Возрастные особенности количества тканевых тучных клеток морских свинок при аллергических реакциях анафилактического и гистаминового типа



Цель исследования: изучение особенностей, присущих тканевым тучным клеткам брыжейки тонкой кишки в норме, при общем анафилактическом и гистамином шоках морских свинок различного возраста.

Тучные клетки функционально взаимосвязаны с базофилами и нейтрофилами крови и клетками соединительной ткани. Тучные клетки защищают организм от влияния внешней среды. Участие тучных клеток в аллергических реакциях имеет важное значение. При аллергических реакциях они выполняют роль клеток мишеней. [1,3]

Несмотря на большое количество литературы посвященной изучению тучных клеток, до сих пор до конца не найдено решение проблем, связанных с патологическим, физиологическим, морфологическим особенностями тучных клеток в процессе онтогенеза

Цель работы: изучение особенностей присущих количеству тканевых тучных клеток брыжейки тонкой кишки в норме, при общем аллергическом и гистамином шоке у морских свинок различной возрастной категории.

Материалы и методы

В качестве объекта исследования была взята брыжейка тонкой кишки морских свинок различного возраста. Во время исследования были использованы аллергологический, иммунологический, патофизиологический методы

В начале исследования были изучены тучные клетки 40 интактных морских свинок. Затем были рассмотрены и подробно изучены случаи анафилактического шока у 105 особей морских свинок, из них у 81 морской свинки были проведены опыты, 24 контроль, а также у 69 морских свинок была изучена реакция на гистаминовый шок, из них на 45 особях морских свинок были проведены опыты, 24 были контрольной группой. При этом изучены особенности дегрануляции тучных клеток брыжейки тонкой кишки.

Активная сенсибилизация и общий анафилактический шок были вызваны широко распространенным способом. В качестве аллергена была использована лошадиная сыворотка. Под кожу подопытных особей по два раза в течение дня вводилось 0,02 мл лошадиной сыворотки с целью сенсибилизации.

Решающая доза специфического аллергена была введена внутривенно или в брюшную полость дозой равной 1–2 мл. Гистаминовый шок был вызван введенным под кожу (4–6 мл/кг) или внутривенным введением (0.1 мл/кг) гистамина. Тучные клетки брыжейки тонкого кишечника для изучения были фиксированы чистым спиртом и окрашены 1 % толуидин синим в 60 % спирте. Цифровые данные для подтверждения точности были обработаны методом вариации системы статистики ti2 и Р<0,05.

Результаты и обсуждения

Выявлены особенности количества и функциональной активности тучных клеток брыжейки тонкого кишечника морских свинок различного возраста в норме, общем анафилактическом и гистаминовом шоках

В жизнедеятельности организма тучные клетки имеют особое значение. Тучные клетки выполняют в организме особо важные функции. К примеру: выделяют биологически активные вещества, такие как гепарин, гистамин, серотонин, а также участвуют в поддержании гомеостаза, в регуляции микроциркуляции, в процессе иммуногенеза и фибриллогенеза, активно влияют на норму и патологию системы всех соединительных тканей. Тучные клетки активно участвуют в развитии воспалительного процесса, регуляции свертывания крови, а также в обмене жиров.

Количество тучных клеток в органах и тканях неодинаково. По результатам наших исследований частота встречаемости толстых клеток брыжейки тонкой кишки интактных морских свинок зависит от возраста. Частота встречаемости тучных клеток по ходу кровеносных сосудов в брыжейке тонкого кишечника у половозрелых морских свинок при 5х95 увеличении в поле зрения составляет 6–12, в округе 2–3клетки. Они имеют овальную или круглую форму и расположены веретенообразно по ходу кровеносных сосудов. Зернышки и тучные клетки окрашены толуидин синим в сиреневый или розовый цвет.

Количество тучных клеток в поле зрения при 100 кратном увеличении составляет 55–81, что в среднем равно 71,0±2,6. Количество тучных клеток брыжейки тонкой кишки у молодых морских свинок намного больше, чем у половозрелых особей (Рис 1). При рассмотрении брыжейки тонкой кишки месячных морских свинок количество тучных клеток в поле зрения (100 кратное увеличение) составило 84.1=1.1, у двухнедельных морских свинок этот показатель равен 136.0±6.2, а у новорожденных 268.9±11.2. (рис. 1)

Количество тучных клеток у месячных морских свинок бывает в 3.1 раза, у двухмесячных 1.9 раз, у половозрелых особей морских свинок в 3.1 раза меньше чем у новорожденных морских свинок (Р<0,05.)

Если считать, что количество тучных клеток в брыжейке тонкой кишки у новорожденных особей морских свинок составляет 100 %, то у двухнедельных особях этот показатель будет составлять 50.5 %, у месячных 31.2 %, у половозрелых особей 26.4 %. Разность цифровых данных очевидна (Р<0,05.).

Значит, чем моложе организм, тем больше тучных клеток в брыжейке тонкой кишки. Также было установлено, что насыщенность толстых клеток зернышками бывает различной и она во многом зависит от возраста особи.

Насыщенность тучных клеток зернышками у половозрелых особей бывает повышенной, а у новорожденных наоборот, т. е. здесь мы видим противоречие закономерности относительно количества тучных клеток. Эти данные совпадают с данными приводимыми в различных источниках [3. 4]. На первый взгляд, неполная насыщенность тучных клеток зернышками указывает на их недостаточную зрелость. Но вместе с тем стало очевидным, что чем меньше зернышек в тучных клетках молодых особей, тем они функционально активнее. Чем выше уровень функциональной активности, тем ниже уровень насыщенности тучных клеток зернышками. Изучение скорости дегрануляции тучных клеток при общем анафилактическом шоке показало следующие результаты: скорость дегрануляции тучных клеток брыжейки тонкой кишки зависит от возраста (таблицв № 1)

Таблица 1

Скорость дегрануляции тучных клеток брыжейки тонкого кишечника уморских свинок различного возраста при анафилактическом шоке

Возраст	Опыт	Контроль	Р<
Новорожденные	21 (15.20.80)*	6 (5.31.5)*	0.05
2-х недельные	19 (27.21.3)*	6 (6.01.1)	0.05
Месячные	20 (61.01.6)	6 (8.00.7)	0.05
Половозрелые	21 (65.02.1)	6 (7.30.7)	0.05
Общее	81	24

Средняя скорость дегрануляции тучных клеток у новорожденных морских свинок составляет 15.2±0.8 %. Этот показатель в 4.2 раза ниже показателей половозрелых морских свинок. Скорость дегрануляции тучных клеток брыжейки тонкой кишки двухнедельных морских свинок также ниже в 2.3 раза (Р<0,05). В показателях скорости дегрануляции тучных клеток брыжейки тонкой кишки месячных особей морских свинок (6.0±16 %) от показателей дегрануляции и тучных клеток половозрелых особей (65.0±2.1 %) существенной разницы не наблюдается. Это показывает, что реакция тучных клеток брыжейки тонкой кишки у месячных и половозрелых особей морских свинок на различные влияния не одинакова. То же самое явление наблюдалось в случае общего гистаминного шока (таблица № 2)

Таблица № 2

Скорость дегрануляции тучных клеток брыжейки тонкого кишечника уморских свинок различного возраста при гистаминовом шоке

Возраст	Опыт	Контроль	Р<
Новорожденные	13 (14.40.9)*	6 (4.81.1)*	0.05
2-х недельные	12 (39.01.8)*	6 (4.01.1)	0.05
Месячные	10 (50.94.0)	6 (4.81.2)	0.05
Половозрелые	10 (56.21.5)	6 (7.30.7)	0.05
Общее	45	24

Таким образом, выяснилось, что количество тучных клеток в норме и количество при ответной реакции при анафилактическом и гистаминовом шоках у морских свинок различного возраста бывает неодинаково.

Выводы:

1. Количество тучных клеток брыжейки тонкого кишечника зависит от возраста морских свинок; у молодых особей (новорожденные, двухнедельные, месячные) в брыжейке количество тучных клеток в 1.9–3.1 раза больше чем у половозрелых особей.
2. В тучных клетках брыжейки тонкого кишечника половозрелых морских свинок насыщенность зернышками больше, по сравнение с молодыми особями.
3. Дегрануляция тучных клеток брыжейки тонкого кишечника при общем анафилактическом и гистаминовом шоках резко увеличивается и такое состояние у половозрелых особей наблюдается чаще, чем у молодых особей.

Литература:

1. И. С. Гущин, В. Г. Войтенко, И. М. Петяев. О. Р. Цинколовский Активация кислородного метаболизма в процессе высвобождения гистамина из тучных клеток крыс, вызванного специфическим аллергеном, веществом 48/80 и ионофором 23187. Иммунология. 1989. — № 5. — с. 33–35.
2. Фримеев Г. (Ред.). Иммунологические методы. Москва” Медицина”. 1987, 472с.
3. Ямщикова О. А., Прозоровский Н. С.,Гущин И. С. Условия проявления модулирующего действия тучных клеток на пролиферациюспленоцитовкрыс// Иммунология, 1991 № 6 — с. 27–30.
4. Vorney V. A., Jacobson M., Gaga M. et al. Effects grass pollen immunotherapy on enfaneons mast cell sub-types and immediate senivity to allergen and histamine //Thoran. 1992. N 47. — P. 47–48.