Отправьте статью сегодня! Журнал выйдет 12 июля, печатный экземпляр отправим 16 июля
Опубликовать статью

Молодой учёный

Гиполипидемическое свойство вещества на основе фиброина шелка

Биология
04.04.2017
83
Поделиться
Библиографическое описание
Нишантаев, М. К. Гиполипидемическое свойство вещества на основе фиброина шелка / М. К. Нишантаев, Н. М. Юлдашев, А. А. Камолова, М. А. Атавуллаева. — Текст : непосредственный // Молодой ученый. — 2017. — № 13 (147). — С. 139-142. — URL: https://moluch.ru/archive/147/41375/.


Становится очевидной эффективность препаратов, оказывающих терапевтическое действие, не вовлекаясь при этом сами в метаболизм, так как метаболиты очень часто оказывают отрицательное воздействие на функцию целого ряда органов. В этой связи особый интерес представляет энтеросорбция, так как энтеросорбенты (ЭС) — это обычно вещества, не перевариваемые в желудочно-кишечном тракте, и в то же время, обладающие большим сродством и сорбционной емкостью к различным токсичным продуктам метаболизма. Однако широкому применению энтеросорбции препятствует недостаточное обеспечение сорбентами вследствие их ограниченного арсенала и производства. С другой стороны, многие рекомендованные ЭС искусственного происхождения не всегда полностью отвечают медицинским требованиям. Поэтому в последние годы внимание многих исследователей обращено на изучение естественных ЭС — пищевых волокон (целлюлоза, гемицеллюлоза, пектины, камеди, слизи), неуглеводные соединения лигнина, пентозаны и другие подобные высокомолекулярные вещества, некоторые аминосахара грибов и ракообразных (хитин), неперевариваемые белки [1, 2, 3, 5]. В связи с вышеизложенными поиск новых сорбентов и их внедрение в практическую медицину является актуальной медико-биологической проблемой.

Целью настоящей работы явилась оценка гиполипидемического действия вещества БС-1 (условное название: Биологический сорбент-1) в in vitro и in vivo условиях.

Материал иметоды исследования. БС-1 был получен в Институте химии и физики полимеров АН РУз из отходов переработки натурального шелка, подвергнутых обработке с 3 и 6 N соляной кислотой в течение 40–60 мин. Конечный продукт — порошок кремового цвета, растворимый в концентрированных минеральных кислотах и некоторых растворах неорганических солей: LiCl, NaCNS, CaCl2. Молекулярная масса 32300Д, плотность — 1,34–1,43 кг/м3, степень набухания — 50–80 %, насыпной вес — 0,2–0,5 г/см3, механическая прочность — 0,2–0,3 кг.

Предварительно сорбционную емкость вещества БС-1 исследовали в опытах «in vitro». Для изучения сорбционной способности вещества БС-1 связывать холестерин (ХС), стандартный раствор последнего в хлороформе пропускали через колонку, наполненную веществом БС-1. В элюате определяли содержание ХС по [6]. Для проверки десорбции ХС, колонку промывали чистым хлороформом, и в элюате еще раз определяли содержание ХС. Для приближения опыта к условиям, наблюдающимся в кишечнике, были проведены исследования по изучению сорбционной способности ЭС БС-1 к основным компонентам желчи — желчным кислотам (ЖК), ХС и билирубину. При этом использовали дуоденальную желчь человека, полученную при диагностическом зондировании. Для определения процента относительной сорбционной способности БС-1 к навеске сорбента в 10 мг добавляли 0,5 мл дуоденальной желчи. Образцы инкубировали в течение 0,5, 1,0, 2,0 и 3,0 ч при 37° С, постоянно перемешивая содержимое пробирок. Для определения максимальной сорбции изучаемых веществ, к образцам сорбента в 10,0 мг добавляли возрастающие объемы (0,5; 1,0; 1,5 и 2,0 мл) дуоденальной желчи. В обеих случаях сорбент отделяли центрифугированием, и в аликвоте определяли концентрацию ЖК и ХС по [7], билирубина по [9].

Гиперхолестеринемию (ГХС) у крыс вызывали путем ежедневного перорального введения 2 мл смеси спиртового и масляного растворов витамина D2 из расчета 80 000 ЕД на 100 г массы и ХС в дозе 200 мг/кг в течение 6 дней [4]. В опытной группе животным перорально вводили БС-1 одновременно с ХС и витамином D2 в дозе 0,5 г/кг. Параллельно изучали липидные показатели у интактных крыс. Животных, находящихся под легким эфирным наркозом, декапитировали на 7-е сут опыта. В сыворотке крови определяли содержание ХС, общих липидов (ОЛ) и триацилглицеринов (ТГ) с помощью тест-наборов фирмы «Lachema», общих фосфолипидов (ОФЛ) по [8].

Статистическую обработку полученных результатов проводили с применением t-критерия Стьюдента.

Результаты исследования. «In vitro» исследования показали, что содержание ХС после пропускания его через колонку, заполненной веществом БС-1, уменьшилось с 200,285,26 до 139,282,73 мкг в исследованном растворе, что составило 69,5 % исходного показателя (табл. 1).

Таблица 1

Сорбция холестерина из стандартного раствора препаратом БС-1

Показатели

Концентрация ХС, мг%

Исходная концентрация

10,01  0,26

После сорбции

6,96  0,14*

После первой промывки

0,501  0,046*

После второй промывки

не определяется

* — достоверно по сравнению с исходным показателем (P<0,05).

С целью оценки степени десорбции ХС, колонку с веществом БС-1 промывали чистым хлороформом. После однократного промывания колонки концентрация ХС в элюате равнялась 0,5010,046 мг %, т. е. десорбировалось 7,2 % ХС, связанного с веществом БС-1 (табл. 1). В элюате полученного после второго промывания колонки хлороформом, ХС не определялся.

В исследованиях по изучению сорбционной способности БС-1 основных компонентов желчи — ЖК, ХС и билирубина, было выявлено, что время инкубации дуоденальной желчи с веществом БС-1 существенно влияет на степень сорбции ХС и ЖК. Так, через 3 ч инкубации наблюдается максимальная сорбция как ХС (57,1 %), так и ЖК (38,5 %) (табл. 2).

Таблица 2

Сорбция ХС иЖК из дуоденальной желчи (0,5 мл) веществом БС-1 (10 мг) вдинамике времени

Время вминутах

ХС, вмг%

ЖК, вмг%

Исходный

4,94  0,34

131,32  6,58

30

3,98  0,28*

92,27  1,45*

60

4,13  0,09*

102,90  2,99*

120

2,52  0,05*

88,00  1,21*

180

2,05  0,07*

80,56  1,87*

* — достоверно по сравнению с исходным показателем (P<0,05).

Приведенные в табл. 3 результаты свидетельствуют, что при добавлении к 10 мг вещества БС-1 возрастающих объемов дуоденальной желчи с постоянной концентрацией исследуемых веществ, самый высокий процент связывания ЖК (84,4 %) наблюдается в объеме желчи равном 0,5 мл. Для ХС этот показатель равнялся 49,1 и 49,9 % в 0,5 мл и 1,0 мл желчи, а для билирубина — 90,3 % при 0,5 мл объема желчи.

Таблица 3

Сорбция ХС, ЖК ибилирубина веществом БС-1 (10 мг) из дуоденальной желчи взависимости от ее объема

Объем желчи, мл

ХС, мкг

ЖК, мкг

Билирубин, мкг

Контроль

51,9  4,50

840,6  11,90

1314,2  18,7

0,5

25,95  0,68

420,3  17,7

657,1  46,2

13,20  0,35*

65,4  2,75*

64,0  4,49*

1,0

51,90  1,59

840,6  30,43

1314,2  16,9

26,00  0,79*

152,0  5,50*

139,0  1,79*

1,5

77,85  3,18

1260,9  39,34

1971,3  67,8

51,30  2,09*

264,4  8,25*

264,4  8,25*

2,0

103,8  1,44

1681,2  38,0

2628,4  162,7

86,2  1,20*

486,4  11,0*

559,2  34,6*

Примечание: в числителе — до сорбции; в знаменателе — после сорбции.

Проведенные исследования выявили ряд существенных изменений липидного обмена в сыворотке крови у крыс, при их кормлении экзогенным ХС. У животных с ГХС содержание ОЛ было повышено на 228 % по сравнению с нормой. Концентрация ХС также была повышена на 205 % по сравнению с интактным значением. При этом содержание ОФЛ оставалось на уровне интактных животных. Интересным фактом является резкое снижение уровня ТГ. Оно составило всего 29,6 % интактного значения (табл. 4).

Таблица 4

Влияние вещества БС-1 на содержание липидов в сыворотке крови укрыс сГХС

Показатели, вмг%

Интактный

ГХС (контроль)

ГХС + БС-1

Общие липиды

234,78  20,35

535,26  38,36а

384,06  15,14а,б

Холестерин

73,94  4,46

151,93  5,14а

108,15  3,28а,б

Триглицериды

70,81  2,18

20,98  0,78а

35,39  2,28а,б

Фосфолипиды

122,00  9,79

128,24  1,40а

187,14  11,33а,б

Примечание: а — достоверность различий по сравнению с интактным, б — достоверность различий по сравнению с контролем.

При лечении животных с веществом БС-1 содержание ОЛ и ХС статистически значимо снизилось на 28,3 и 28,8 % соответственно по сравнению с контрольными значениями, оставаясь при этом выше интактных значений на 163,5 и 46,3 % соответственно.

Энтеросорбция в течение 6 дней способствовала повышению содержания ФЛ на 53,4 и 45,9 % по сравнению с интактным и контрольным значением соответственно. Наблюдали также повышения уровня ТГ у леченных животных на 68,7 % по сравнению с контрольным значением. При этом по сравнению с нормой оно оставалось сниженным на 50,0 %.

Таким образом, в опытах на крысах, получавших ГХС диету, добавление вещества БС-1 привело к снижению содержания ОЛ, ХС, ТГ в сыворотке крови, что свидетельствует о его гиполипидемического и гипохолестеринемического свойства.

Литература:

  1. Андрейчин М. А., Погорила М. А. Лечебная эффективность угольного сорбента СКН П-2 при тяжелой форме вирусного гепатита В // Сорбенты медицинского назначения и механизмы их лечебного действия (тез. докл.). — Донецк, 1988. — С. 45–46.
  2. Брискин Б. С., Демидов Д. А. Энтеросорбция пектинсодержащим препаратом в лечении перитоните // Хирургия. Журнал им. Н. И. Пирогова. — 2005. — № 4. — С. 14–19.
  3. Брискин Б. С., Савченко З. И., Демидов Д. А. Энтеросорбция и нутритивная поддержка пектинсодержащим препаратом в лечении иммунодефицита при перитоните // Хирургия. Журнал им. Н. И. Пирогова. — 2005. — № 7. — С. 15–18.
  4. Василенко Ю. К., Лисевицкая Л. И., Фролова Л. Ш. Гиполипидемическое влияние антиоксидантов производных фенола // Бюл. экс. биол. — 1983. — № 6. — С. 49–50.
  5. Вершинин А. С., Попилов А. Н. Энтеросорбция в практике семейного врача // РМЖ. — 2008. — № 4. — С. 166.
  6. Меньшиков В. В. Лабораторные методы исследования в клинике. — М.: Медицина, 1987. — 368 с.
  7. Мирошниченко В. П., Громашевская Л. Л., Касаткина М. Г., Козачек Г. А. Определение содержание желчных кислот и холестерина в желчи // Лаб. дело. — 1978. — № 3. — С. 149–153.
  8. Определение содержания фосфолипидов // Современные методы исследования липопротеидов высокой плотности (метод. рекомен.). — М, 1983. — С. 21–23.
  9. Скакун Н. П. Определение содержания билирубина в желчи // Проблемы эндокринологии и гормонотерапии. — 1956. — № 6. — С. 53–55.
Можно быстро и просто опубликовать свою научную статью в журнале «Молодой Ученый». Сразу предоставляем препринт и справку о публикации.
Опубликовать статью
Молодой учёный №13 (147) март 2017 г.
Скачать часть журнала с этой статьей(стр. 139-142):
Часть 2 (cтр. 107-219)
Расположение в файле:
стр. 107стр. 139-142стр. 219

Молодой учёный