Динамика содержания гистамина и гепарина в форменных элементах периферической крови больных язвенной болезнью желудка и двенадцатиперстной кишки под влиянием лазеротерапии

Актуальность. Известно, что патогенез язвенной болезни (ЯБ) тесно связан с расстройством интеграционной и координационной функций нейроэндокринной системы, в которую включают парасимпатическое звено вегетативной нервной системы, симпатоадреналовую систему, систему гипоталамус-гипофиз-периферические эндокринные железы, гастроинтестинальные гормоны и другие биологически активные вещества. По мнению многих исследователей, по изменению содержания биологически активных веществ в крови, таких, как гистамин, гепарин можно судить о состоянии регуляторных систем организма, а также оценивать эффективность проводимой терапии [3, с. 352, 5, с. 10].В современной медицине достаточно широкое распространение ввиду своей эффективности получили внутри- и надсосудистые методики низкоинтенсивной лазерной терапии (ЛТ) ЯБ, т. к. кровь является средой, через которую осуществляется перенос поглощенной энергии лазерного источника в разные точки организма [1, с. 30]. Все более широко применяется и лазеропунктура — воздействие на точки акупунктуры лучом лазера через неповрежденную кожу. Целесообразность лазеропунктуры определяется ее возможностями влияния на все основные звенья патогенеза ЯБ [2, с. 12]. Несмотря на то, что ЛТ давно и успешно применяется в различных областях медицины, не все стороны действия лазерного излучения хорошо изучены. В доступной нам литературе крайне редко встречались сведения о влиянии низкоинтенсивного лазерного излучения на содержание и динамику биологически активных веществ у больных ЯБ.

Цель исследования — изучить влияние чрезкожного лазерного облучения бедренных сосудов и аурикулярных точек акупунктуры на динамику содержания биологически активных веществ в форменных элементах крови больных язвенной болезнью желудка и двенадцатиперстной кишки.

Задачи исследования. Определить уровень биологически активных веществ (гистамина, гепарина и соотношения гепарин/гистамин) в форменных элементах периферической крови здоровых и больных ЯБ люминесцентно-гистохимическими методами. Изучить динамику биологически активных веществ: гистамина, гепарина и соотношения гепарин/гистамин в форменных элементах периферической крови больных язвенной болезнью желудка и двенадцатиперстной кишки под воздействием разных методов лечения.

Материалы и методы. Исследуемые были распределены на 3 группы, сопоставимые по полу и возрасту. Основная группа — 33 больных ЯБ, которым на фоне стандартной тройной эрадикационной терапии проводилось ежедневное чрескожное облучение бедренных артерий и аурикулярных точек акупунктуры (по 8 точек на каждом ухе) с помощью установки УЛФ 01 (непрерывное излучение, длина волны 0,63 мкм, плотность мощности 0,1–10 мВт/см). Излучение гелий-неонового лазера с такими характеристиками, согласно литературным данным [4, c. 25, 6, с. 4], проникает на глубину от нескольких мм до 2–3 см, что вполне достаточно для воздействия. Для увеличения глубины проникновения лазерного излучения перед процедурой кожу над проекцией бедренной артерии в зоне облучения обезжиривали и наносили краситель метиленовый синий, растворенный в димексиде. Длительность курса лазеротерапии составляла от 5 до 14 ежедневных процедур, и проводилась до заживления язвенного дефекта по результатам контрольных ФГДС. Группу сравнения составили 22 больных ЯБ, которым проводилась такая же лекарственная терапия, но без применения лазера, и группу здоровых — 22 практически здоровых человека.

Определение концентрации биологически активных веществ в форменных элементах проводилось с использованием люминесцентных гистохимических методов. Объектом исследования служили мазки периферической крови, взятые из пальца и высушенные в струе холодного воздуха. В основной группе забор крови производился до 1 сеанса ЛТ и сразу после него, а затем через день, сразу после проведения сеанса ЛТ, на протяжении всего курса лечения. В группе сравнения и в контрольной группе мазки крови готовились однократно, через день, аналогично основной группе. Забор крови у обследуемых проводился в одно и то же время. Определение гистамина осуществлялось методом Cross [7, с. 473]. Он основан на реакции паров ортофталевого альдегида с гистамином, в результате которой образуется флуоресцирующее соединение производных имидазолилэтиламина. В качестве контроля данного метода использовалась инкубация препаратов без ортофталевого альдегида. Для выявления гепарина использовалось флуорохромирование берберин-сульфатом, взаимодействующим с сульфатными группами гепарина по Enerback [8, с. 38]. Микроспектрофлуориметрию препаратов проводили на микроскопе ЛЮМАМ И-2 с помощью насадки ФМЭЛ-1А. Интенсивность люминесценции измеряли в условных единицах по показаниям цифрового вольтметра Щ 4300. У каждого обследованного оценивали по 10 клеток крови каждого вида.

Результаты. Сравнительное исследование препаратов крови больных ЯБ и здоровых лиц выявило повышенное содержание гистамина во всех форменных элементах периферической крови больных ЯБ по сравнению с группой здоровых в среднем в 1,42 раза(табл. 1).

Таблица 1

Исходный уровень содержания гистамина вформенных элементах периферической крови обследованных лиц

Примечание: *** — p<0,001, достоверность различий по сравнению с контрольной группой.

Что касается содержания гепарина, мы выявили исходное снижение его уровня во всех форменных элементах периферической крови больных ЯБ в среднем в 1,49 раз по сравнению с группой здоровых (табл. 2). При этом содержание исследуемых биоаминов в крови пациентов основной группы и группы сравнения исходно практически не отличалось.

Исходный уровень содержания гепарина вформенных элементах периферической крови исследованных лиц

Примечание: * — p<0,05, *** — p<0,001, достоверность различий по сравнению с контрольной группой.

После семидневной лазеротерапии уровень содержания гистамина в основной группе снизился до показателей, сравнимых с группой здоровых. В нейтрофилах — с 41,24±8,48 до 30,06±5,65 у.е., в лимфоцитах — с 38,82±7,64 до 26,98±5,46 у.е., в эозинофилах/базофилах — с 57,54±9,04 до 41,25±8,90 у.е., в моноцитах — с 46,89±9,90 до 32,56±9,54 у.е, в эритроцитах — с 28,83±6,80 до 19,26±4,33 у.е., в тромбоцитах — с 30,18±6,97 до 19,75±4,29 у.е. В среднем во всех форменных элементах зарегистрировано снижение уровня гистамина в 1,48 раз. В группе сравнения к седьмому дню исследования существенных изменений не зарегистрировано, как и в группе здоровых.

Исследование влияния на динамику содержания эндогенного гепарина у больных ЯБ выявило повышение его концентрации во всех структурах периферической крови пациентов основной группы к концу наблюдения в среднем в 1,45 раз. После 7 сеансов ЛТ уровень этого биологически активного вещества достоверно увеличился в нейтрофилах с 37,12±2,91 до 55,25±3,54 у.е., в лимфоцитах — с 31,79±2,17 до 45,16±2,45 у.е., в эозинофилах/базофилах — с 47,05±4,75 до 62,12±4,28 у.е., в моноцитах — с 40,48±3,48 до 55,73±3,45 у.е., в эритроцитах и в тромбоцитах — с 24,45±2,37 до 38,28±2,86 и с 25,89±2,05 до 41,14±2,56 у.е., соответственно.

Учитывая тесные взаимоотношения между гепарином и гистамином, нами был рассчитан коэффициент соотношения гепарин/гистамин и исследована его динамика под влиянием ЛТ. У практически здоровых людей исходно соотношение гепарин/гистамин существенно превышает показатели больных ЯБ основной группы и группы сравнения — 1,63 относительно 0,90 в нейтрофилах, 1,65 и 0,81 в лимфоцитах, 1,56 и 0,81 в эозинофилах/базофилах, 1,66 и 0,86 в моноцитах, 2,10 и 0,84 в эритроцитах, 2,17 и 0,85 в тромбоцитах соответственно, т. е. в среднем в 2,12 раза. В процессе лазерной терапии у пациентов основной группы происходит нормализация (восстановление) этого коэффициента во всех форменных элементах периферической крови, в то время как в группе сравнения он практически не изменился.Нормализация физиологических равновесных взаимоотношений между двумя биологически активными веществами: гепарином и гистамином под действием ЛТ свидетельствует о восстановлении слаженности работы гуморальных регуляторных систем организма. Полученные нами результаты еще раз подтверждают регуляторное влияние низкоинтенсивного лазерного излучения на гуморальный гомеостаз больных ЯБ.

Выводы. При люминесцентно-гистохимическом исследовании периферической крови больных ЯБ желудка и двенадцатиперстной кишки наблюдается достоверное (р<0,001) повышение уровня гистамина в 1,42 раза, снижение уровня эндогенного гепарина в среднем в 1,49 раза и соотношения гепарин/гистамин в 2,12 раза во всех форменных элементах по сравнению со здоровыми людьми соответствующего возраста. Семидневный курс ЛТ по разработанной нами методике достоверно (р<0,001) приводит к снижению содержания гистамина в 1,63 раза, повышению уровня гепарина в 1,78 раза и соотношения гепарин/гистамин в 2,11 раза во всех форменных элементах периферической крови. Таким образом, уровень биологически активных веществ становится сравнимым с показателями практически здоровых людей соответствующего возраста.

Литература:

1. Клебанов Г. И. Молекулярно-клеточные механизмы лазеротерапии / Г. И. Клебанов, В. Н. Христофоров, А. Я. Грабовщинер // Пятая Всероссийская научно — практическая конференция по квантовой терапии. М.: Институт квантовой медицины и акционерное общество «МИЛТА — ПКП ГИТ». — 1999. — С. 28–32.
2. Кокуркин Г. В. Динамика клинико-нейрофизиологических показателей больных язвенной болезнью желудка и двенадцатиперстной кишки в процессе пунктурной лазеротерапии / Г. В. Кокуркин. — Автореферат диссертации …кандидата мед. наук. — Пермь. — 1993.
3. Остроносова Н. С. Гепариновый механизм действия низкоинтенсивного лазерного излучения при лечении больных бронхиальной астмой / Н. С. Остроносова // Иммунология. — 2004. — Т. 25. — С. 355–358.
4. Самосюк И. З. Акупунктура / И. З. Самосюк, В. П. Лысенюк. — М.: АСТ-пресс книга. — 2004. — 528 с
5. Софронова Е. В. Влияние лазерной терапии на качество жизни и уровень биологически активных веществ в форменных элементах крови больных стенокардией напряжения / Е. В. Софронова. — Автореферат диссертации … кандидата мед. наук. — Чебоксары. — 2007. — 23 с.
6. Якупов Р. А. Лазерная рефлексотерапия / Р. А. Якупов // Альтернативная медицина. — 2004. — № 3. — С. 3–6.
7. Cross S. A. E. A study of the methods available for the cytochemical localization of histamine by fluorescence induced with o-phthalaldehyde or acetaldehyde / S.A. E. Cross, S.W. B. Ewen, F.W. D. Rost // Histochemical Journal. — 1971. — Vol. 3. — № 6. — P. 471–476.
8. Enerback L. Cytofluorimetric quantization of 5 — hydroxytryptamine in mast cells: an improved technique for the formaldehyde condensation reaction / L. Enerback, B. Gustafson, L. Mellblom // Journal of Hystochemistry and Cytochemistry. -1977. — Vol. 25. — P.32–41.