Автор: Шариков Андрей Михайлович

Рубрика: Биология

Опубликовано в Молодой учёный №1 (24) январь 2011 г.

Статья просмотрена: 122 раза

Библиографическое описание:

Шариков А. М. Метаболиты сибирских изолятов грибов рода Trichoderma: выраженная антибиотическая активность // Молодой ученый. — 2011. — №1. — С. 66-67.

Ключевые слова: бактерицидное действие, метаболиты грибов рода Trichoderma, метод лунок, микроорганизмы.

Key words: bactericidal action, metabolites of fungi of the genus Trichoderma, method of the holes, bacteria.

Введение

Изучение новых веществ с антимикробной активностью есть одно из важнейших направлений преодоления лекарственной устойчивости микроорганизмов. В настоящее время число таких антимикробных препаратов постоянно увеличивается [1].

Известно, что культуральная жидкость несовершенных грибов содержит вещества с антибиотическими свойствами. Исследования в этой области ведутся достаточно активно; постоянно обнаруживаются новые метаболиты с полезными свойствами [2; 3].

Как известно, грибы рода Trichoderma являются продуцентами метаболитов, обладающих высокой антибиотической активностью в отношении грибов и бактерий. Исследования в этой области ведутся очень активно и постоянно находятся новые метаболиты с полезными свойствами [4; 7].
Сибирские изоляты грибов рода Trichoderma изучены недостаточно [5; 6].

Целью настоящей работы являлось изучение антибиотической активности метаболитов сибирских изолятов грибов рода Trichoderma в отношении штаммов Salmonella moskaw и Streptococcus haemoliticus.


Методика

Объектами исследования служили стерильные метаболиты, полученные из штамма М 99/5 гриба T. harzianum и из нетипированного штамма 119-85 Trichoderma sp.

Грибы культивировали на бульоне Чапека методом глубинного культивирования на качалке в течение пяти суток при температуре 25±2˚С.

В работу был взяты штаммы. Salmonella moskaw и Streptococcus haemolyticus, выделенные во время оперативного вмешательства от больных панкреанекрозом пациентов городской клинической больницы № 7 г.Красноярска.

Предварительное культивирование штаммов осуществлялось на питательном агаре (ГРМ-агар производства ФГУП «Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии») с последующим инкубированием в термостате в течение трёх суток при 37˚С. Полученные изолированные типичные колонии отбирали бактериологической петлёй и суспендировали в пробирках со стерильным физиологическим раствором по стандарту мутности. Посевная доза взвеси микроорганизма составляла 1,5х108 КОЕ/мл (0,5 по стандарту мутности McFarland).

Посев приготовленных суспензий осуществляли по Кирби-Бауэру отжатым ватным тампоном в трёх направлениях на пластины подсушенного агара Мюллера-Хинтон, разлитого толстым слоем в чашках Петри. Определение бактерицидной активности исследуемых экстрактов осуществляли методом лунок.

Сразу после посева стандартизованной взвеси микроорганизмов в каждой засеянной чашке Петри стерильным пробочным сверлом диаметром 10 мм делали на одинаковом расстоянии шесть лунок, затем автоматической пипеткой постоянного объёма в каждую лунку одноразовым стерильным наконечником вносили 100 мкл исследуемого метаболита. Контролем в опыте служил физиологический раствор.
После внесения метаболита чашки Петри инкубировали не переворачивая в термостате при температуре 37˚С в течение шести суток. Все опыты проводились в пятикратной повторности. Наблюдения за ростом тест-культуры начинали после суток инкубирования.
Измерение диаметра задержки роста микроорганизмов проводили на пятые и десятые сутки инкубирования.

Статистическую обработку результатов проводили с помощью пакета прикладных программ STATISTICA v.6.0. Рассчитывали среднее значение и среднеквадратичное отклонение, достоверность отличий определяли по непараметрическому критерию Манна-Уитни.


Результаты

В ходе проведённой работы было установлено, что изученные метаболиты T. harzianum М 99/5 и Trichoderma sp. 119-85 обладают выраженным бактерицидным действием в отношении изучаемых штаммов.

Таблица 1

Величина зон отсутствия роста штаммов вокруг лунок, содержащих растворы культуральной жидкости T. harzianum М 99/5 (M±σ, мм)

Штамм

Длительность инкубирования штамма, сутки

5

10

S. moskaw

16,0 ± 4,0

18,0 ± 3,0

S. haemolyticus

13,0 ± 3,0

14,0 ± 3,0

Наибольшая величина зоны подавления роста (18,0±3,0 мм, р<0,05) наблюдалась при действии на S. moskaw метаболита штамма М 99/5 гриба вида T. harzianum

(табл.):

Таблица 2

Величина зон отсутствия роста штаммов вокруг лунок, содержащих растворы культуральной жидкости Trichoderma sp. 119-85 (M±σ, мм)

Штамм

Длительность инкубирования штамма, сутки

5

10

S. moskaw

12,0 ± 3,0

12,0 ± 2,0

S .haemolyticus

14,0 ± 2,0

16,0 ± 1,0

Проведённые исследования позволяют установить антибиотическую активность сибирских изолятов грибов рода Trichoderma на изученные штаммы микроорганизмов: оба штамма обладают выраженным бактерицидным действием.

Механизм действия антибиотических веществ, находившихся в изучаемых метаболитах, связан, по-видимому, с действием на клеточную стенку бактерий. Полученные результаты позволяют обосновать важность и перспективность полученных метаболитов как сырья для новых микробиологических препаратов.


Литература:

  1. Яковлев В.П., Яковлев С.В. Перспективы создания и внедрения новых антимикробных препаратов // Инфекции и антимикроб. химиотерапия. – 2002. – №4(2). – С.1-5.

  2. Сейкетов Г.Ш. Грибы рода Trichoderma и их использование в практике. – Алма-Ата: Наука, 1982. – 245 с.

  3. Шариков А.М. Исследование антибактериальной активности метаболитов некоторых высших грибов Средней Сибири // Современные наукоёмкие технологии. – 2010. – № 6. – С. 128-129.

  4. Sharikov A.M, Neshumaev D.A., Zaika N.A. et al. To the issue of using of the fungi of Trichoderma kind as the producent of the biologicalli active substances // Program & abstracts: The XII Symposium of the Rassia – Japan medical exchange. – Krasnojarsk, 2005. – P. 661-662.

  5. Шариков А.М. Выраженная антибиотическая активность грибов рода TRICHODERMA в отношении штамма BACILLUS ANTHRASIS СТИ-1 // Научная перспектива. – 2010. – №10. – С. 92-93.

  6. Шариков А.М. Изучение антибиотической активности метаболитов грибов рода TRICHODERMA в отношении бактерий рода VIBRIO // Актуальные проблемы гуманитарных и естественных наук. – 2010. – № 10. – С. 24-25.

  7. Molitoris H. P. Mushrooms in medicine // Folia Mikrobiol. – 1994. – V. 39. – N 2 –.P.91-98.

Основные термины (генерируются автоматически): рода trichoderma, грибов рода trichoderma, изолятов грибов рода, сибирских изолятов грибов, грибы рода trichoderma, метаболиты грибов рода, Грибы рода trichoderma, активности метаболитов, антибиотической активности метаболитов, метаболитов грибов рода, штаммов trichoderma asperellum, genus trichoderma, бактерий рода, Trichoderma sp, грибов рода fusarium, активность грибов рода, Trichoderma kind as, Шариков А.М, жидкость несовершенных грибов, fungi of.

Обсуждение

Социальные комментарии Cackle
Задать вопрос