны, повышение значений АИ можно трактовать как следствие снижения процессов десквамации, что согласовывается с литературными данными [11].

Таблица 1

АЧ у ВИЧ-инфицированных пациентов в зависимости от тяжести пародонтопатологии

Показатель

Значение

р

Пока­затель 1

Пока­затель 2

Пока­затель 3

Пока­затель 4

Пока­затель 5

1. АЧ при гингивите

48,86±6,19

 

p>0,05

p>0,05

p>0,05

< 0,01

2. АЧ при генерализованном пародонтите начальной степени тяжести

45,00±8,51

p>0,05

 

p>0,05

p>0,05

< 0,01

3. АЧ при генерализованном пародонтите І степени тяжести

47,35±3,42

p>0,05

p>0,05

 

p>0,05

< 0,01

4. АЧ при генерализованном пародонтите ІІ степени тяжести

52,11±3,09

p>0,05

p>0,05

p>0,05

 

< 0,001

5. АЧ при генерализованном пародонтите ІІІ степени тяжести

68,57±1,58

< 0,01

< 0,01

< 0,01

< 0,001

 

Примечание: р — вероятность ошибки по таблицам Стьюдента.

Таблица 2

АИ у ВИЧ-инфицированных пациентов в зависимости от тяжести пародонтопатологии

Показатель

Значение

р

Пока­затель 1

Пока­затель 2

Пока­затель 3

Пока­затель 4

Пока­затель 5

1. АИ при гингивите

68,43±7,57

 

p>0,05

p>0,05

p>0,05

< 0,01

2. АИ при генерализованном пародонтите начальной степени тяжести

62,33±10,74

p>0,05

 

p>0,05

p>0,05

< 0,01

3. АИ при генерализованном пародонтите І степени тяжести

66,16±3,53

p>0,05

p>0,05

 

< 0,01

< 0,01

4. АИ при генерализованном пародонтите ІІ степени тяжести

80,57±4,38

p>0,05

p>0,05

< 0,01

 

< 0,001

5. АИ при генерализованном пародонтите ІІІ степени тяжести

100

< 0,01

< 0,01

< 0,01

< 0,001

 

Примечание: р — вероятность ошибки по таблицам Стьюдента.

Проведен также анализ изменений АЧ и АИ согласно стадиям основного заболевания. Соответствующие данные приведены в таблицах 3 и 4.

Таблица 3

АЧ у ВИЧ-инфицированных пациентов в зависимости от стадии иммунодефицита

Показатель

Значение

р

Пока­затель 1

Пока­затель 2

Пока­затель 3

Пока­затель 4

1. АЧ у пациентов с І стадией ВИЧ-инфекции

32,00±3,71

 

p>0,05

<0,001

<0,001

2. АЧ у пациентов с ІІ стадией ВИЧ-инфекции

42,73±5,42

p>0,05

 

<0,01

<0,001

3. АЧ у пациентов с ІІІ стадией ВИЧ-инфекции

59,49±1,88

<0,001

<0,01

 

p>0,05

4. АЧ у пациентов с ІV стадией ВИЧ-инфекции

61,77±2,87

<0,001

<0,001

p>0,05

 

Примечание: р — вероятность ошибки по таблицам Стьюдента.

Таблица 4

АИ у ВИЧ-инфицированных пациентов в зависимости от стадии иммунодефицита

Показатель

Значение

р

Пока­затель 1

Пока­затель 2

Пока­затель 3

Пока­затель 4

1. АИ у пациентов с І стадией ВИЧ-инфекции

50,17±4,14

 

<0,05

<0,01

p>0,05

2. АИ у пациентов с ІІ стадией ВИЧ-инфекции

66,18±5,83

<0,05

 

<0,01

p>0,05

3. АИ у пациентов с ІІІ стадией ВИЧ-инфекции

83,64±2,72

<0,01

<0,01

 

<0,05

4. АИ у пациентов с ІV стадией ВИЧ-инфекции

62,64±9,71

p>0,05

p>0,05

<0,05

 

Примечание: р — вероятность ошибки по таблицам Стьюдента.

АЧ имеет тенденцию к увеличению с прогрессированием ВИЧ-инфекции, тогда как АИ является изменчивым, а максимальное значение обнаружено при ІІІ стадии ВИЧ-инфекции. Результаты вычисления АИ и АЧ позволили обнаружить широкий диапазон разброса значений обоих показателей, что позволяет допустить их высокую восприимчивость к посторонним сопутствующим факторам и изменчивость, а значит недостаточное диагностическое и прогностическое значение для пациентов, у которых есть патология тканей пародонта на фоне ВИЧ-инфекции.

Обнаружено, что показатели АЧ и АИ у ВИЧ-инфицированных и не инфицированных ВИЧ людей достоверно не отличаются. Но было констатировано достоверное увеличение значений показателей, которые изучались, при наиболее тяжелых проявлениях пародонтопатологии и при выраженных клинических признаках иммунодефицита. ПРК свидетельствует о лучшем уровне колонизационной резистентности у пациентов без статуса ВИЧ.

Итак, микробиологические методы исследования позволяют выявить ряд особенностей микробиологической колонизации полости рта на фоне ВИЧ-инфекции при разной степени поражения тканей пародонта.

Литература:

1.                  Непорада К. С. Хронічний генералізований пародонтит як наслідок порушення біоплівки біотопу порожнини рота / К. С. Непорада, А. О. Микитенко, Д. С. Янковський, В. П. Широбоков, Г. С. Димент // Современная стоматология. — 2013. — № 3(67). — С.22–25.

2.                  Терапевтическая стоматология / [А. В. Алимский, С. М. Будылина, Ю. И. Воробьев и др.]; Под ред. проф. Л. А. Дмитриевой. — М.: МЕДпресс-информ, 2003. — 896с.

3.                  Косенко К. Н. Профилактическая гигиена полости рта / К. Н. Косенко, Т. П. Терешина. — Одесса, 2003. — 287с.

4.                  Лобань Г. А. Мікробіологія, вірусологія та імунологія порожнини рота / Г. А. Лобань, В.І.Федорченко. — Полтава, 2004. — 122с.

5.                  Мюллер Х.-П. Пародонтология / Мюллер Х.-П. — [Пер. с нем.]. — Львов: ГалДент, 2004. — 256с.

6.                  Shoji Takenaka Direct Visualization of Spatial and Temporal Patterns of Antimicrobial Action within Model Oral Biofilms / Shoji Takenaka, Harsh M.Trivedi, Audrey Corbin, Betsey Pitts, Philip S.Stewart // Applied and environmental microbiology. — 2008, Mar. — P. 1869–1875.

7.                  Martinus J.Verkaik Oral biofilm models for mechanical plaque removal / Martinus J.Verkaik, Henk J. Busscher, Minie Rustema-Abbing, Anje M. Slomp, Frank Abbas, Henny C. van der Mei // Clin. Oral Invest. — 2010. — 14. — P.403–409.

8.                  Ya-Ling Liu Progress toward understanding the contribution of alkali generation in dental biofilms to inhibition of dental caries / Ya-Ling Liu, Marcelle Nascimento, Robert A.Burne // International Journal of Oral Science. — 2012. — 4. — P.135–140.

9.                  Пат. 51373 Украина, МПК (2009) G01N 33/48. Способ скрининговой оценки колонизационной резистентности слизистой оболочки полости рта /Череда В. В., Петрушанко Т. О., Лобань Г. А. — u201001414. — Подано 11.02.10; опубл.12.07.10. — Бюл. № 13.

10.              Перушанко Т. А. Роль колонизационной резистентности полости рта в развитии кариеса / Т. А. Петрушанко, В. В. Череда, Г. А. Лобань // Стоматология. — 2013. — Т.92, № 1. — С 43–45.

11.              Іленко Н. В. Аналіз цитологічних показників епітелію слизової оболонки порожнини рота ВІЛ-інфікованих осіб / Н.В.Іленко, Т. О. Петрушанко, Д.Є.Ніколенко // Проблеми екології та медицини. — 2013. — Т.17, № 1–2. — С.4–12.

Основные термины (генерируются автоматически): колонизационной резистентности, полости рта, колонизационной резистентности СОПР, колонизационной резистентности слизистой, резистентности слизистой оболочки, оболочки полости рта, оценки колонизационной резистентности, слизистой оболочки полости, уровень колонизационной резистентности, барьера колонизационной резистентности, показатель колонизационной резистентности, свойств нормальной микрофлоры, скрининговой оценки колонизационной, достоверное увеличение значений, резистентности полости рта, ВИЧ-инфицированных пациентов, оценка колонизационной резистентности, в формировании колонизационной резистентности, оральных стрептококков, и показателя колонизационной резистентности.

Ключевые слова

ВИЧ-инфекция, пародонтопатология, адгезивное число, адгезивный индекс, показатель колонизационной резистентности.

Обсуждение

Социальные комментарии Cackle
Задать вопрос