Библиографическое описание:

Поздняков Д. И., Рыбалко А. Е. Влияние апигенина на антитромботическую функцию сосудистого эндотелия на фоне фокальной ишемии головного мозга // Молодой ученый. — 2016. — №5. — С. 226-228.



Проведено исследование о влиянии апигенина — соединения флавоноидной структуры на антитромботическую функцию сосудистого эндотелия при ишемическом повреждении головного мозга. Эксперимент выполнен на крысах — самцах линии Wistar. Ишемию головного мозга моделировали правосторонней окклюзией средней мозговой артерии. Антитромботическую функцию эндотелия оценивали на модели коллаген — индуцированной агрегации тромбоцитов. Полученные в результате проведения эксперимента данные показывают, что на фоне ишемии головного мозга наблюдается повышение степени (на 80,6 % (P>0,05)), скорости (на 125,4 % (P>0,05)) и показателя (на 47,1 % (P>0,05)) агрегации тромбоцитов. Применение апигенина позволило скорректировать возникшую эндотелиальную дисфункцию. При этом наблюдалось снижение, относительно группы животных негативного контроля степени агрегации — на 69,6 % (P>0,05), скорость и показатель агрегации тромбоцитов — в 2,27 (P>0,05) и в 2,01 раза (P>0,05) соответственно. При этом эффект от применения апигенина был сопоставим с таковым от применения препарата сравнения — сулодексида.

Ключевые слова: эндотелий, ишемия, агрегация тромбоцитов, апигенин.

Ишемический инсульт — серьезное патологичекое состояние с высоким уровнем летальности и инвалидизации населения. Патогенез ишемического повреждения головного мозга сложен и многогранен. По литературным данным одним из ведущих патогенетических звеньев ишемического инсульта являются процессы тромбообразования [3]. При этом снизить повышенный тромбогенный потенциал крови возможно нормализацией функциональной активности сосудистого эндотелия в норме продуцирующего значительное количество антиагрегантных факторов, и дисфункция которого наблюдается на фоне ишемии головного мозга [1, 2]. В связи с этим коррекция дисфункции эндотелия может считаться одним из перспективных направлений терапии ишемических повреждений головного мозга, а поиск веществ, обладающих эндотелитропной активностью становиться актуальной задачей современной медицинской химии и фармакологии [1].

Цель исследования: изучить влияние апигенина на антитромботическую функцию сосудистого эндотелия на фоне фокальной ишемии головного мозга

Материалы иметоды: эксперимент выполнен на 50-ти крысах — самцах линии Wistar массой 240–260 грамм, разделенных на 5 равных экспериментальных групп, по 10 особей в каждой. Перед началом исследования животные прошли 14-ти дневный карантин. Содержание, и все проводимы с животными манипуляции, соответствовали требованиям Европейской конвенции по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и других научных целей (Strasbourg, 22 June, 1998.).

Первую экспериментальную группу составили ложнооперированные животные (Л/О). У четырех оставшихся групп животных воспроизводили ишемическое повреждение головного мозга (ИГМ). ИГМ моделировали путем окклюзии правой средней мозговой артерии (СМА), методом коагуляции (с помощью десмокоагулятора собственной конструкции) под местом пересечения СМА с обонятельным трактом [1]. В качестве препарата сравнения использовали сулодексид (Вессел Дуэ Ф, Alfa Wasserman, Италия). Исследуемое соединение — апигенин и препарат сравнения вводились per os непосредственно после оперативного вмешательства и на протяжении 3-х дней ишемического периода в дозе: апигенин — 100 мг/кг и сулодексид — 30 ЕВЛ (единицы высвобождения липопротеинлипазы). Группа крыс негативного контроля (НК) получала 0,9 % раствор хлористого натрия в эквиобьемном количестве. По истечении указанного временного периода проводили оценку влияния исследуемых соединений на антитромботическую функцию сосудистого эндотелия.

Антитромботическую функцию эндотелия оценивали по способности тромбоцитов к агрегации. В качестве индуктора агрегации использовали коллаген (1мг/мл). Процесс агрегации тромбоцитов регистрировали на двухканальном лазерном анализаторе агрегации АЛАТ-2 «БИОЛА» (НПФ «БИОЛА», Россия), методом определения относительного среднего размера агрегатов. При этом определяли степень, скорость и показатель агрегации тромбоцитов. Результаты опытов обрабатывали методом вариационной статистики с использованием пакета прикладных программ STATISTICA 6.0 (StatSoft, Inc., США для операционной системы Windows). Вычисляли среднее значение и стандартную ошибку среднего значения (M±m). Полученные данные проверяли на нормальность распределения с использованием критерия Шапиро — Уилка. В случае нормального распределения данных для сравнения средних использовали t-критерий Стьюдента. При ненормальном распределении результатов эксперимента дальнейшую статистическую обработку данных проводили с использованием U- критерия Манна-Уитни.

Результаты иобсуждение.

Анализируя показатели коллаген — индуцированной агрегации тромбоцитов у ложнооперированных крыс были получены следующие результаты. Степень агрегации тромбоцитов у данной группы крыс составляла 1,488±0,831 ус.ед., скорость и показатель агрегации тромбоцитов принимали значения 1,207±0,798 ус.ед и 1,344±1,037 ус.ед. соответственно (Рис.1).

В результате правосторонней окклюзии средней мозговой артерии у группы животных негативного контроля наблюдалось повышение степени агрегации тромбоцитов, относительно Л/О крыс на 80,6 % (P>0,05). Скорость и показатель агрегации тромбоцитов, у данной группы животных, также были существенно выше, чем у ложнооперированных крыс. При этом скорость агрегации тромбоцитов увеличилась на 125,4 % (P>0,05), а показатель агрегации на 47,1 % (P>0,05).

Подобные изменения в состоянии антитромбогенного потенциала сосудистого эндотелия, вероятно, могут быть связаны, с развитием в условиях ИГМ эндотелиальной дисфункции, сопровождаемой повышенной продукцией эндотелием сосудов тромбогенных факторов (эндотелин-1, тромбоксан А2, ингибитор тканевого активатора плазминогена и д. р.) и снижением образования их антагонистов (оксид азота, простациклин, тканевой активатор плазминогена и д. р.). В результате возникающий дисбаланс в системе про/антиагреганты приводит к повышению образования тромбоцитарных агрегатов.

Безымянный.png

Рис. 1. Изменение антитромботической функции эндотелия на фоне ишемии головного мозга и при применении исследуемого соединения (* — достоверно относительно ложнооперированных крыс (P>0,05), # — достоверно относительно группы животных негативного контроля (P>0,05))

Применение сулодексида способствовало снижению степени агрегации тромбоцитов, относительно группы животных негативного контроля на 44,6 % (P>0,05), в то же время данный показатель в сравнении с Л/О группой крыс увеличился лишь на 25,3 %. Аналогично изменялись значения скорости и показателя агрегации тромбоцитов на фоне введения сулодексида. При этом скорость агрегации в сравнении с НК группой животных снизилась на 32,9 % (P>0,05), а показатель агрегации уменьшился в 1,52 (P>0,05) раза и статистически значимо не отличался от значения ложнооперированных крыс. Полученные данные согласуются с ранее проведенными исследованиями и подтверждают наличие у сулодексида позитивного эндотелиотропного действия [4].

На фоне введения апигенина степень агрегации тромбоцитов относительно НК группы крыс статистически значимо снизилась на 69,6 % (P>0,05) и практически не отлилась от значения Л/О группы животных. Скорость агрегации тромбоцитов также претерпела существенные изменения. В сравнении с группой крыс негативного контроля данный показатель снизился в 2,27 (P>0,05) раза (Рис.1). В то же время относительно группы животных, получавших сулодексид, скорость агрегации тромбоцитов, при применении апигенина, уменьшилась на 71 % (P>0,05). У крыс, получавших апигенин показатель агрегации тромбоцитов составил 0,982±0,03 усл. ед, что было меньше аналогичного значения группы НК животных в 2,01 (P>0,05) раза и крыс и статистически значимо не отличался от показателя агрегации ложнооперированной группы животных. Полученные данные, по всей видимости, могут быть связаны с тем, что апигенин проявляя антиоксидантную и противовоспалительную активность, способен нивелировать процесс окислительной модификации оксида азота в пероксонитирит, нормализуя тем самым функциональную активность эндотелия сосудов с восстановлением его атитромбогенного потенциала [5].

Выводы:

  1. Ишемия головного мозга, смоделированная путем правосторонней окклюзии средней мозговой артерии, приводит к сбою антитромботической функции эндотелия.
  2. Применение апигенина позволило улучшить функциональное состояние сосудистого эндотелия и нормализовать продукцию эндотелием антиагрегантных факторов, что нашло отражение в снижении, относительно группы крыс негативного контроля, степени агрегации — на 69,6 % (P>0,05), скорости и показателя агрегации тромбоцитов — в 2,27 (P>0,05) и в 2,01 (P>0,05) соответственно. При этом фармакологический эффект от применения апигенина был сопоставим с таковым от применения препарата сравнения — сулодексида.

Литература:

  1. Воронков А. В., Поздняков Д. И., Мамлеев А. В. Изучение вазодилатирующей и антитромботичекой функций эндотелия мозговых сосудов на различных моделях его ишемического повреждения // Современные проблемы науки и образования. — 2015. — № 5; URL: http://www.science-education.ru/128–22406
  2. В. М. Черток, А. Е. Коцюба. Эндотелиальный (интимальный) механизм регуляции мозговой гемодинамики: трансформация взглядов // Тихоокеанский медицинский журнал. — 2012. — № 2. — с. 17–26.
  3. Гусев Е. И., Мартынов М. Ю., Камчатнов П. Р. Ишемический инсульт. Современное состояние проблемы. Доктор.Ру 2013; 5(83): 7–12.
  4. Изучение влияния сулодексида на эндотелий-зависимую вазодилатацию мозговых сосудов у животных со стрептозотоцин-индуцированным сахарным диабетом // Сахарный диабет, № 3, 2011. с.12–15.
  5. Zhang T, Su J, Guo B et al. Apigenin protects blood-brain barrier and ameliorates early brain injury by inhibiting TLR4-mediated inflammatory pathway in subarachnoid hemorrhage rats // Int Immunopharmacol. 2015 Sep; 28 (1): 79–87.
Основные термины: агрегации тромбоцитов, показатель агрегации тромбоцитов, головного мозга, сосудистого эндотелия, функцию сосудистого эндотелия, ишемии головного мозга, степени агрегации, негативного контроля, скорость агрегации тромбоцитов, степени агрегации тромбоцитов, показателя агрегации тромбоцитов, группы животных, антитромботическую функцию сосудистого, средней мозговой артерии, животных негативного контроля, группы животных негативного, фоне ишемии головного, крыс негативного контроля, Степень агрегации тромбоцитов, Процесс агрегации тромбоцитов

Обсуждение

Социальные комментарии Cackle